Utilisation du diagnostic PCR

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La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) en biologie moléculaire est une méthode expérimentale de détection des virus. Il vous permet d’augmenter considérablement la concentration de certains fragments d’acide nucléique (ADN) dans des échantillons de matériel biologique, ce qui permet de les déterminer (reconnaître) et de les compter.

L'analyse est effectuée comme suit. Du matériel génétique (un échantillon de sang), qui peut potentiellement inclure le gène souhaité, est introduit dans le tube. Des amorces sont également placées - des segments synthétisés chimiquement d’une petite longueur du gène souhaité.

Un ADN ou une ARN polymérase est également ajouté dans le vaisseau, ce qui permet d’aligner une chaîne d’acides nucléiques complètement identique à celle de l’origine. La composition résultante est injectée et un ensemble de quatre nucléotides libres - un matériau de construction spécial pour l'ARN ou l'ADN, dont l'un contient des particules de phosphore radioactives.

Le mélange obtenu est chauffé à 95–96 ° C. C'est pourquoi deux hélices d'ADN, qui sont normalement entrelacées, sont tissées. Ensuite, le médicament est refroidi et les amorces se fixent à la région souhaitée du génome viral, empêchant l’ARN (ou l’ADN) de former à nouveau une double hélice.

En cours de refroidissement, la polymérase recherche une chaîne de nucléotides libre. Pour le fonctionnement de cette enzyme, une seule chaîne de nucléotides est nécessaire. Comme la polymérase glisse le long de la chaîne d’ADN (comme un anneau sur une corde), elle n’est pas capable de travailler sur une double hélice.

Ensuite, un cycle de chauffage répété est effectué, ce qui permet de séparer les chaînes de nucléotides. À chacun de ces cycles de PCR, la quantité dans l'échantillon du gène d'hépatite souhaité augmente de manière exponentielle, et le reste du matériel génétique est produit (se développe) de manière linéaire.

Après purification de la solution à partir des résidus de nucléotides et séparation par électrophorèse des chaînes d'ADN par le paramètre de poids moléculaire, on peut facilement déterminer s'il existe ou non un gène souhaité dans l'échantillon étudié.

Avantages de la PCR

Les tests de laboratoire utilisant la PCR permettent d'obtenir encore plus d'informations que la présence de l'ARN du virus. En déterminant le paramètre du niveau de rayonnement radioactif, il est possible d'identifier la quantité de matériel génétique qui était à l'origine contenue dans l'échantillon étudié. Dans le cas de l'hépatite B, déterminez l'indicateur de charge virale

Un autre avantage de cette méthode est le très haut degré de sensibilité de la réaction CR. Il est beaucoup plus élevé que les méthodes classiques de détection de virus. Idéalement, pour identifier le gène souhaité, pour la PCR, un seul virus dans l'échantillon suffit.

De plus, la PCR est complètement spécifique. Ses amorces sont conçues de manière à correspondre pleinement aux régions uniques des gènes souhaités qu'aucune autre séquence ne possède. Comme les empreintes digitales sont uniques, il existe des séquences de nucléotides uniques dans chaque gène.

Analyse qualitative de la PCR

L'analyse qualitative vous permet d'identifier uniquement la présence d'un virus dans le sang. Ce test doit être effectué chez tous les patients chez qui des anticorps anti-hépatite C ont été détectés dans le sang. Il ne peut en résulter que l'une des deux valeurs suivantes: «détecté» ou «non détecté». Chez une personne en bonne santé, la norme (valeur de référence) doit être "non détectée".

Il existe une interprétation particulière de ces résultats de la recherche qualitative:

  • Le résultat est "détecté". Cela signifie qu'un fragment d'ARN spécifique au virus de l'hépatite C a été trouvé dans l'échantillon de matériel biologique prélevé analysé. Par conséquent, le patient est infecté par le virus de l'hépatite C. Si le résultat d'une PCR de haute qualité est «détecté», cela indique que le virus se multiplie et à ce moment, il infecte de nouvelles cellules du foie dans le corps.
  • Le résultat est "non détecté". Un tel verdict indique que dans l'échantillon de matériel biologique obtenu dans ce laboratoire et analysé, aucun fragment d'ARN spécifique du virus de l'hépatite C n'a été trouvé, mais que la concentration en ARN de l'infection par l'agent pathogène était inférieure à la limite de sensibilité du test.

Dans la phase aiguë de l'ARN du virus de l'hépatite C, de telles études qualitatives par la méthode PCR peuvent être détectées dès 1-2 semaines immédiatement après l'infection du corps, c'est-à-dire bien avant l'apparition des anticorps anti-hépatite.

Des résultats de test inexacts de cette étude peuvent être obtenus par:

  • biomatériau contaminé;
  • la présence d'héparine dans le sang du patient;
  • la présence dans l'échantillon de substances chimiques ou protéiques (inhibiteurs) agissant sur les divers composants de la PCR.

Pour effectuer une analyse qualitative de la PCR, aucune préparation spéciale du patient pour l’étude n’est requise. Le sang veineux est utilisé comme matériau.

Evaluation des résultats

Les tests PCR de haute qualité ont un certain degré de sensibilité et, en fonction de la précision des recherches et du niveau d’équipement du laboratoire, ils peuvent varier de 10 à 500 UI / ml.

Cela signifie que si le virus dans l'échantillon de sang est présent à une très faible concentration (inférieure à la valeur seuil de la sensibilité de ce laboratoire), le résultat peut alors être déterminé comme "non détecté" chez un patient patient. Pour cette raison, lors de l'analyse qualitative de la PCR avec un faible niveau de virémie (faible concentration de virus), par exemple, pour les patients sous traitement antiviral, il est très important de connaître le seuil de sensibilité de ce système de diagnostic.

Variantes de systèmes de diagnostic

Pour contrôler la réponse virologique, il est recommandé d'utiliser des systèmes de diagnostic avec un seuil de sensibilité d'au moins 50 UI / ml pour un traitement antiviral. Ces critères sont satisfaits, par exemple, avec les analyseurs Cobas Ampicolor HCV-Test (exacts à 50 UI / ml), ainsi qu'avec l'ARN RealBest HCV (avec une sensibilité de 15 UI / ml).

Selon les recommandations de l’OMS, pour établir un diagnostic définitif de l’hépatite C, il est nécessaire de se baser uniquement sur la base d’une triple détection du RNA du virus C dans les échantillons de sérum du patient, en l’absence d’autres variétés de marqueurs de l’hépatite.

Outre les méthodes de PCR, un test TMA (méthode d'amplification de la transcription) est également utilisé pour détecter l'ARN du VHC chez les patients. Son seuil de sensibilité est optimal (5 à 10 UI / ml), mais dans notre pays une telle méthode de test n’est pas encore très répandue.

Gamme de modifications de virus détectables

Une telle détermination qualitative dans le sérum de la présence d'ARN du virus de l'hépatite C permet de déterminer plusieurs génotypes de ce virus. Actuellement, la science connaît plus de six génotypes de ce virus, ainsi que près de 10 sous-types de cette maladie.

Dans notre pays, les virus communs 1, 2, 3 génotypes. Les laboratoires peuvent détecter les génotypes suivants: 1a et 1b, 2a, 2b et 2c, ainsi que 3, 4, 5a et 6, quels que soient leurs sous-types. Pour toutes les modifications de virus, la spécificité de la détection est de 100%.

Analyse quantitative par PCR

À l'aide d'un test PCR quantitatif, on détermine le niveau de concentration du virus de l'hépatite dans des échantillons de sang (charge virale). Ce test de virémie (concentration en virus) vous permet de déterminer le nombre d'unités d'un certain matériel génétique (l'ARN le plus viral), qui est détecté dans une certaine quantité. Dans ce cas, déterminez sa concentration en 1 ml, ce qui correspond à 1 cu. voir

Les paramètres quantitatifs de l'analyse sont exprimés sous forme de chiffres; à cet effet, les unités internationales (UI) par millilitre (ml), appelées UI / ml, sont utilisées comme unités de mesure. Or, dans certains laboratoires, la quantité de virus peut être déterminée dans d'autres unités: le nombre de copies par ml est indiqué en copies / ml.

  • Dates: pour l’hépatite C, une telle analyse quantitative de la PCR est effectuée immédiatement avant le début du traitement. Puis les 1ère, 4ème, 12ème et 24ème semaines. L'évaluation à la 12e semaine est indicative, elle permet de déterminer l'efficacité du traitement.
  • Préparation à l'analyse. Pour effectuer une analyse quantitative de la PCR, aucune préparation spéciale du patient pour l'étude n'est requise. Une demi-heure avant l'échantillonnage ne devrait pas fumer. Le sang veineux est utilisé comme matériel de laboratoire.

Evaluation des résultats

Pour différents systèmes de test de laboratoire, il existe différents facteurs de conversion pour cet indicateur en UI / ml. En moyenne, ils prennent un paramètre de conversion, dans lequel 4 copies / ml = 1 UI / ml. Ainsi, si le laboratoire donne le résultat de l'analyse PCR, 2,4 * 10 6 copies / ml, ce paramètre doit être divisé en 4 et nous obtiendrons 6 * 10 5 UI / ml.

Une charge de 800 000 UI / ml est considérée comme élevée, ce qui correspond approximativement à 3 000 000 copies / ml. Selon certains auteurs, une faible virémie correspond aux paramètres de la PCR quantitative inférieurs à 400 000 UI / ml.

À la suite du test quantitatif, les résultats finaux peuvent être fournis non pas sous forme de valeur numérique, mais: «en dessous de la plage de mesure» ou «non détectée».

  • Evaluation: "en dessous de la plage de mesure." Cela suggère que le test quantitatif n'a pas pu détecter l'ARN du virus de l'hépatite C, mais que le virus lui-même est présent dans le corps à de très faibles concentrations. Ceci est mis en évidence par un test qualitatif supplémentaire confirmant la présence du virus.
  • Note: non détecté. Ce résultat indique que le test quantitatif n'a pas été trouvé dans l'échantillon d'ARN du virus.

Le paramètre de la charge virale, tout d’abord, détermine le degré de contagiosité de la maladie, le niveau de "contagiosité" du patient. Plus la concentration de virus du patient est élevée, plus grande est la probabilité de le transmettre à d’autres personnes. Par exemple, lors d'un rapport sexuel avec une personne malade ou verticalement. Cet indicateur quantitatif permet également de déterminer l'efficacité du traitement du patient.

Effectuer une analyse quantitative du CCP est important pour la thérapie antivirale, en évaluer le succès et planifier la durée du cours. Ainsi, avec une réponse rapide du corps au traitement et un faible degré de virémie, la durée du traitement peut être raccourcie.

Si le paramètre de PCR quantitative est lentement réduit, le traitement antiviral doit être prolongé ou modifié. Si le niveau de charge virale est faible, il s'agit d'un facteur favorable au traitement, mais s'il est élevé, la méthode de traitement utilisée est inefficace et les médicaments ou les méthodes d'utilisation doivent être modifiés.

Analyse PCR de l'hépatite

PCR pour l'hépatite C

  1. ARN de l'hépatite C ("PCR qualitative") - la détection dans le test sanguin est une preuve d'hépatite C aiguë ou chronique. Elle est déterminée à partir de la 2ème semaine de l'infection, apparaît avant l'anti-VHC, ce qui vous permet de diagnostiquer la maladie à un stade précoce. L'ARN est déterminé chez les patients présentant des cliniques d'hépatite aiguë et chez ceux présentant des résultats positifs pour l'hépatite.
  2. ARN de l'hépatite C («PCR quantitative») - la charge virale est l'un des indicateurs de l'efficacité du traitement antiviral et de son évaluation (par le changement de niveau par rapport à la valeur initiale). La caractérisation quantitative du contenu en ARN de l'hépatite C est importante pour évaluer l'efficacité du traitement antiviral et a une signification pronostique pour déterminer la chronicité. Les patients à charge virale élevée (forte quantité d’ARN) avant traitement réagissent moins bien au traitement.
  3. ARN de l'hépatite C (génotypes 1, 2, 3) - le type de tactique de traitement et son efficacité dépendent du type. La maladie causée par le virus de génotype 1 est la plus défavorable en ce qui concerne l’efficacité du traitement. Selon les recommandations actuelles, un test sanguin pour le génotypage de l'hépatite C devrait être effectué sur des patients avant le début du traitement antiviral.
  4. ARN de l'hépatite C (génotypage étendu 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - Les sous-types la, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a circulent en Russie. L'hépatite C, causée par les virus de génotype 1 et 4, est la plus défavorable pour le pronostic.
  5. PCR par ultrasons de l'hépatite C (méthode qualitative) - l'analyse est utilisée pour diagnostiquer la maladie aux premiers stades de l'infection, elle est optimale pour tester le sang d'un donneur et évaluer la réponse au traitement antiviral. Cette étude, même sans détection d'anticorps anti-virus de l'hépatite C, est recommandée chez les patients présentant une maladie du foie de cause non précisée, un déficit immunitaire acquis ou un traitement immunosuppresseur.
  6. La PCR ultra-sensible pour l'hépatite C (méthode quantitative) est un test unique à haute sensibilité (10 UI / ml) permettant de déterminer l'ARN du virus de l'hépatite C en termes quantitatifs. L'étude est utilisée pour surveiller l'efficacité du traitement.

PCR pour l'hépatite B

  1. L'ADN de l'hépatite B (analyse qualitative) est un indicateur de la multiplication du virus de l'hépatite B. Il apparaît en premier dans le sang, en moyenne, un mois après l'infection. Dans certains cas, c'est le seul marqueur d'infection par le VHB latent. La détermination de l'ADN d'un virus permet de diagnostiquer l'hépatite B causée par des souches mutantes, ce qui ne révèle pas d'autres marqueurs de l'infection.
  2. ADN de l'hépatite B (analyse quantitative) - la concentration en ADN (charge virale) est l'un des tests permettant de déterminer le stade de l'hépatite B chronique et le critère d'efficacité du traitement antiviral. L'analyse est effectuée avant et pendant le traitement.
  3. Le génotypage de l'hépatite B - les maladies causées par différents génotypes du virus peuvent varier en termes d'évolution clinique et de résultats. L'hépatite B, causée par un virus de génotype C, est plus susceptible de suivre une évolution chronique et présente un risque élevé de transformation en cirrhose du foie ou en carcinome hépatocellulaire. Les patients infectés par le virus de génotype A répondent mieux au traitement.
  4. PCR par ADN ultrasensible pour l'hépatite B (méthode qualitative) - ils sont soumis à la détection précoce de la maladie. Très instructif dans l'étude des donneurs de sang. Il peut être utilisé pour confirmer l’élimination spontanée ou induite par le traitement du virus du corps humain.
  5. PCR ultra-sensible pour l'hépatite C (méthode quantitative) - diagnostic de l'ADN du virus de l'hépatite B en termes quantitatifs. L'analyse est prise pour évaluer l'efficacité du traitement.
  6. Détermination des mutations de résistance aux médicaments antiviraux lamivudine, telbivudine, entécavir, adéfovir, ténofovir (remise avec l'analyse de "l'ADN de l'hépatite B quantitatif"). Il est nécessaire de confier l'analyse aux patients atteints d'hépatite B chronique avant de commencer un traitement antiviral et tout en prenant des médicaments. Le résultat contient des informations sur la présence d'une résistance du virus de l'hépatite B aux médicaments antiviraux:
    • Virus R résistant aux antiviraux (on trouve des mutations de la résistance à ce médicament);
    • S - le virus de l'hépatite B est sensible au médicament (valeur normale, les mutations de résistance ne sont pas détectées);
    • I - l'agent infectieux en cause peut développer une résistance à ce médicament.

Le coût des tests sanguins et de la PCR pour l'hépatite C

L'hépatite C est une pathologie inflammatoire dans laquelle les cellules du foie sont touchées. La maladie se développe à la suite de la pénétration du virus de l'hépatite C (HVC) dans le corps humain.

La forme de la maladie peut être aiguë ou chronique.

Le plus souvent, les symptômes de la forme aiguë de la pathologie sont absents chez la plupart des patients. Parfois, la maladie s'accompagne de sensations douloureuses dans l'abdomen, d'une diminution des performances, d'une fatigue accrue, d'une perte d'appétit, d'une teinte foncée de l'urine, d'une décoloration des matières fécales, d'une jaunissement de la peau et des muqueuses, de douleurs articulaires. Ces symptômes surviennent généralement 6 à 8 semaines après l'infection, mais peuvent apparaître après six mois.

Avec le développement de tels phénomènes, il est nécessaire de contacter une institution médicale et de procéder à un examen approfondi de tout l'organisme. Dans le cadre d'un examen médical, un test sanguin de recherche de l'hépatite C est effectué.

Aujourd'hui, avec l'aide des techniques de diagnostic modernes, cette pathologie peut être identifiée au stade initial de développement, ce qui augmente considérablement les chances d'une guérison complète de la maladie.

Les groupes de personnes suivants sont requis pour le dépistage de l'hépatite C:

  • les femmes dans la période de porter un enfant;
  • personnes présentant des signes d'hépatite;
  • personnel médical;
  • donneurs potentiels d'organes et de sang;
  • toxicomanes, personnes infectées par le VIH, vie privée intime.

Liste des études requises

Quels tests devrais-je passer pour l'hépatite C? Pour diagnostiquer avec précision la maladie, identifier ses causes et déterminer l’état du parenchyme hépatique, les études suivantes sont nécessaires:

  • analyses générales d'urine et de sang;
  • analyse biochimique du sang;
  • Analyse PCR;
  • test sanguin pour la détection des anticorps anti-HVC;
  • un test sanguin pour les anticorps existants à ses propres cellules hépatiques;
  • biopsie du foie.

Le décodage des tests sanguins de dépistage de l'hépatite C est effectué par un spécialiste. Examinez chaque méthode de recherche plus en détail, et nous comprendrons quelle analyse de l’hépatite C est la plus précise.

Analyse générale

Lorsque vous effectuez une analyse sanguine générale de l’hépatite C, vous pouvez évaluer l’état du patient. Les modifications des paramètres sanguins ne sont pas perçues comme des symptômes spécifiques de l'hépatite. Cependant, avec cette maladie, il existe des troubles tels que:

  • diminution de la concentration en hémoglobine, plaquettes et leucocytes;
  • augmente le contenu des lymphocytes;
  • la coagulation du sang est violée;
  • la vitesse de sédimentation des érythrocytes (ESR) augmente.

L'analyse générale de l'urine permet de détecter dans sa composition l'urobéline - un pigment biliaire présent dans l'urine à la suite d'un dysfonctionnement du foie.

Analyse biochimique

L'analyse biochimique du sang dans l'hépatite C permet d'identifier des troubles tels que:

  • taux élevés d'enzymes hépatiques (alanine transaminase - ALT et aspartate aminotransférase - AST), qui pénètrent dans le sang lorsque les hépatocytes sont endommagés. Dans un état normal, ces indicateurs pour les hommes ne devraient pas dépasser 37 UI / l, pour les femmes - pas plus de 31 UI // l. Une augmentation de la concentration d'ALAT et d'AST dans l'hépatite C asymptomatique est souvent le seul symptôme de cette maladie. En outre, la phosphatase alcaline de glutamyl transpeptidase dans le sang augmente (normalement pas plus de 150 UI / l).
  • la teneur en bilirubine (générale et directe) dans le sang est dépassée. Si le taux de pigment jaune dans le sérum dépasse 27 à 34 µmol / l, il se produit une jaunisse (jusqu’à 80 µmol / l sous forme douce, 86 à 169 µmol / l - modérée, supérieure à 170 µmol / l - sous forme sévère).
  • Le niveau d'albumine est abaissé, la concentration de gamma globulines, au contraire, est augmentée. Les gamma globulines sont constituées d'immunoglobulines - des anticorps qui protègent l'organisme contre les substances pathogènes.
  • augmentation de la concentration de triglycérides dans le sang.

Test PCR

En utilisant la technique de PCR, il est possible de diagnostiquer l'agent causal de la maladie. Cette analyse permet de détecter un virus dans le sang, même si sa quantité est minimale. L’analyse PCR de l’hépatite C permet de déterminer l’infection existante dans le sang 5 jours après l’infection, c'est-à-dire bien avant l’apparition des anticorps.

Si le résultat d'un test sanguin de recherche de l'hépatite C par PCR est positif, cela indique la présence d'une infection active dans le corps. En utilisant cette méthode, vous pouvez effectuer une étude qualitative et quantitative de l'ARN de HVC.

Au cours de l'analyse qualitative de la PCR pour l'hépatite C, il est possible de détecter un virus existant dans le corps humain.

Cette procédure de diagnostic est effectuée si un anticorps anti-HVC est détecté dans le sang.

Le déchiffrement de l'analyse de l'hépatite C contient des informations selon lesquelles une infection a été détectée ou n'a pas été détectée dans le corps. Normalement, aucune substance pathologique ne se trouve dans le sang.

Si le test de l'hépatite C est positif, cela signifie que l'agent pathogène se divise en permanence et infecte les cellules du foie.

Les résultats de cette analyse peuvent être peu fiables, il est possible dans les cas suivants:

  • biomatériau contaminé utilisé;
  • en présence d'héparine dans le sang;
  • en présence de substances chimiques ou protéiques (inhibiteurs) dans le biomatériau étudié affectant les éléments de la PCR.

L'analyse quantitative de l'hépatite C donne des informations sur la quantité de virus contenue dans le sang, c'est-à-dire détermine la charge virale. Par ce concept, on entend le volume d'ARN de HVC présent dans le sang (par exemple, en 1 ml). Dans l'interprétation de l'analyse quantitative de l'hépatite C, cette valeur est exprimée en équivalent numérique, mesurée en UI / ml.

Le sang pour la PCR pour l'hépatite C est prélevé avant les mesures thérapeutiques. Après l'analyse est effectuée à 1, 4, 12 et 24 semaines. L’étude de la semaine 12 est indicative et vise à évaluer l’efficacité des procédures médicales.

Si le test de dépistage de l'hépatite C pendant la grossesse est positif et que les valeurs de la charge virale sont dépassées, le risque de transmission d'agents pathogènes de la mère malade à l'enfant augmente plusieurs fois. De plus, avec des valeurs de charge virale élevées, la mise en œuvre de mesures thérapeutiques est difficile.

Selon la transcription des tests d'hépatite C, si la charge virale dépasse 800 000 UI / ml, elle est élevée. Si les chiffres sont inférieurs à 400 000 UI / ml, le niveau de charge virale est considéré comme faible.

L'analyse de l'hépatite C par PCR est considérée comme la plus précise et présente plusieurs avantages par rapport aux autres options de recherche, à savoir:

  • diagnostic direct de l'agent causal de la maladie. Lors de la réalisation d'études traditionnelles sont déterminées par la présence de marqueurs de protéines qui sont des déchets de pathogènes. Cela indique seulement que l'infection est présente dans le sang. Lors du test d'hépatite C par PCR, il est possible de déterminer le type d'agent pathogène présentant une pathologie dangereuse.
  • spécificité de la technique. Au cours de cette procédure, une région d'ADN unique est déterminée dans le biomatériau qui correspond à un seul type d'agent pathogène. Cela minimise la probabilité de faux résultats.
  • haute sensibilité. Lorsque vous effectuez une analyse PCR, vous pouvez détecter la quantité minimale de virus. Ceci est important si des substances pathogènes sous condition sont identifiées et ne constituent une menace que si leur niveau augmente.
  • Lors de l'utilisation de cette technique dans un échantillon du biomatériau, plusieurs agents pathogènes peuvent être détectés à la fois.
  • peut détecter des infections cachées. En outre, l’analyse permet de diagnostiquer des microorganismes pathogènes qui vivent à l’intérieur des cellules et présentent une grande variabilité antigénique.

Si les résultats du test sont positifs, des traces du virus sont trouvées dans le biomatériau, le réseau est infecté par le corps.

Une analyse PCR négative pour l'hépatite C signifie qu'il n'y a aucune trace d'infection dans le biomatériau.

Étude immunologique

Cette méthode vous permet d'identifier des anticorps dirigés contre tous les types de virus de l'hépatite, ainsi que des anticorps dirigés contre les cellules hépatiques de votre propre corps, dont l'apparition contribue au développement de l'hépatite auto-immune.

Les résultats obtenus au cours de l’étude sont pertinents pour une période de 3 mois. Vous devez alors redonner du sang pour l’hépatite C.

Il est également possible d'effectuer une étude express à l'aide de bandelettes réactives spéciales. Cette analyse permet de déterminer les anticorps anti-virus C dans la composition du sang et de la salive.Cette procédure peut être effectuée indépendamment, à domicile.

Biopsie du foie

Pour effectuer une telle analyse, un élément du parenchyme hépatique est prélevé et un examen histologique du biomatériau obtenu est effectué. Cela vous permet d'évaluer l'état du corps: identifier les foyers inflammatoires, nécrotiques, le stade de la fibrose, etc.

Aujourd'hui, des tests remplaçant l'analyse histologique du parenchyme hépatique sont utilisés.

Pour évaluer le stade des lésions hépatiques et l'intensité du processus inflammatoire, des biomarqueurs sanguins veineux spécifiques sont utilisés. En utilisant FibroTest, vous pouvez évaluer le degré de croissance du tissu fibreux.

Lors de l'exécution d'Actitest, vous pouvez obtenir des informations sur l'intensité des processus pathologiques dans le parenchyme hépatique. Steatototesta peut diagnostiquer les tissus adipeux du foie et évaluer l’ampleur de ce processus. Fibromax comprend tous les tests ci-dessus et peut inclure d'autres études.

Préparation à l'étude

Quels tests sont effectués pour l'hépatite C et comment avons-nous découvert tel ou tel type de recherche. Il est également important de savoir comment se préparer à l'analyse.

Pour obtenir des résultats fiables, il est recommandé de respecter les exigences suivantes:

  • Les tests d’hépatite C doivent être pris le matin, à jeun. La dernière fois, les aliments doivent être consommés au moins 8 heures avant l'étude.
  • Le biomatériau peut être collecté le jour ou le soir. Dans ce cas, il est important qu’au moins 5 à 6 heures s'écoulent entre le dernier repas et l’analyse.
  • avant de donner du sang pour l'hépatite C, le thé, le café, le jus ou d'autres boissons doivent être jetés, seule l'eau est autorisée.
  • 48 heures avant l'étude, il est nécessaire d'exclure l'utilisation d'aliments gras, d'aliments frits et de boissons contenant de l'alcool.
  • pendant au moins une heure avant l'analyse, vous devez vous abstenir de fumer.
  • l'analyse ne doit pas être effectuée immédiatement après une échographie, un instrument, un examen aux rayons X, un massage ou une physiothérapie.
  • un jour avant la mise en œuvre de l'étude, il est nécessaire d'exclure l'utilisation de médicaments et l'activité physique intensive. Le stress émotionnel est également contre-indiqué.
  • Il est recommandé de passer 15 minutes avant de réaliser l’étude dans un état calme.

Effectuer la procédure de collecte de sang

Où se faire dépister pour l'hépatite C? Le prélèvement de biomatériau en vue de recherches ultérieures est effectué dans le laboratoire d’un établissement médical ou au domicile du patient.

Le sang d'une veine est prélevé comme suit:

  • à l'aide d'un garrot spécial enroulé autour de l'avant-bras du patient, le flux sanguin veineux est arrêté. Grâce à de telles manipulations, les veines seront remplies de sang et seront plus visibles, ce qui facilitera grandement le processus d'insertion de l'aiguille.
  • la zone de la peau où l'aiguille sera insérée est soigneusement traitée avec de l'alcool ou un liquide contenant de l'alcool.
  • Une aiguille est insérée doucement dans une veine, puis une éprouvette est spécifiquement conçue pour la collecte de sang.
  • Immédiatement après l'aiguille insérée dans la veine, le harnais de serrage est retiré du bras du patient.
  • après avoir recueilli le volume sanguin nécessaire à l'analyse, l'aiguille est retirée doucement de la veine.
  • un coton-tige stérile ou un tampon de gaze imbibé d'alcool doit être appliqué sur le site d'injection.
  • Pour éviter l'apparition d'un hématome, vous devez appuyer sur le tampon contre la zone d'insertion de l'aiguille, plier le bras au niveau de l'articulation du coude et le maintenir dans cette position pendant plusieurs minutes. De telles actions aideront également à arrêter le sang plus rapidement.

À condition que la technique d'administration interne soit bonne, cette procédure est absolument sans danger et ne provoque pas de sensations douloureuses.

Dans de rares cas, après la collecte de sang, les veines peuvent gonfler. Ce phénomène s'appelle "phlébite". Une compresse (pas chaude) aidera à résoudre le problème, elle doit être appliquée sur les zones enflées de la peau plusieurs fois par jour.

Certains problèmes peuvent également survenir en cas de trouble de la coagulation. Prendre de l'aspirine, de la warfarine et d'autres anticoagulants peut provoquer des saignements. C'est pourquoi, avant d'effectuer l'analyse, il est nécessaire de refuser de prendre tout médicament. Si le traitement ne peut pas être annulé, vous devez en informer le spécialiste.

Dates et prix

Combien de tests fait-on pour l'hépatite C? Les résultats d’une analyse sanguine de l’hépatite peuvent être prêts en quelques heures et en quelques jours (en règle générale, pas plus de 8 jours). La durée de préparation des résultats dépend du type de virus et de la méthode d'analyse choisie. Plus rapide est l'étude menée par la méthode PCR. Les résultats dans ce cas seront prêts dans quelques heures.

Combien coûte un test d'hépatite C? En fonction de la clinique et de la complexité de l'étude, le prix de la procédure peut varier de 400 à 11 000 roubles.

Vous devez savoir qu'il faut parfois plusieurs semaines pour former une quantité suffisante d'anticorps anti-HVC. Par conséquent, à un stade précoce du développement d'une pathologie, le résultat d'une étude peut être faux négatif.

En outre, il est possible d'obtenir des données peu fiables avec une analyse de qualité médiocre et une violation des conditions de transport du biomatériau obtenu (les échantillons doivent être livrés au laboratoire au plus tard 2 heures après le prélèvement sanguin).

Si le résultat de l'étude est positif, vous devez immédiatement contacter un médecin spécialisé dans les maladies infectieuses. Le spécialiste effectuera un examen supplémentaire et prescrira le traitement approprié.

Pensez-vous toujours que guérir l'hépatite C est difficile?

À en juger par le fait que vous lisez ces lignes à présent, la victoire dans la lutte contre les maladies du foie ne vous appartient pas. Et avez-vous déjà pensé à la thérapie par interféron? C'est compréhensible, car l'hépatite C est une maladie très grave, car le bon fonctionnement du foie est la clé de la santé et du bien-être. Nausées et vomissements, peau jaunâtre ou grisâtre, goût amer dans la bouche, urine foncée et diarrhée. Tous ces symptômes vous sont familiers.

Mais peut-être est-il plus correct de ne pas traiter l’effet, mais la cause? Pour le traitement, nous recommandons l'utilisation de médicaments domestiques modernes - le sofosbuvir et le daclatasvir. Lire plus >>

Analyse qualitative et quantitative de la PCR pour l'hépatite C: négatif, positif, transcription

L'hépatite C est une maladie hépatique virale provoquée par le flavivirus HCV (du mot anglais virus de l'hépatite C), dont la structure contient une molécule d'acide ribonucléique (ARN). L'ARN porte le code génétique du virus. Sa présence permet l'analyse de la PCR pour l'hépatite C.

Le danger du VHC pour une personne réside dans le fait que la fenêtre sérologique (délai entre l’infection et l’apparition d’une réaction du système immunitaire) peut être assez longue - de plusieurs semaines à six mois.

Il ne détecte pas l'infection et ne commence pas le traitement à temps.

Selon les caractéristiques individuelles de l'organisme, le porteur du VHC peut se manifester sous forme aiguë, ainsi que sous forme de maladie chronique nécessitant un traitement long et coûteux. Lorsque des anticorps anti-VHC sont détectés, une série de tests de laboratoire est effectuée, y compris une PCR pour l'hépatite C. Ce test est effectué sur toutes les personnes chez qui des anticorps sanguins contre le VHC ont été détectés.

Qu'est-ce que l'analyse PCR?

Analyse en laboratoire de la PCR pour l'hépatite C - l'étude du matériel biologique afin de détecter la présence de flavavirus.

La réaction en chaîne de la polymérase (au sens abrégé) montre la valeur quantitative de la lésion virale du corps, ses caractéristiques qualitatives, ainsi que le génotype du virus contenant l'ARN.

La méthode et la durée du traitement, ainsi que le facteur épidémiologique (degré de risque de transmission à un autre porteur) sont déterminés sur la base de ces analyses et d'analyses complémentaires.

Qu'est-ce que l'analyse d'ARN de l'hépatite C?

La PCR de l’hépatite C est aussi appelée analyse d’ARN (ARN du VHC), car Le flavavirus contient une particule d'ARN avec une taille de virion de 30 à 60 nm. L'une des caractéristiques de ce microorganisme est sa forte propension aux mutations.

Chacune des sous-espèces (génotypes) du virus a une résistance différente, ce qui entraîne différentes méthodes de traitement et la nature du pronostic ultérieur pour le patient.

Le matériel biologique (sang veineux) est administré l'estomac vide et, en règle générale, testé par la méthode de PCR en temps réel (diagnostic en temps réel extrêmement sensible avec une limite de détection inférieure à 15 UI / ml à l'aide de systèmes automatisés fermés).

Il existe d'autres tests, par exemple COBAS AMPLICOR avec une sensibilité de 50-100 UI / ml. Pour tout test de laboratoire, le seuil de sensibilité est important, c'est-à-dire la capacité du réactif à détecter la concentration minimale de virus dans le matériel biologique.

Types d'analyse de l'hépatite C par PCR

La PCR de l'hépatite C comprend trois composants importants:

  • analyse qualitative;
  • analyse quantitative;
  • génotypage.

Ces tests vous permettent de déterminer la nature de la virémie, ainsi que les caractéristiques génétiques de l'agent pathogène. En fonction de la sensibilité du système de diagnostic, l’étude est réalisée une fois et, parfois, un deuxième test est effectué avec un réactif plus sensible pour confirmer ou affiner les résultats.

PCR de haute qualité de l'hépatite C

L'analyse qualitative de l'hépatite C par PCR est un autre nom courant pour l'analyse de la réaction en chaîne de la polymérase. La sensibilité standard du test, qui permet de détecter la présence de lésions virales, est comprise entre 10 et 500 UI / ml.

Une analyse PCR de l’hépatite C négative montre que la concentration de virus dans le sang du patient est inférieure au seuil de sensibilité du système de diagnostic.

Si la PCR de haute qualité a donné la réponse "non détectée", il est important de déterminer le seuil de sensibilité du réactif lors du traitement suivant.

Les fractions protéiques au flavavirus apparaissent beaucoup plus tard.

PCR quantitative de l'hépatite C

La PCR quantitative de l'hépatite C est un indicateur de la charge virale, qui reflète le niveau de concentration en ARN du flavavirus dans le corps. C'est un indicateur montrant combien de fragments d'ARN viral sont contenus par centimètre cube de sang. Les résultats de la PCR de l'ARN de l'hépatite C dans un test quantitatif en système conventionnel sont indiqués en unités internationales par millilitre (UI / ml) et peuvent être enregistrés de différentes manières, par exemple 1,7 million ou 1,700 000 UI / ml.

Le diagnostic quantitatif PCR de l'hépatite C est prescrit aux patients avant le début du traitement antiviral et à la 12e semaine de traitement afin d'évaluer les résultats de la méthode choisie pour traiter le VHC. La charge virale permet de déterminer trois indicateurs importants de la maladie:

  • l'infectivité, c'est-à-dire le degré de risque de transmission du virus d'un porteur à un autre (plus la concentration d'ARN de flavavirus est élevée, plus le risque d'infecter une autre personne est élevé, par exemple par contact sexuel);
  • méthode et efficacité du traitement;
  • la durée et le pronostic du traitement antiviral (plus la charge virale est élevée, plus le traitement dure longtemps).

Le diagnostic quantitatif PCR de l'hépatite C par PCR dépend du type de test de laboratoire et du seuil de sensibilité. La limite inférieure de la norme est considérée comme l'indicateur allant jusqu'à 600 000 UI / ml, la valeur moyenne se situant dans la plage de 600 000 à 700 000 UI / ml. Des résultats de 800 000 UI / ml et plus sont considérés comme des taux élevés de virus contenant l'ARN.

Génotypage

En raison de la forte activité mutationnelle du VHC dans la nature, lors du test, il est important d’identifier quel génotype du virus se trouve dans le sang du patient. Au total, 11 génotypes du virus de l'hépatite C ont été enregistrés sur la planète, comprenant de nombreuses sous-espèces (sous-types). Sur le territoire de la Fédération de Russie distribué 1,2 et 3.

L’ARN PCR de l’hépatite C avec le génotypage est une composante très importante de l’analyse, car permet au médecin de déterminer la résistance (résistance) du virus, de sélectionner les médicaments appropriés et de prescrire un traitement.

Le génotypage vous permet également de déterminer indirectement l'état du foie. Par exemple, le génotype 3 du VHC est souvent accompagné d'une stéatose, dans laquelle la graisse s'accumule dans les cellules de l'organe.

Un test sanguin de PCR pour l'hépatite C devrait donner un chiffre qui détermine le génotype. Les réponses de laboratoire peuvent indiquer «non typé», ce qui signifie qu'un virus contenu dans du sang humain n'est pas détecté par le système de test. Cela peut indiquer que le génotype n'est pas typique pour une zone géographique donnée. Dans ce cas, vous devez répéter l'analyse avec une plus grande sensibilité du système de diagnostic.

Décodage de l'analyse PCR pour l'hépatite C

Le test de déchiffrement quantitatif PCR de l'hépatite C peut être basé sur les données ci-dessus. Lors de l'obtention des résultats des tests de laboratoire, les données suivantes sont généralement écrites:

  • «Trouvé» / «non trouvé» (PCR de haute qualité pour l'hépatite C);
  • le nombre de fractions contenant l'ARN, par exemple 831 680 ME / ml (analyse PCR quantitative);
  • la figure qui détermine le génotype du VHC, par exemple - 1, 2, 3, 4;
  • Le nom du test est le plus souvent en temps réel.

Le plus important pour déchiffrer l'analyse de la PCR pour l'hépatite C est le deuxième paragraphe, qui montre la charge virale, qui détermine le pronostic, la méthode et la durée du traitement.

Si le test PCR de recherche de l'hépatite C est négatif et si le test ELISA est positif, qu'est-ce que cela signifie?

Pour déchiffrer les tests de laboratoire, il est important de contacter un hépatologue ou un spécialiste des maladies infectieuses, qui expliquera les informations obtenues en fonction du type de système de diagnostic et de son seuil de sensibilité. Dans la pratique médicale, il existe de nombreuses données de tests sanguins qui peuvent induire en erreur une personne sans formation médicale.

Par exemple, si le test de PCR de l’hépatite C est négatif et si le test ELISA est positif, il se peut qu’il n’y ait pas de VHC dans le sang du patient à l’heure actuelle, mais il souffrait auparavant d’une forme aiguë de l’hépatite C. il y a des anticorps dans le sang qui ont été produits après l'invasion du virus dans le passé. Mais dans la pratique médicale moderne, l’analyse ELISA est considérée comme insuffisamment fiable et donne souvent des résultats inhabituels. Les médecins l’utilisent donc comme test de dépistage primaire. Lors du diagnostic d'une maladie, les spécialistes sont guidés avec précision par les tests PCR.

Vidéo utile

La vidéo suivante donne une description très détaillée et intéressante de l’essence de la méthode PCR, de la manière dont l’analyse est effectuée:

Conclusion

Pour l'analyse de la PCR pour l'hépatite C, le sang veineux est généralement prélevé. Le plus souvent, il y a un double apport de matériel biologique - pour ELISA et directement pour le test PCR. Pour que les résultats des tests soient corrects, il est nécessaire de respecter les règles de base pour l'échantillonnage en laboratoire de matériel biologique:

  • le sang à analyser est donné dans la première moitié de la journée à jeun;
  • entre le repas et le sang doit prendre au moins 8 heures;
  • l'alcool et les aliments frits doivent également être exclus avant le test;
  • la veille du don de sang, il est nécessaire d'éviter un effort physique intense.

Les résultats des tests sanguins sont généralement prêts le lendemain.

Etude PCR pour l'hépatite C: types, indications, transcription

L'hépatite virale C est une maladie grave qui se manifeste par des lésions du foie. Chez 80% des patients, cela devient chronique. Le virus se multiplie dans les cellules du foie - les hépatocytes - et provoque leur mort. Le tissu mort est remplacé par des foyers de tissu conjonctif, une fibrose se développe.

Au fur et à mesure que la fibrose se développe, le foie est incapable d'exercer ses fonctions, la cirrhose du foie commence, ce qui est dangereux en raison de ses complications: pression accrue dans la veine porte, saignements gastro-intestinaux, insuffisance de la coagulation sanguine, changements mentaux dus à des lésions des noyaux cérébraux.

La cause de la maladie est une infection par un virus de la famille des Flaviviridae, appartenant au type des virus à ARN. Cela signifie que le matériel génétique par lequel les protéines de l'agent pathogène sont synthétisées est codé dans la molécule d'acide ribonucléique. L'infection se produit par le sang, sexuellement et d'une femme enceinte jusqu'au fœtus. Malheureusement, un délai suffisamment long peut s'écouler entre l'infection et le début de la production d'anticorps - de deux semaines à six mois. Cela ne permet pas de déterminer l'infection par la méthode de dosage immunologique et de commencer le traitement à un stade précoce.

Qu'est-ce que l'analyse PCR?

La PCR est une méthode d'analyse moléculaire qui permet de détecter le matériel génétique de l'agent pathogène dès la première semaine après l'infection en utilisant une réaction en chaîne de la polymérase. L'étude a une spécificité et une précision élevées et permet non seulement de déterminer la présence ou l'absence du virus, mais également sa concentration et son génotype.

Pour l'étude, le sang d'un patient est prélevé dans lequel l'ARN du virus peut potentiellement être localisé. Des amorces sont ajoutées aux régions synthétisées artificiellement dans le sang du gène de petite longueur souhaité, et l’ARN polymérase est une enzyme spéciale qui augmente de façon répétée la quantité de matériel génétique de l’agent pathogène. À l'aide d'un appareil spécial, plusieurs cycles de chauffage et de refroidissement sont effectués. Ensuite, le matériel est analysé et comparé aux gènes connus du virus, sur la base desquels une conclusion est formulée à propos de la présence ou de l'absence d'infection.

Types d'analyse PCR pour l'hépatite C

Il existe trois types d'analyse PCR:

  1. Analyse qualitative de la PCR. La première étape de l'étude. Cela vous permet d'identifier le matériel génétique du virus dans le sang.

  • Analyse quantitative de la PCR. Vous permet de déterminer la charge virale - la concentration du matériel génétique de l'agent pathogène dans un millilitre de sang. Cette étude est réalisée avant le début du traitement, puis au cours de la première, quatrième, douzième et (si le cours est long) vingt-quatrième semaine de traitement pour évaluer son efficacité.

  • Génotypage L'agent causal de l'hépatite C mute souvent et rapidement. Sept variantes de ce génotype du virus ont été trouvées sur la planète. En Russie, les premier, deuxième et troisième types sont courants. La résistance au traitement de chacun des génotypes est différente. Par exemple, l'efficacité du traitement du premier type est de soixante pour cent et, pour les deuxième et troisième, elle atteint quatre-vingt-cinq. Par conséquent, afin de sélectionner les médicaments appropriés et de prescrire un traitement d'une durée suffisante, il est nécessaire de déterminer exactement le type de virus avec lequel le patient est infecté.
  • Indications pour l'analyse PCR de l'hépatite C

    L'étude PCR est prescrite dans les cas suivants:

    • contact avec une personne malade au cours de laquelle une infection pourrait survenir;
    • dosage immunoenzymatique positif;
    • signes de cirrhose: modifications de la taille du foie, hypertrophie de la rate, apparition sur l'abdomen du plexus veineux sous-cutané;
    • l'apparition de symptômes de dommages au foie: douleur à l'abdomen droit, jaunissement de la peau;
    • augmentation de l'activité de l'ALT et de l'AST dans l'analyse biochimique du sang;
    • avant de commencer le traitement pour déterminer la charge virale;
    • surveiller l'efficacité du traitement antiviral;
    • après le traitement pour contrôler la rechute;
    • en présence d'hépatite B diagnostiquée, pour exclure les dommages mixtes au foie.

    Explication des études PCR sur l'hépatite C

    Le décodage de l'analyse PCR et du dosage immunoenzymatique de l'hépatite C doit être effectué par un hépatologue ou un spécialiste des maladies infectieuses. L'analyse des résultats de la PCR est nécessaire en combinaison avec les données d'analyse biochimique du sang, de la biopsie et des ultrasons. Seul un médecin qualifié sera en mesure d'analyser les résultats de la recherche et, sur cette base, de prescrire le traitement approprié.

    Décodage de l'analyse qualitative.

    Dans le matériel biologique analysé trouvé le matériel génétique de l'agent pathogène. Infection confirmée.

    L'infection est absente ou la quantité d'ARN de l'agent pathogène est inférieure à la limite de sensibilité.

    Décodage de l'analyse quantitative.

    Taux normal pour les personnes en bonne santé. Cela signifie qu'il n'y a pas d'ARN de l'hépatite C dans le matériel étudié ou que sa concentration est inférieure au seuil de sensibilité de l'étude.

    La concentration en ARN est inférieure à la plage de quantification. Ces résultats sont interprétés très soigneusement, corrélés avec les données d’autres études, souvent ré-étudiées.

    Le niveau de charge virale à une concentration donnée est considéré comme faible. Habituellement, une diminution de la quantité de virus signifie que le traitement est efficace.

    Plus de 8 * 10 ^ 5 UI / ml

    Le niveau de charge virale à une concentration donnée est considéré comme élevé.

    Plus de 2,4 * 10 ^ 7 UI / ml

    La quantité d'ARN au-dessus de la limite supérieure de la plage de quantification. Il est impossible de tirer des conclusions sur le degré de charge virale avec ce résultat. Habituellement, dans de tels cas, le test est répété avec la dilution d'un échantillon de sang.

    Décoder le génotypage.

    ARN détecté d'un génotype spécifique

    Le virus de l'hépatite C d'un certain génotype et sous-type a été détecté dans le biomatériau. Le résultat est codé en chiffres romains et en lettres latines, par exemple - 1a, 2b. Au total, il y a sept génotypes et soixante-sept sous-types, cependant, en Russie, il n'y a que trois premiers types.

    ARN du virus de l'hépatite C détecté

    L'ARN a été trouvé dans le sang d'un génotype rare pour la Russie, qui ne peut être attribué au premier, deuxième ou troisième type. Plus de recherche est nécessaire.

    Ce résultat indique que le patient est en bonne santé ou que la quantité d'ARN de l'agent pathogène est trop petite.

    Il est possible que l'analyse PCR de l'hépatite C soit négative et que le test d'immunosorbant lié à une enzyme reconnaisse les anticorps contre le virus. Cela signifie que le patient a eu l'hépatite C aiguë et a guéri par lui-même. Environ vingt cas d’infection entraînent une guérison spontanée si le corps du patient présente une résistance suffisante à l’infection.

    Bien que la PCR soit une analyse extrêmement précise, ses résultats peuvent être faussés dans les situations suivantes:

    • le sang a été transporté au laboratoire dans des conditions inappropriées, la température a été violée;
    • l'échantillon de biomatériau était contaminé;
    • il y avait des traces résiduelles d'héparine et d'autres anticoagulants dans le sang;
    • Les investigateurs se sont révélés être des inhibiteurs - des substances qui ralentissent ou arrêtent la réaction en chaîne de la polymérase.

    Les avantages de la PCR par rapport aux autres méthodes

    1. Diagnostic dans les premiers stades. La PCR détecte le matériel génétique de l'agent causal. En utilisant l'analyse par immunofluorescence, seules les immunoglobulines peuvent être déterminées - les substances que l'organisme produit en réponse à une infection. En cas d'infection par l'hépatite C, l'intervalle entre l'infection et le début de la réponse immunitaire peut être de plusieurs semaines et plusieurs mois. À ce stade, l'ELISA sera inefficace. La PCR donnera une réponse dans la première semaine après l'infection.

  • Faible probabilité d'erreur. Dans le matériel à l’étude, déterminez l’aire de matériel génétique qui n’est caractéristique que d’un seul type de pathogènes. Cela élimine les faux résultats. Lorsque des erreurs ELISA sont possibles, étant donné que le même type d'anticorps peut être libéré contre différents virus, ces anticorps sont appelés anticorps croisés.

  • Haute sensibilité. La PCR permet de détecter l'ARN de l'agent causal même en quantités minimes. Cela permet d'identifier les infections cachées.
  • Comment se préparer au don de sang pour les études PCR

    Pour l'analyse PCR de l'hépatite C, du sang veineux est collecté. Habituellement, deux portions de sang sont prélevées dans la veine du patient à la fois: la première est envoyée pour la PCR et la seconde par ELISA. Cela a pour but d'évaluer plus précisément le degré d'infection d'un patient par un virus et la manière dont l'immunité lutte contre ce virus.

    Habituellement, le patient est tenu de respecter les règles suivantes:

    • une prise de sang est prise le matin;
    • L'intervalle entre le dernier repas et le don de sang devrait être de huit à dix heures.
    • deux ou trois jours avant l'analyse, il est nécessaire d'abandonner les aliments frits et gras, ainsi que l'alcool;
    • pendant vingt-quatre heures avant l'analyse, le patient doit éviter tout effort physique: ne portez pas de poids, n'allez pas au gymnase ni à la piscine.

    Analyse qualitative de l'hépatite C

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    Une analyse qualitative de la réaction en chaîne de la polymérase - La PCR pour l'hépatite C détermine la présence ou l'absence de VHC dans le corps. En laboratoire, la structure de l'ARN, incluant le virus, est étudiée. En cas de détection du virus C, il est nécessaire de suivre un traitement, car l’état négligé du foie aura des conséquences graves. Une PCR de haute qualité est également effectuée après la récupération pour confirmer l'absence d'anticorps. Assigné pour l'inspection de routine. Avec une faible concentration de l'agent causal dans le sang, la PCR (qualitative) peut ne rien détecter du fait que le système de diagnostic a ses propres seuils de sensibilité. Dans le cas du stade initial de la maladie ou de la forme bénigne, les ultra-diagnostics par PCR sont effectués sur un équipement ultra-sensible.

    Qu'est-ce que le virus à ARN?

    Le terme ARN du virus de l'hépatite C (ou ARN du virus de l'hépatite C) désigne la maladie du foie elle-même. Le virus C se lie à la cellule saine du corps en pénétrant à l'intérieur. Au fil du temps, se répandant dans tout le corps, il suffit de pénétrer dans le sang. En conséquence, l'agent pathogène pénètre dans le foie, fusionne avec ses cellules et travaille dur. Les cellules hépatiques (hépatocytes) travaillent sous son influence, subissent des modifications et en meurent. Plus le virus C reste longtemps dans le foie, plus le nombre de cellules meurent. Au fil du temps, développez des maladies dangereuses qui entraînent une dégénérescence maligne et la mort.

    L'infection du foie par ce type de virus peut ne pas se manifester de l'extérieur. Pendant de nombreuses années ou décennies, une personne infectée se sent complètement en bonne santé et seul un examen aléatoire révèle le plus souvent une pathologie. Lors du don de sang pour l'hépatite, une partie de la chaîne d'ARN (acide ribonucléique), qui fait partie du gène humain (ADN), est examinée. Les résultats des tests de laboratoire ne doivent pas être utilisés pour l'auto-traitement, car il ne s'agit que d'un indicateur. L'image exacte et le diagnostic ultérieur sont mieux déterminés par le médecin.

    Une fois terminé: indications pour la recherche

    Pour confirmer le VHC, une analyse PCR est effectuée (réaction en chaîne de la polymérase). Les études de PCR aident à trouver le matériel pathogène dans la structure de l'ARN et à prescrire un traitement efficace. Nommé dans les cas suivants:

    • détection de signes d'inflammation du foie;
    • études de dépistage pour la prévention;
    • examen des personnes en contact;
    • diagnostic d'hépatite d'origine mixte (détermination du principal agent pathogène);
    • déterminer le niveau d'activité de reproduction du virus dans la forme chronique;
    • cirrhose du foie;
    • déterminer l'efficacité du traitement prescrit.
    Les études de PCR sont prescrites par un médecin afin de déterminer l'efficacité d'un traitement pour l'hépatite.

    Il existe une analyse qualitative et quantitative de la PCR. La PCR quantitative montre le ratio de pourcentage d'ARN par le nombre de porteurs de virus dans le sang et qualitative indique la présence ou l'absence de virus. Un indicateur de qualité positif (présence d'ARN de l'hépatite C) nécessite également des recherches quantitatives. Un niveau élevé de concentration de l'agent responsable de l'hépatite C est associé au risque de transmission, c'est-à-dire d'infection de tiers. Un faible nombre est mieux traitable. La quantité de virus à ARN dans le sang n’est pas liée à l’intensité de la maladie. Une analyse par PCR est également effectuée dans le cas d'un traitement par interféron afin de prescrire la durée et la complexité du traitement.

    Caractéristiques de l'analyse PCR de haute qualité pour l'hépatite C

    Une analyse qualitative avec l'indice de réaction en chaîne de la polymérase est attribuée à tous les patients présentant des anticorps dans le sang pour l'hépatite C. Ceux qui ont été guéris et qui sont guéris doivent repasser le test. Il est recommandé de réussir le test de dépistage de l'hépatite B, puis, en cas de conclusion positive, et de l'hépatite D. En outre, la réaction analysée qualitativement doit être réalisée en association avec d'autres tests sanguins. Les analyses fourniront une image complète de la propagation virale.

    D'après les résultats du test, seul un test positif pour l'hépatite C sera visible ou négatif, c'est-à-dire la présence ou l'absence d'un virus. Si la sortie est "détectée", le virus est et reste actif. La désignation "non détecté" indique l'absence de virus ou sa petite quantité. Avec cet indicateur, il convient de garder à l'esprit que la sensibilité analytique des systèmes de diagnostic est différente et que l'hépatite C à ARN peut encore être dans le sang, mais ne se manifeste pas dans l'analyse.

    La méthode PCR particulièrement sensible ultra-hépatite C révèle même de faibles quantités. Une étude d'hybridation par fluorescence est utilisée, qui est plusieurs fois supérieure aux systèmes de PCR standard. La méthode est utilisée dans plusieurs cas:

    • formes présumées cachées de l'hépatite C;
    • Le diagnostic PCR n'a pas confirmé l'agent pathogène, mais il existe des anticorps.
    • en cas de récupération;
    • détecter une infection précoce.
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    Analyse de décodage

    Le décodage PCR du VHC affecte la décision finale lors du diagnostic, en particulier avec la méthode ultramétode. Le principal inconvénient de cette étude est le strict respect des conditions de stérilité pour l’échantillon et le matériel. Une légère déviation montre parfois des conclusions analytiques inexactes, complique le diagnostic et le traitement ultérieur. L'analyse de la PCR pour la détermination de l'ARN de l'hépatite ne donne pas toujours une image fiable de la maladie, des imprécisions sont parfois permises, et dans les deux sens.

    Pour diagnostiquer le virus de l'hépatite, il est recommandé d'utiliser un examen complet.

    Norme des indicateurs

    L’absence d’anticorps JgM contre l’hépatite virale C dans les résultats de l’étude est considérée comme la norme dans l’analyse de la réaction en chaîne de la polymérase. Dans le même temps, les résultats de l'analyse sérologique indiquent la présence d'anticorps anti-virus C, ce qui se situe également dans les limites de la normale. Une définition qualitative ne montre pas l’intensité de la maladie, elle révèle seulement l’agent responsable de l’hépatite C dans l’ARN. Cette analyse est répétée après le traitement pour confirmer la récupération réelle.

    Déviations

    Si des anticorps anti-JVM anti-JVM sont présents, cela indique une infection en développement. La maladie dans le même temps se développe de manière aiguë ou chronique, se manifestant à différents stades. Si une diminution du nombre d'anticorps est enregistrée, l'analyse indiquera que les résultats du traitement ont été obtenus pendant la récupération. Le diagnostic ne révèle que de très rares cas de faux positifs. On les trouve chez les femmes pendant la grossesse et chez les personnes atteintes d'autres maladies infectieuses.


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