Analyse PCR pour l'hépatite C

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Le diagnostic de l'hépatite comprend une série de tests permettant de déterminer la présence d'un virus dans le sang. L'une des méthodes de détection d'une maladie est une méthode de recherche telle que la PCR pour l'hépatite C. En quoi consiste-t-elle, pourquoi l'analyse de la PCR pour l'hépatite est-elle aussi importante qu'elle est réalisée et déchiffrée?

C'est quoi

La réaction en chaîne de la polymérase, ou PCR, est utilisée pour diagnostiquer les ulcères gastriques, les colites et les entérites. Mais son principal avantage réside dans le fait qu’il aide à détecter dans le corps à la fois le virus de l’hépatite C et ses anticorps, qui ont la capacité de ne pas provoquer de réactions du système immunitaire en raison de leur capacité à muter.

L’étude et son essence reposent sur la création de certaines conditions dans lesquelles se produit la réaction en chaîne de l’ARN de l’hépatite. Si, par comparaison avec la séquence nucléotidique du virus de l'hépatite C, des coïncidences sont trouvées, cela indique qu'il existe des particules virales dans le sang et que des processus de désintégration se produisent dans le foie. Si la quantité de virus est inférieure à un certain niveau, un diagnostic négatif est posé et, s'il est supérieur, positif.

Il existe deux types de tests sanguins utilisant la méthode PCR pour l'hépatite: l'analyse quantitative et l'analyse qualitative.

La PCR quantitative, comme mentionné ci-dessus, détermine la concentration en ARN du virus de l'hépatite. En outre, il est en mesure de donner des informations sur l'intensité du développement de la pathologie et sur l'efficacité du traitement prescrit. Une analyse quantitative de l’hépatite C est extrêmement importante car elle fixe la résistance à l’action des médicaments antiviraux et vous permet d’ajuster le traitement.

Une fois que le patient a suivi un traitement, la PCR aide à déterminer l’ordre des rendez-vous. Dans certains cas, la nécessité d’enquêtes supplémentaires. Par exemple, si le niveau d'ALP est augmenté (mais pas plus de 2 fois en six mois) et que le transcript de l'analyse indique une charge virale supérieure à 105 UI / ml, une biopsie est prescrite au patient. Si une analyse quantitative de la PCR révèle une forte inflammation et une fibrose, on prescrit au patient un traitement par des médicaments antiviraux.

Dans les cas où un grand nombre de particules virales est associé à un taux élevé d'ALAT, le patient doit être immédiatement traité sans autre mesure de diagnostic.

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Seuls des spécialistes qualifiés et expérimentés peuvent déchiffrer qualitativement l'analyse quantitative du sang pour le dépistage de l'hépatite, et les technologies modernes permettent de le faire avec une faible concentration du virus dans le sang.

L'analyse qualitative de la PCR vise à déterminer et à confirmer la présence réelle du virus dans le corps. Elle est réalisée lorsque des anticorps anti-hépatite sont détectés dans le sang. C'est une analyse qualitative de l'hépatite qui garantit la précision du résultat à 100% et permet de poser un diagnostic dès les premiers stades de la maladie, ce qui permet de commencer la lutte contre l'hépatite dès les premières semaines après l'infection et augmente les chances de guérison complète (dans le cas d'une maladie de type B).

Avantages de la PCR

Dans l'étude par PCR et le déchiffrement d'un test sanguin d'hépatite, vous pouvez également déterminer le génotype de l'agent pathogène. Au total, il existe 6 génotypes du virus et un grand nombre de sous-types, cependant, dans notre région, 1, 2 et 3 génotypes sont devenus courants.

Les autres avantages de ce type de diagnostic sont:

  • grande précision des indicateurs obtenus et faible probabilité d'erreur;
  • niveau élevé de sensibilité aux particules virales dans le sang;
  • la possibilité d'identifier plusieurs agents pathogènes à la fois;
  • diagnostic de microorganismes intracellulaires pathogènes à forte variabilité antigénique;
  • Travailler avec le décodage de l'analyse de l'hépatite vous permet de détecter les infections cachées actuelles

Qui est nommé

Les catégories de personnes suivantes doivent réussir l’analyse par PCR de l’hépatite:

  • les femmes enceintes;
  • personnel de santé;
  • donneurs potentiels de sang et d'organes;
  • ceux qui ont des signes caractéristiques de la maladie;
  • Personnes infectées par le VIH;
  • toxicomanes;
  • promiscuous.

Comment se déroule l'analyse et faut-il s'y préparer

Le prélèvement sanguin pour la PCR est effectué à partir d'une veine. En règle générale, cela se produit le matin avant que la personne ait mangé, car après le repas, il doit s'écouler au moins 8 heures. Dans les cas extrêmes, le sang peut être prélevé pour examen le jour ou le soir, mais le délai entre l'analyse et la prise de nourriture doit être d'au moins 5 heures.

Le facteur humain peut affecter quantitativement les résultats: leur précision diminue dans certains cas de 100% à 95%, il est donc nécessaire de préparer le don de sang à l'avance. La qualité du biomatériau à analyser sera appropriée lorsque le patient suivra les règles suivantes:

  • avant de donner du sang, vous ne pouvez boire que de l'eau propre;
  • deux jours avant l'étude, il est nécessaire de refuser les aliments frits et gras, ainsi que les boissons alcoolisées;
  • un jour avant la visite au laboratoire doit cesser de prendre des médicaments. Si cela n’est pas possible, il est impératif d’en informer le technicien de laboratoire et le médecin traitant;
  • la veille, vous devez éviter les situations stressantes et l'effort physique;
  • Les examens par ultrasons, par rayons X et par instruments ne doivent pas être effectués peu de temps avant le don de sang;
  • dans l'heure qui précède l'analyse, vous devez vous abstenir de fumer;
  • 20 minutes avant de donner du sang, il faut être distrait, se calmer et expirer.

Si un enfant de moins de 5 ans réussit l'étude, les parents doivent s'assurer qu'il boit de l'eau bouillie toutes les 10 minutes pendant une demi-heure avant de prendre le biomatériau.

Décryptage des données reçues

Le décodage de l'analyse peut être représenté par des mots (dans le cas d'une étude qualitative), par exemple, «non détecté» ou «en deçà de la plage de modifications». Dans le premier cas, cela indique que l'infection n'a pas été détectée. Dans le second cas, le virus est présent, mais en petites quantités. Cette situation nécessite une nouvelle recherche.

La charge virale est déterminée par la quantité d'ARN infectieux et est appelée UI / ml ou copies / ml.

Un indicateur normal (norme) d’une analyse quantitative de l’hépatite C se situe dans l’intervalle allant de 1,8 x 102 à 2,4 x 107 UI / ml.

La concentration de virus dans le sang peut être:

  • faible: de 600 UI / ml à 3 x 10 4 / ml;
  • milieu: de 3 x 10 4 UI / ml à 8 x 10 5 UI / ml;
  • élevé: plus de 8x10 5 UI / ml.

L'analyse quantitative et qualitative de la PCR pour l'hépatite permet de déterminer la présence du virus dans l'organisme et le niveau de sa concentration. Une réaction en chaîne multidimensionnelle est capable de diagnostiquer la maladie à ses débuts, mais pour cela, il est nécessaire que les patients contactent dès que possible les institutions médicales pour obtenir de l'aide et suivent scrupuleusement les recommandations du médecin traitant.

Utilisation du diagnostic PCR

La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) en biologie moléculaire est une méthode expérimentale de détection des virus. Il vous permet d’augmenter considérablement la concentration de certains fragments d’acide nucléique (ADN) dans des échantillons de matériel biologique, ce qui permet de les déterminer (reconnaître) et de les compter.

L'analyse est effectuée comme suit. Du matériel génétique (un échantillon de sang), qui peut potentiellement inclure le gène souhaité, est introduit dans le tube. Des amorces sont également placées - des segments synthétisés chimiquement d’une petite longueur du gène souhaité.

Un ADN ou une ARN polymérase est également ajouté dans le vaisseau, ce qui permet d’aligner une chaîne d’acides nucléiques complètement identique à celle de l’origine. La composition résultante est injectée et un ensemble de quatre nucléotides libres - un matériau de construction spécial pour l'ARN ou l'ADN, dont l'un contient des particules de phosphore radioactives.

Le mélange obtenu est chauffé à 95–96 ° C. C'est pourquoi deux hélices d'ADN, qui sont normalement entrelacées, sont tissées. Ensuite, le médicament est refroidi et les amorces se fixent à la région souhaitée du génome viral, empêchant l’ARN (ou l’ADN) de former à nouveau une double hélice.

En cours de refroidissement, la polymérase recherche une chaîne de nucléotides libre. Pour le fonctionnement de cette enzyme, une seule chaîne de nucléotides est nécessaire. Comme la polymérase glisse le long de la chaîne d’ADN (comme un anneau sur une corde), elle n’est pas capable de travailler sur une double hélice.

Ensuite, un cycle de chauffage répété est effectué, ce qui permet de séparer les chaînes de nucléotides. À chacun de ces cycles de PCR, la quantité dans l'échantillon du gène d'hépatite souhaité augmente de manière exponentielle, et le reste du matériel génétique est produit (se développe) de manière linéaire.

Après purification de la solution à partir des résidus de nucléotides et séparation par électrophorèse des chaînes d'ADN par le paramètre de poids moléculaire, on peut facilement déterminer s'il existe ou non un gène souhaité dans l'échantillon étudié.

Avantages de la PCR

Les tests de laboratoire utilisant la PCR permettent d'obtenir encore plus d'informations que la présence de l'ARN du virus. En déterminant le paramètre du niveau de rayonnement radioactif, il est possible d'identifier la quantité de matériel génétique qui était à l'origine contenue dans l'échantillon étudié. Dans le cas de l'hépatite B, déterminez l'indicateur de charge virale

Un autre avantage de cette méthode est le très haut degré de sensibilité de la réaction CR. Il est beaucoup plus élevé que les méthodes classiques de détection de virus. Idéalement, pour identifier le gène souhaité, pour la PCR, un seul virus dans l'échantillon suffit.

De plus, la PCR est complètement spécifique. Ses amorces sont conçues de manière à correspondre pleinement aux régions uniques des gènes souhaités qu'aucune autre séquence ne possède. Comme les empreintes digitales sont uniques, il existe des séquences de nucléotides uniques dans chaque gène.

Analyse qualitative de la PCR

L'analyse qualitative vous permet d'identifier uniquement la présence d'un virus dans le sang. Ce test doit être effectué chez tous les patients chez qui des anticorps anti-hépatite C ont été détectés dans le sang. Il ne peut en résulter que l'une des deux valeurs suivantes: «détecté» ou «non détecté». Chez une personne en bonne santé, la norme (valeur de référence) doit être "non détectée".

Il existe une interprétation particulière de ces résultats de la recherche qualitative:

  • Le résultat est "détecté". Cela signifie qu'un fragment d'ARN spécifique au virus de l'hépatite C a été trouvé dans l'échantillon de matériel biologique prélevé analysé. Par conséquent, le patient est infecté par le virus de l'hépatite C. Si le résultat d'une PCR de haute qualité est «détecté», cela indique que le virus se multiplie et à ce moment, il infecte de nouvelles cellules du foie dans le corps.
  • Le résultat est "non détecté". Un tel verdict indique que dans l'échantillon de matériel biologique obtenu dans ce laboratoire et analysé, aucun fragment d'ARN spécifique du virus de l'hépatite C n'a été trouvé, mais que la concentration en ARN de l'infection par l'agent pathogène était inférieure à la limite de sensibilité du test.

Dans la phase aiguë de l'ARN du virus de l'hépatite C, de telles études qualitatives par la méthode PCR peuvent être détectées dès 1-2 semaines immédiatement après l'infection du corps, c'est-à-dire bien avant l'apparition des anticorps anti-hépatite.

Des résultats de test inexacts de cette étude peuvent être obtenus par:

  • biomatériau contaminé;
  • la présence d'héparine dans le sang du patient;
  • la présence dans l'échantillon de substances chimiques ou protéiques (inhibiteurs) agissant sur les divers composants de la PCR.

Pour effectuer une analyse qualitative de la PCR, aucune préparation spéciale du patient pour l’étude n’est requise. Le sang veineux est utilisé comme matériau.

Evaluation des résultats

Les tests PCR de haute qualité ont un certain degré de sensibilité et, en fonction de la précision des recherches et du niveau d’équipement du laboratoire, ils peuvent varier de 10 à 500 UI / ml.

Cela signifie que si le virus dans l'échantillon de sang est présent à une très faible concentration (inférieure à la valeur seuil de la sensibilité de ce laboratoire), le résultat peut alors être déterminé comme "non détecté" chez un patient patient. Pour cette raison, lors de l'analyse qualitative de la PCR avec un faible niveau de virémie (faible concentration de virus), par exemple, pour les patients sous traitement antiviral, il est très important de connaître le seuil de sensibilité de ce système de diagnostic.

Variantes de systèmes de diagnostic

Pour contrôler la réponse virologique, il est recommandé d'utiliser des systèmes de diagnostic avec un seuil de sensibilité d'au moins 50 UI / ml pour un traitement antiviral. Ces critères sont satisfaits, par exemple, avec les analyseurs Cobas Ampicolor HCV-Test (exacts à 50 UI / ml), ainsi qu'avec l'ARN RealBest HCV (avec une sensibilité de 15 UI / ml).

Selon les recommandations de l’OMS, pour établir un diagnostic définitif de l’hépatite C, il est nécessaire de se baser uniquement sur la base d’une triple détection du RNA du virus C dans les échantillons de sérum du patient, en l’absence d’autres variétés de marqueurs de l’hépatite.

Outre les méthodes de PCR, un test TMA (méthode d'amplification de la transcription) est également utilisé pour détecter l'ARN du VHC chez les patients. Son seuil de sensibilité est optimal (5 à 10 UI / ml), mais dans notre pays une telle méthode de test n’est pas encore très répandue.

Gamme de modifications de virus détectables

Une telle détermination qualitative dans le sérum de la présence d'ARN du virus de l'hépatite C permet de déterminer plusieurs génotypes de ce virus. Actuellement, la science connaît plus de six génotypes de ce virus, ainsi que près de 10 sous-types de cette maladie.

Dans notre pays, les virus communs 1, 2, 3 génotypes. Les laboratoires peuvent détecter les génotypes suivants: 1a et 1b, 2a, 2b et 2c, ainsi que 3, 4, 5a et 6, quels que soient leurs sous-types. Pour toutes les modifications de virus, la spécificité de la détection est de 100%.

Analyse quantitative par PCR

À l'aide d'un test PCR quantitatif, on détermine le niveau de concentration du virus de l'hépatite dans des échantillons de sang (charge virale). Ce test de virémie (concentration en virus) vous permet de déterminer le nombre d'unités d'un certain matériel génétique (l'ARN le plus viral), qui est détecté dans une certaine quantité. Dans ce cas, déterminez sa concentration en 1 ml, ce qui correspond à 1 cu. voir

Les paramètres quantitatifs de l'analyse sont exprimés sous forme de chiffres; à cet effet, les unités internationales (UI) par millilitre (ml), appelées UI / ml, sont utilisées comme unités de mesure. Or, dans certains laboratoires, la quantité de virus peut être déterminée dans d'autres unités: le nombre de copies par ml est indiqué en copies / ml.

  • Dates: pour l’hépatite C, une telle analyse quantitative de la PCR est effectuée immédiatement avant le début du traitement. Puis les 1ère, 4ème, 12ème et 24ème semaines. L'évaluation à la 12e semaine est indicative, elle permet de déterminer l'efficacité du traitement.
  • Préparation à l'analyse. Pour effectuer une analyse quantitative de la PCR, aucune préparation spéciale du patient pour l'étude n'est requise. Une demi-heure avant l'échantillonnage ne devrait pas fumer. Le sang veineux est utilisé comme matériel de laboratoire.

Evaluation des résultats

Pour différents systèmes de test de laboratoire, il existe différents facteurs de conversion pour cet indicateur en UI / ml. En moyenne, ils prennent un paramètre de conversion, dans lequel 4 copies / ml = 1 UI / ml. Ainsi, si le laboratoire donne le résultat de l'analyse PCR, 2,4 * 10 6 copies / ml, ce paramètre doit être divisé en 4 et nous obtiendrons 6 * 10 5 UI / ml.

Une charge de 800 000 UI / ml est considérée comme élevée, ce qui correspond approximativement à 3 000 000 copies / ml. Selon certains auteurs, une faible virémie correspond aux paramètres de la PCR quantitative inférieurs à 400 000 UI / ml.

À la suite du test quantitatif, les résultats finaux peuvent être fournis non pas sous forme de valeur numérique, mais: «en dessous de la plage de mesure» ou «non détectée».

  • Evaluation: "en dessous de la plage de mesure." Cela suggère que le test quantitatif n'a pas pu détecter l'ARN du virus de l'hépatite C, mais que le virus lui-même est présent dans le corps à de très faibles concentrations. Ceci est mis en évidence par un test qualitatif supplémentaire confirmant la présence du virus.
  • Note: non détecté. Ce résultat indique que le test quantitatif n'a pas été trouvé dans l'échantillon d'ARN du virus.

Le paramètre de la charge virale, tout d’abord, détermine le degré de contagiosité de la maladie, le niveau de "contagiosité" du patient. Plus la concentration de virus du patient est élevée, plus grande est la probabilité de le transmettre à d’autres personnes. Par exemple, lors d'un rapport sexuel avec une personne malade ou verticalement. Cet indicateur quantitatif permet également de déterminer l'efficacité du traitement du patient.

Effectuer une analyse quantitative du CCP est important pour la thérapie antivirale, en évaluer le succès et planifier la durée du cours. Ainsi, avec une réponse rapide du corps au traitement et un faible degré de virémie, la durée du traitement peut être raccourcie.

Si le paramètre de PCR quantitative est lentement réduit, le traitement antiviral doit être prolongé ou modifié. Si le niveau de charge virale est faible, il s'agit d'un facteur favorable au traitement, mais s'il est élevé, la méthode de traitement utilisée est inefficace et les médicaments ou les méthodes d'utilisation doivent être modifiés.

Diagnostic avec PCR pour l'hépatite C

Tout le monde ne sait pas pourquoi ils utilisent la méthode de diagnostic PCR pour l'hépatite C. L'un des groupes de maladies les plus répandus est celui des maladies infectieuses du tube digestif. Le plus souvent, l'estomac (ulcères), les intestins (colite, entérite) et le foie (hépatite) en souffrent.

Parmi tous les organes énumérés ci-dessus, le plus lourd fardeau est imposé au foie. Dans le corps, le rôle du foie est extrêmement important:

  1. Pratiquement toutes les réactions métaboliques ont lieu dans le foie (c’est là que se forment tous les types de composants vitaux qui permettent au corps de fonctionner pleinement).
  2. Le foie est le principal organe de désintoxication. Grâce à son aide (notamment via la bile), de nombreux substrats sont éliminés, ce qui peut provoquer une intoxication et avoir des conséquences graves.

Malheureusement, beaucoup de gens ne surveillent pas leur santé, à cause de ce que le foie commence à souffrir. Une hépatite d'étiologies diverses (virale, toxique) se développe généralement.

Définition de l'hépatite

Les hépatites virales occupent une place importante parmi les maladies du foie. La gravité de l'évolution de la maladie, la complexité du traitement les placent en première place parmi les pathologies de l'autre nature de cet organe.

Toutes les hépatites sont divisées en aiguë et chronique. Les hépatites A et B sont classées comme aiguës, parmi les hépatites chroniques C en premier.

Cette maladie est causée par le virus de l’hépatite C. Une des caractéristiques de cette maladie est qu’elle peut durer longtemps sans manifestation clinique.

Il se transmet principalement par le sang. Avec le flux de sang, le virus pénètre dans le foie, où il commence à se multiplier dans ses cellules. L'accumulation de virions entraîne la destruction de l'hépatocyte infecté. En réponse, des anticorps commencent à être produits, lesquels commencent à attaquer les restes d'hépatocytes. De ce fait, un pool contre les cellules hépatiques se développe avec le temps, ce qui aggrave l'évolution de la maladie.

En raison du fait que la maladie est asymptomatique ou asymptomatique et que les signes cliniques n'apparaissent qu'avec des lésions cellulaires importantes, cette maladie nécessite la création de méthodes de diagnostic permettant de détecter sa présence et de prendre les mesures appropriées.

Diagnostic de l'hépatite C: analyses qualitatives et quantitatives

Actuellement, pour le diagnostic de l'hépatite C en utilisant des méthodes telles que la biopsie du foie, l'immunogramme.

Ils vous permettent de déterminer directement la présence d'hépatocytes infectés (échantillon de biopsie du foie) ou d'anticorps spécifiques dirigés contre les cellules affectées (immunogramme). Cependant, il existe une méthode qui vous permet de déterminer de manière fiable la présence du virus lui-même. Cette PCR est une réaction en chaîne de la polymérase.

L'essence de cette méthode réside dans le fait que dans certaines conditions, la production de chaînes d'ARN se produit. Cela est dû au fait qu'il y a des fragments d'une particule virale dans le sang ou dans la biopsie en question. Lors de la connexion de certaines molécules dans le milieu, il se produit une synthèse de chaînes complémentaires à l'ARN viral. Par la suite, lors de leur analyse et de leur comparaison avec la séquence nucléotidique connue du virus de l’hépatite C, il est possible de déterminer si le virus est présent dans le corps et si une atteinte hépatique est présente.

La PCR est effectuée après la détection d'anticorps spécifiques dans le sang contre le virus de l'hépatite. Après le test, le résultat est obtenu - l'ARN est «détecté» ou «non détecté». Parfois, il peut dire «pas assez de matériel» - dans ce cas, il est nécessaire de répéter l'analyse pour l'hépatite C.

Si le nombre de particules virales est inférieur à la quantité minimale requise, nous pouvons alors affirmer qu'il n'y a pas d'hépatite et que des quantités minimales de matériel génétique pourraient être «confondues» en raison du mimétisme du matériel génétique ou de certaines séquences de nucléotides pouvant coïncider avec celui du virus.

  1. Avec la PCR, un résultat négatif peut être observé lorsqu'il y a effectivement des particules virales dans le sang, mais elles sont si petites (une infection est survenue récemment ou l'analyse a été précédée d'un traitement antiviral intensif à long terme) que le système de test n'a tout simplement pas pu déterminer correctement leur concentration. ARN - "non détecté."
  2. Si la PCR a un résultat positif, il y a tellement de particules virales dans le sang que leur nombre dépasse le seuil de sensibilité inférieur du système de test. Dans ce cas, le risque de développer un processus infectieux est élevé (ou il est déjà présent à un stade assez avancé). Habituellement, une quantité élevée de virus est déjà une indication pour le traitement et la greffe de foie ultérieure.

Parfois, un test peut devenir un faux positif ou un faux négatif.

Un résultat de PCR faussement négatif de l'hépatite est observé lorsque certains composants, inhibant la production de copies de la particule virale, sont présents dans le milieu réactionnel. De ce fait, il est impossible d'obtenir une image fidèle de l'état du sang, ce qui contribue au passage du virus et à la progression de la maladie. La présence d'héparine dans le sang peut également affecter la réaction (en réduisant la viscosité relative du sang). Une interprétation erronée de l'analyse est possible même lorsque les conditions de transport et de stockage du matériel soumis à l'enquête n'étaient pas remplies.

Résultats faux positifs, lors du diagnostic de l'hépatite C, PCR le plus souvent lorsque le tube ou l'environnement de travail est contaminé. De plus, des résultats positifs peuvent être observés en présence d'autres groupes de virus de l'hépatite (dus à une réaction croisée).

Analyse qualitative de la PCR pour la détection de l'hépatite C

La présence dans le sang d'un grand nombre de cryoglobulines affecte également directement la conduite de la PCR. Pour cette raison, il est impératif de déterminer leur concentration dans le sang avant de rechercher l'hépatite C afin de détecter la distorsion du résultat à l'avance et de la prévenir.

Après ces tests, il devient clair s'il y a des particules virales dans le sang. Lors de leur détermination, il est recommandé de commencer immédiatement une thérapie antivirale afin de ralentir la progression du processus. Contrairement à l'hépatite B, il n'existe pas de traitement complet contre l'hépatite C; la maladie ne fait que passer au stade latent et commence à progresser plus lentement. Les dommages au foie sont inévitables. À la dernière étape du processus, lorsque le foie ne peut plus assumer sa fonction, il peut être nécessaire de le greffer.

Le traitement s'effectue principalement avec deux médicaments - l'interféron et la ribavirine.

Prouvé leur efficacité pour ralentir le processus de défaite des hépatocytes. En cours de route, la thérapie par perfusion est nécessairement prescrite pour faciliter le travail du foie.

Tous les patients ayant constaté une augmentation du nombre de particules virales dans le sang sont obligatoirement enregistrés auprès d'un hépatologue. Plusieurs fois par an, il leur est recommandé de se soumettre à un examen préventif afin de déterminer la progression du processus et la détection rapide des indications de transplantation. En outre, il est possible d’utiliser des hépatoprotecteurs, bien que les opinions des médecins diffèrent quelque peu. Certains pensent que ces médicaments vous permettent de suspendre le processus et de protéger les hépatocytes non encore affectés. d'autres sont convaincus qu'il est inutile de les prendre et qu'un traitement antiviral intensif devrait être mis en place.

Ainsi, l'hépatite C appartient à la catégorie des maladies, dont l'identification présente certaines difficultés. L’amélioration des méthodes de diagnostic, ainsi que les examens préventifs effectués en temps voulu, permettront de réduire l’incidence de cette maladie. La prévention de cette maladie est importante. Il faut soigneusement éviter le contact avec le sang, refuser de prendre des médicaments, alors seulement cette maladie sera éradiquée. Le principal aspect de la prévention et du traitement est l’attitude consciente du patient à l’égard de sa santé.

Décodage de l'analyse PCR pour l'hépatite C

Une étude de laboratoire spéciale - l'analyse de la PCR pour l'hépatite C - simplifie grandement le diagnostic de cette maladie virale. L'hépatite C ne fait pas exception: un petit échantillon de sang peut être testé pour la teneur en arn et autre matériel génétique de l'agent viral. Tous les sujets présentant des anticorps anti-hépatite C circulant dans le plasma sanguin sont soumis à une analyse par PCR, dont la présence confirme la détection qualitative.

L'interprétation des résultats est interprétée dans la colonne du formulaire de recherche comme une analyse "positive" ou "négative". En outre, en utilisant la PCR, il est possible non seulement de déterminer la teneur minimale en virus, mais également de compter le nombre de particules. Ainsi, il est possible de déterminer la charge virale estimée et de déterminer les tactiques de traitement médical aussi précisément que possible.

Lésions hépatiques virales

Le foie en tant qu'élément du tube digestif prend un fardeau énorme. Dans ses cellules, la plupart des réactions métaboliques de tous les types de métabolisme se produisent, ce qui garantit le fonctionnement optimal de tous les organes et systèmes. Dans le même temps, sa valeur de détoxication est idéale pour éliminer les scories et les produits métaboliques contenant la bile enzymatique.

La défaite du foie par des virus de nature différente est extrêmement dangereuse pour le corps. Un tableau clinique diversifié et le non-respect du traitement font de l'hépatite le premier rang en termes de risques pour la santé. L'hépatite C est chronique et peut être négative pendant longtemps, parasitant lentement le corps humain. Le virus est transmis par les liquides biologiques: le sang et moins souvent par le sperme. L'abus de drogues de seringues non stériles, l'accouchement naturel de femmes infectées, les blessures accidentelles ou les coupures par des agents de santé peuvent entraîner la transmission du virus à des personnes en bonne santé.

Le diagnostic opportun de la maladie est empêché par le tableau clinique caché et la pathologie non systématique. Un résultat positif peut simplement être manqué par des analyses peu performantes. Seule une atteinte importante des cellules hépatiques provoque une certaine symptomatologie. Cependant, l’effet négatif de la virémie ne laisse alors aucune chance de restaurer l’organe.

La médecine moderne a mis au point des méthodes spéciales pour reconnaître les plus infimes traces du virus. La biopsie hépatique par PCR, PCR, permet de détecter le moindre dommage hépatique et le niveau minimal d'anticorps contre le virus. L'analyse à l'aide de la PCR est la méthode de diagnostic la plus simple et la plus fiable.

Analyse qualitative

L'essence de la réaction de polymérase est la génération d'une séquence d'arn. La réaction est effectuée en présence des mêmes protéines virales dans le plasma sanguin.

Des catalyseurs spéciaux vous permettent de synthétiser une séquence virale similaire de la chaîne, qui est comparée aux nucléotides connus de l'ARN viral. Sur cette base, ils déterminent la charge virale et les dommages au foie.

La PCR est capable d'attraper même une seule présence du gène souhaité dans le sang prélevé. Une telle réaction en chaîne de diagnostic est également très spécifique. La séquence des chaînes de nucléotides est unique pour chaque créature, de sorte que les amorces enzymatiques créent des séquences identiques de l'information génétique souhaitée. Ainsi, tout virus peut être détecté avec la moindre précision, même si son indicateur quantitatif est extrêmement petit.

Les patients dans le sang desquels ont été trouvés des anticorps produits contre l'hépatite virale mènent une étude qualitative sur la PCR ou l'Eph. Le résultat de l'analyse peut être à la fois positif et négatif, ce qui nécessite un traitement dans les deux cas.

La réponse positive de la réaction en chaîne doit être déchiffrée en tant que présence de fragments d'ARN du virus de l'hépatite ou en tant que phénomène d'infection.

Actuellement, dans le plasma sanguin, le virus se multiplie activement et parasite les cellules du foie. Le diagnostic PCR peut donner une réponse négative s'il y a peu de particules d'ARN viral présentes dans le plasma, en dessous du niveau de sensibilité du test ou pas du tout. Après une infection directe, la quantité de virus croît relativement lentement et, seulement après une à deux semaines, si une recherche qualitative ou autre peut les isoler.

Une analyse négative peut être obtenue dans les cas suivants:

  1. Lors de la prise de matériel dans des conditions inappropriées, obtenir un échantillon de sang contaminé;
  2. Lorsqu'un patient a déjà reçu des injections d'héparine.
  3. Avec la présence d'autres enzymes et substrats dans les échantillons prélevés, ce qui perturbe le déroulement de la réaction en chaîne.

Analyse quantitative

Le test quantitatif en tant que diagnostic microbiologique est conçu pour déterminer la charge virale. Une analyse qualitative confirmée de la virémie sert de base pour déterminer la quantité de matériel génétique et sa concentration. Le nombre d'arn viral détecté est déterminé en unité de volume sanguin, généralement en 1 millilitre. Les matériaux requis sont exprimés en unités internationales, certains laboratoires utilisent le nombre de copies dans l’analyse eif.

Habituellement, avant tout régime thérapeutique, la PCR est analysée quantitativement. Le comptage de l'arn viral est effectué assez souvent: après une, quatre, douze et vingt-quatre semaines. La 12ème semaine est considérée comme indicative car, sur la base de l'analyse, l'interprétation de l'efficacité des mesures thérapeutiques est réalisée au cours de cette période.

L'analyse quantitative par PCR ou IFA implique le prélèvement d'échantillons dans une veine.

L'interprétation des résultats lorsque la charge virale est élevée commence par un chiffre de 800 000 UI / ml. Un tel résultat positif pour l'hépatite C reflète la présence d'au moins 3 000 000 copies par millilitre de sang. Le faible niveau de virémie s'arrête à 400 000 UI / ml. Les résultats de l’étude peuvent être des valeurs de réponse négative, ainsi que l’indicateur "situé au-dessous de la plage de mesure".

Un test quantitatif avec une estimation «inférieure à la plage de mesure» indique que pendant la réaction, il n'était pas possible de calculer l'ARN. Le virus circule toujours dans le corps, comme l'indique un test qualitatif positif. Un indicateur négatif d'analyse quantitative de pcr ou d'ifa indique l'absence d'arn dans cet échantillon de sang.

Malgré des méthodes limitées de transmission du virus par le sang, le risque de transmission du virus par les sécrétions des glandes sexuelles de la mère à l'enfant augmente.

L'analyse quantitative fournit une aide importante dans l'évaluation des interventions thérapeutiques. Ifa et la PCR reflètent l'action des antiviraux, aident à déterminer le moment du traitement et à évaluer la formation d'immunité des patients. La réponse négative précoce des tests de laboratoire indique un traitement réussi et la nécessité de réduire la durée du traitement. Le déclin lent de la virémie peut être interprété comme la nécessité de modifier le cours du traitement. Le niveau de charge virale détermine le pronostic de la maladie. L'hépatite dont le taux est faible risque d'être simplement traitée et le virus peut être complètement éliminé du corps. Des taux élevés de présence virale dans le sang nécessitent une attention particulière et un traitement polyvalent.

Analyse qualitative de l'hépatite C

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Une analyse qualitative de la réaction en chaîne de la polymérase - La PCR pour l'hépatite C détermine la présence ou l'absence de VHC dans le corps. En laboratoire, la structure de l'ARN, incluant le virus, est étudiée. En cas de détection du virus C, il est nécessaire de suivre un traitement, car l’état négligé du foie aura des conséquences graves. Une PCR de haute qualité est également effectuée après la récupération pour confirmer l'absence d'anticorps. Assigné pour l'inspection de routine. Avec une faible concentration de l'agent causal dans le sang, la PCR (qualitative) peut ne rien détecter du fait que le système de diagnostic a ses propres seuils de sensibilité. Dans le cas du stade initial de la maladie ou de la forme bénigne, les ultra-diagnostics par PCR sont effectués sur un équipement ultra-sensible.

Qu'est-ce que le virus à ARN?

Le terme ARN du virus de l'hépatite C (ou ARN du virus de l'hépatite C) désigne la maladie du foie elle-même. Le virus C se lie à la cellule saine du corps en pénétrant à l'intérieur. Au fil du temps, se répandant dans tout le corps, il suffit de pénétrer dans le sang. En conséquence, l'agent pathogène pénètre dans le foie, fusionne avec ses cellules et travaille dur. Les cellules hépatiques (hépatocytes) travaillent sous son influence, subissent des modifications et en meurent. Plus le virus C reste longtemps dans le foie, plus le nombre de cellules meurent. Au fil du temps, développez des maladies dangereuses qui entraînent une dégénérescence maligne et la mort.

L'infection du foie par ce type de virus peut ne pas se manifester de l'extérieur. Pendant de nombreuses années ou décennies, une personne infectée se sent complètement en bonne santé et seul un examen aléatoire révèle le plus souvent une pathologie. Lors du don de sang pour l'hépatite, une partie de la chaîne d'ARN (acide ribonucléique), qui fait partie du gène humain (ADN), est examinée. Les résultats des tests de laboratoire ne doivent pas être utilisés pour l'auto-traitement, car il ne s'agit que d'un indicateur. L'image exacte et le diagnostic ultérieur sont mieux déterminés par le médecin.

Une fois terminé: indications pour la recherche

Pour confirmer le VHC, une analyse PCR est effectuée (réaction en chaîne de la polymérase). Les études de PCR aident à trouver le matériel pathogène dans la structure de l'ARN et à prescrire un traitement efficace. Nommé dans les cas suivants:

  • détection de signes d'inflammation du foie;
  • études de dépistage pour la prévention;
  • examen des personnes en contact;
  • diagnostic d'hépatite d'origine mixte (détermination du principal agent pathogène);
  • déterminer le niveau d'activité de reproduction du virus dans la forme chronique;
  • cirrhose du foie;
  • déterminer l'efficacité du traitement prescrit.
Les études de PCR sont prescrites par un médecin afin de déterminer l'efficacité d'un traitement pour l'hépatite.

Il existe une analyse qualitative et quantitative de la PCR. La PCR quantitative montre le ratio de pourcentage d'ARN par le nombre de porteurs de virus dans le sang et qualitative indique la présence ou l'absence de virus. Un indicateur de qualité positif (présence d'ARN de l'hépatite C) nécessite également des recherches quantitatives. Un niveau élevé de concentration de l'agent responsable de l'hépatite C est associé au risque de transmission, c'est-à-dire d'infection de tiers. Un faible nombre est mieux traitable. La quantité de virus à ARN dans le sang n’est pas liée à l’intensité de la maladie. Une analyse par PCR est également effectuée dans le cas d'un traitement par interféron afin de prescrire la durée et la complexité du traitement.

Caractéristiques de l'analyse PCR de haute qualité pour l'hépatite C

Une analyse qualitative avec l'indice de réaction en chaîne de la polymérase est attribuée à tous les patients présentant des anticorps dans le sang pour l'hépatite C. Ceux qui ont été guéris et qui sont guéris doivent repasser le test. Il est recommandé de réussir le test de dépistage de l'hépatite B, puis, en cas de conclusion positive, et de l'hépatite D. En outre, la réaction analysée qualitativement doit être réalisée en association avec d'autres tests sanguins. Les analyses fourniront une image complète de la propagation virale.

D'après les résultats du test, seul un test positif pour l'hépatite C sera visible ou négatif, c'est-à-dire la présence ou l'absence d'un virus. Si la sortie est "détectée", le virus est et reste actif. La désignation "non détecté" indique l'absence de virus ou sa petite quantité. Avec cet indicateur, il convient de garder à l'esprit que la sensibilité analytique des systèmes de diagnostic est différente et que l'hépatite C à ARN peut encore être dans le sang, mais ne se manifeste pas dans l'analyse.

La méthode PCR particulièrement sensible ultra-hépatite C révèle même de faibles quantités. Une étude d'hybridation par fluorescence est utilisée, qui est plusieurs fois supérieure aux systèmes de PCR standard. La méthode est utilisée dans plusieurs cas:

  • formes présumées cachées de l'hépatite C;
  • Le diagnostic PCR n'a pas confirmé l'agent pathogène, mais il existe des anticorps.
  • en cas de récupération;
  • détecter une infection précoce.
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Analyse de décodage

Le décodage PCR du VHC affecte la décision finale lors du diagnostic, en particulier avec la méthode ultramétode. Le principal inconvénient de cette étude est le strict respect des conditions de stérilité pour l’échantillon et le matériel. Une légère déviation montre parfois des conclusions analytiques inexactes, complique le diagnostic et le traitement ultérieur. L'analyse de la PCR pour la détermination de l'ARN de l'hépatite ne donne pas toujours une image fiable de la maladie, des imprécisions sont parfois permises, et dans les deux sens.

Pour diagnostiquer le virus de l'hépatite, il est recommandé d'utiliser un examen complet.

Norme des indicateurs

L’absence d’anticorps JgM contre l’hépatite virale C dans les résultats de l’étude est considérée comme la norme dans l’analyse de la réaction en chaîne de la polymérase. Dans le même temps, les résultats de l'analyse sérologique indiquent la présence d'anticorps anti-virus C, ce qui se situe également dans les limites de la normale. Une définition qualitative ne montre pas l’intensité de la maladie, elle révèle seulement l’agent responsable de l’hépatite C dans l’ARN. Cette analyse est répétée après le traitement pour confirmer la récupération réelle.

Déviations

Si des anticorps anti-JVM anti-JVM sont présents, cela indique une infection en développement. La maladie dans le même temps se développe de manière aiguë ou chronique, se manifestant à différents stades. Si une diminution du nombre d'anticorps est enregistrée, l'analyse indiquera que les résultats du traitement ont été obtenus pendant la récupération. Le diagnostic ne révèle que de très rares cas de faux positifs. On les trouve chez les femmes pendant la grossesse et chez les personnes atteintes d'autres maladies infectieuses.

Etude PCR pour l'hépatite C: types, indications, transcription

L'hépatite virale C est une maladie grave qui se manifeste par des lésions du foie. Chez 80% des patients, cela devient chronique. Le virus se multiplie dans les cellules du foie - les hépatocytes - et provoque leur mort. Le tissu mort est remplacé par des foyers de tissu conjonctif, une fibrose se développe.

Au fur et à mesure que la fibrose se développe, le foie est incapable d'exercer ses fonctions, la cirrhose du foie commence, ce qui est dangereux en raison de ses complications: pression accrue dans la veine porte, saignements gastro-intestinaux, insuffisance de la coagulation sanguine, changements mentaux dus à des lésions des noyaux cérébraux.

La cause de la maladie est une infection par un virus de la famille des Flaviviridae, appartenant au type des virus à ARN. Cela signifie que le matériel génétique par lequel les protéines de l'agent pathogène sont synthétisées est codé dans la molécule d'acide ribonucléique. L'infection se produit par le sang, sexuellement et d'une femme enceinte jusqu'au fœtus. Malheureusement, un délai suffisamment long peut s'écouler entre l'infection et le début de la production d'anticorps - de deux semaines à six mois. Cela ne permet pas de déterminer l'infection par la méthode de dosage immunologique et de commencer le traitement à un stade précoce.

Qu'est-ce que l'analyse PCR?

La PCR est une méthode d'analyse moléculaire qui permet de détecter le matériel génétique de l'agent pathogène dès la première semaine après l'infection en utilisant une réaction en chaîne de la polymérase. L'étude a une spécificité et une précision élevées et permet non seulement de déterminer la présence ou l'absence du virus, mais également sa concentration et son génotype.

Pour l'étude, le sang d'un patient est prélevé dans lequel l'ARN du virus peut potentiellement être localisé. Des amorces sont ajoutées aux régions synthétisées artificiellement dans le sang du gène de petite longueur souhaité, et l’ARN polymérase est une enzyme spéciale qui augmente de façon répétée la quantité de matériel génétique de l’agent pathogène. À l'aide d'un appareil spécial, plusieurs cycles de chauffage et de refroidissement sont effectués. Ensuite, le matériel est analysé et comparé aux gènes connus du virus, sur la base desquels une conclusion est formulée à propos de la présence ou de l'absence d'infection.

Types d'analyse PCR pour l'hépatite C

Il existe trois types d'analyse PCR:

  1. Analyse qualitative de la PCR. La première étape de l'étude. Cela vous permet d'identifier le matériel génétique du virus dans le sang.

  • Analyse quantitative de la PCR. Vous permet de déterminer la charge virale - la concentration du matériel génétique de l'agent pathogène dans un millilitre de sang. Cette étude est réalisée avant le début du traitement, puis au cours de la première, quatrième, douzième et (si le cours est long) vingt-quatrième semaine de traitement pour évaluer son efficacité.

  • Génotypage L'agent causal de l'hépatite C mute souvent et rapidement. Sept variantes de ce génotype du virus ont été trouvées sur la planète. En Russie, les premier, deuxième et troisième types sont courants. La résistance au traitement de chacun des génotypes est différente. Par exemple, l'efficacité du traitement du premier type est de soixante pour cent et, pour les deuxième et troisième, elle atteint quatre-vingt-cinq. Par conséquent, afin de sélectionner les médicaments appropriés et de prescrire un traitement d'une durée suffisante, il est nécessaire de déterminer exactement le type de virus avec lequel le patient est infecté.
  • Indications pour l'analyse PCR de l'hépatite C

    L'étude PCR est prescrite dans les cas suivants:

    • contact avec une personne malade au cours de laquelle une infection pourrait survenir;
    • dosage immunoenzymatique positif;
    • signes de cirrhose: modifications de la taille du foie, hypertrophie de la rate, apparition sur l'abdomen du plexus veineux sous-cutané;
    • l'apparition de symptômes de dommages au foie: douleur à l'abdomen droit, jaunissement de la peau;
    • augmentation de l'activité de l'ALT et de l'AST dans l'analyse biochimique du sang;
    • avant de commencer le traitement pour déterminer la charge virale;
    • surveiller l'efficacité du traitement antiviral;
    • après le traitement pour contrôler la rechute;
    • en présence d'hépatite B diagnostiquée, pour exclure les dommages mixtes au foie.

    Explication des études PCR sur l'hépatite C

    Le décodage de l'analyse PCR et du dosage immunoenzymatique de l'hépatite C doit être effectué par un hépatologue ou un spécialiste des maladies infectieuses. L'analyse des résultats de la PCR est nécessaire en combinaison avec les données d'analyse biochimique du sang, de la biopsie et des ultrasons. Seul un médecin qualifié sera en mesure d'analyser les résultats de la recherche et, sur cette base, de prescrire le traitement approprié.

    Décodage de l'analyse qualitative.

    Dans le matériel biologique analysé trouvé le matériel génétique de l'agent pathogène. Infection confirmée.

    L'infection est absente ou la quantité d'ARN de l'agent pathogène est inférieure à la limite de sensibilité.

    Décodage de l'analyse quantitative.

    Taux normal pour les personnes en bonne santé. Cela signifie qu'il n'y a pas d'ARN de l'hépatite C dans le matériel étudié ou que sa concentration est inférieure au seuil de sensibilité de l'étude.

    La concentration en ARN est inférieure à la plage de quantification. Ces résultats sont interprétés très soigneusement, corrélés avec les données d’autres études, souvent ré-étudiées.

    Le niveau de charge virale à une concentration donnée est considéré comme faible. Habituellement, une diminution de la quantité de virus signifie que le traitement est efficace.

    Plus de 8 * 10 ^ 5 UI / ml

    Le niveau de charge virale à une concentration donnée est considéré comme élevé.

    Plus de 2,4 * 10 ^ 7 UI / ml

    La quantité d'ARN au-dessus de la limite supérieure de la plage de quantification. Il est impossible de tirer des conclusions sur le degré de charge virale avec ce résultat. Habituellement, dans de tels cas, le test est répété avec la dilution d'un échantillon de sang.

    Décoder le génotypage.

    ARN détecté d'un génotype spécifique

    Le virus de l'hépatite C d'un certain génotype et sous-type a été détecté dans le biomatériau. Le résultat est codé en chiffres romains et en lettres latines, par exemple - 1a, 2b. Au total, il y a sept génotypes et soixante-sept sous-types, cependant, en Russie, il n'y a que trois premiers types.

    ARN du virus de l'hépatite C détecté

    L'ARN a été trouvé dans le sang d'un génotype rare pour la Russie, qui ne peut être attribué au premier, deuxième ou troisième type. Plus de recherche est nécessaire.

    Ce résultat indique que le patient est en bonne santé ou que la quantité d'ARN de l'agent pathogène est trop petite.

    Il est possible que l'analyse PCR de l'hépatite C soit négative et que le test d'immunosorbant lié à une enzyme reconnaisse les anticorps contre le virus. Cela signifie que le patient a eu l'hépatite C aiguë et a guéri par lui-même. Environ vingt cas d’infection entraînent une guérison spontanée si le corps du patient présente une résistance suffisante à l’infection.

    Bien que la PCR soit une analyse extrêmement précise, ses résultats peuvent être faussés dans les situations suivantes:

    • le sang a été transporté au laboratoire dans des conditions inappropriées, la température a été violée;
    • l'échantillon de biomatériau était contaminé;
    • il y avait des traces résiduelles d'héparine et d'autres anticoagulants dans le sang;
    • Les investigateurs se sont révélés être des inhibiteurs - des substances qui ralentissent ou arrêtent la réaction en chaîne de la polymérase.

    Les avantages de la PCR par rapport aux autres méthodes

    1. Diagnostic dans les premiers stades. La PCR détecte le matériel génétique de l'agent causal. En utilisant l'analyse par immunofluorescence, seules les immunoglobulines peuvent être déterminées - les substances que l'organisme produit en réponse à une infection. En cas d'infection par l'hépatite C, l'intervalle entre l'infection et le début de la réponse immunitaire peut être de plusieurs semaines et plusieurs mois. À ce stade, l'ELISA sera inefficace. La PCR donnera une réponse dans la première semaine après l'infection.

  • Faible probabilité d'erreur. Dans le matériel à l’étude, déterminez l’aire de matériel génétique qui n’est caractéristique que d’un seul type de pathogènes. Cela élimine les faux résultats. Lorsque des erreurs ELISA sont possibles, étant donné que le même type d'anticorps peut être libéré contre différents virus, ces anticorps sont appelés anticorps croisés.

  • Haute sensibilité. La PCR permet de détecter l'ARN de l'agent causal même en quantités minimes. Cela permet d'identifier les infections cachées.
  • Comment se préparer au don de sang pour les études PCR

    Pour l'analyse PCR de l'hépatite C, du sang veineux est collecté. Habituellement, deux portions de sang sont prélevées dans la veine du patient à la fois: la première est envoyée pour la PCR et la seconde par ELISA. Cela a pour but d'évaluer plus précisément le degré d'infection d'un patient par un virus et la manière dont l'immunité lutte contre ce virus.

    Habituellement, le patient est tenu de respecter les règles suivantes:

    • une prise de sang est prise le matin;
    • L'intervalle entre le dernier repas et le don de sang devrait être de huit à dix heures.
    • deux ou trois jours avant l'analyse, il est nécessaire d'abandonner les aliments frits et gras, ainsi que l'alcool;
    • pendant vingt-quatre heures avant l'analyse, le patient doit éviter tout effort physique: ne portez pas de poids, n'allez pas au gymnase ni à la piscine.

    Analyse qualitative et quantitative de la PCR pour l'hépatite C: négatif, positif, transcription

    L'hépatite C est une maladie hépatique virale provoquée par le flavivirus HCV (du mot anglais virus de l'hépatite C), dont la structure contient une molécule d'acide ribonucléique (ARN). L'ARN porte le code génétique du virus. Sa présence permet l'analyse de la PCR pour l'hépatite C.

    Le danger du VHC pour une personne réside dans le fait que la fenêtre sérologique (délai entre l’infection et l’apparition d’une réaction du système immunitaire) peut être assez longue - de plusieurs semaines à six mois.

    Il ne détecte pas l'infection et ne commence pas le traitement à temps.

    Selon les caractéristiques individuelles de l'organisme, le porteur du VHC peut se manifester sous forme aiguë, ainsi que sous forme de maladie chronique nécessitant un traitement long et coûteux. Lorsque des anticorps anti-VHC sont détectés, une série de tests de laboratoire est effectuée, y compris une PCR pour l'hépatite C. Ce test est effectué sur toutes les personnes chez qui des anticorps sanguins contre le VHC ont été détectés.

    Qu'est-ce que l'analyse PCR?

    Analyse en laboratoire de la PCR pour l'hépatite C - l'étude du matériel biologique afin de détecter la présence de flavavirus.

    La réaction en chaîne de la polymérase (au sens abrégé) montre la valeur quantitative de la lésion virale du corps, ses caractéristiques qualitatives, ainsi que le génotype du virus contenant l'ARN.

    La méthode et la durée du traitement, ainsi que le facteur épidémiologique (degré de risque de transmission à un autre porteur) sont déterminés sur la base de ces analyses et d'analyses complémentaires.

    Qu'est-ce que l'analyse d'ARN de l'hépatite C?

    La PCR de l’hépatite C est aussi appelée analyse d’ARN (ARN du VHC), car Le flavavirus contient une particule d'ARN avec une taille de virion de 30 à 60 nm. L'une des caractéristiques de ce microorganisme est sa forte propension aux mutations.

    Chacune des sous-espèces (génotypes) du virus a une résistance différente, ce qui entraîne différentes méthodes de traitement et la nature du pronostic ultérieur pour le patient.

    Le matériel biologique (sang veineux) est administré l'estomac vide et, en règle générale, testé par la méthode de PCR en temps réel (diagnostic en temps réel extrêmement sensible avec une limite de détection inférieure à 15 UI / ml à l'aide de systèmes automatisés fermés).

    Il existe d'autres tests, par exemple COBAS AMPLICOR avec une sensibilité de 50-100 UI / ml. Pour tout test de laboratoire, le seuil de sensibilité est important, c'est-à-dire la capacité du réactif à détecter la concentration minimale de virus dans le matériel biologique.

    Types d'analyse de l'hépatite C par PCR

    La PCR de l'hépatite C comprend trois composants importants:

    • analyse qualitative;
    • analyse quantitative;
    • génotypage.

    Ces tests vous permettent de déterminer la nature de la virémie, ainsi que les caractéristiques génétiques de l'agent pathogène. En fonction de la sensibilité du système de diagnostic, l’étude est réalisée une fois et, parfois, un deuxième test est effectué avec un réactif plus sensible pour confirmer ou affiner les résultats.

    PCR de haute qualité de l'hépatite C

    L'analyse qualitative de l'hépatite C par PCR est un autre nom courant pour l'analyse de la réaction en chaîne de la polymérase. La sensibilité standard du test, qui permet de détecter la présence de lésions virales, est comprise entre 10 et 500 UI / ml.

    Une analyse PCR de l’hépatite C négative montre que la concentration de virus dans le sang du patient est inférieure au seuil de sensibilité du système de diagnostic.

    Si la PCR de haute qualité a donné la réponse "non détectée", il est important de déterminer le seuil de sensibilité du réactif lors du traitement suivant.

    Les fractions protéiques au flavavirus apparaissent beaucoup plus tard.

    PCR quantitative de l'hépatite C

    La PCR quantitative de l'hépatite C est un indicateur de la charge virale, qui reflète le niveau de concentration en ARN du flavavirus dans le corps. C'est un indicateur montrant combien de fragments d'ARN viral sont contenus par centimètre cube de sang. Les résultats de la PCR de l'ARN de l'hépatite C dans un test quantitatif en système conventionnel sont indiqués en unités internationales par millilitre (UI / ml) et peuvent être enregistrés de différentes manières, par exemple 1,7 million ou 1,700 000 UI / ml.

    Le diagnostic quantitatif PCR de l'hépatite C est prescrit aux patients avant le début du traitement antiviral et à la 12e semaine de traitement afin d'évaluer les résultats de la méthode choisie pour traiter le VHC. La charge virale permet de déterminer trois indicateurs importants de la maladie:

    • l'infectivité, c'est-à-dire le degré de risque de transmission du virus d'un porteur à un autre (plus la concentration d'ARN de flavavirus est élevée, plus le risque d'infecter une autre personne est élevé, par exemple par contact sexuel);
    • méthode et efficacité du traitement;
    • la durée et le pronostic du traitement antiviral (plus la charge virale est élevée, plus le traitement dure longtemps).

    Le diagnostic quantitatif PCR de l'hépatite C par PCR dépend du type de test de laboratoire et du seuil de sensibilité. La limite inférieure de la norme est considérée comme l'indicateur allant jusqu'à 600 000 UI / ml, la valeur moyenne se situant dans la plage de 600 000 à 700 000 UI / ml. Des résultats de 800 000 UI / ml et plus sont considérés comme des taux élevés de virus contenant l'ARN.

    Génotypage

    En raison de la forte activité mutationnelle du VHC dans la nature, lors du test, il est important d’identifier quel génotype du virus se trouve dans le sang du patient. Au total, 11 génotypes du virus de l'hépatite C ont été enregistrés sur la planète, comprenant de nombreuses sous-espèces (sous-types). Sur le territoire de la Fédération de Russie distribué 1,2 et 3.

    L’ARN PCR de l’hépatite C avec le génotypage est une composante très importante de l’analyse, car permet au médecin de déterminer la résistance (résistance) du virus, de sélectionner les médicaments appropriés et de prescrire un traitement.

    Le génotypage vous permet également de déterminer indirectement l'état du foie. Par exemple, le génotype 3 du VHC est souvent accompagné d'une stéatose, dans laquelle la graisse s'accumule dans les cellules de l'organe.

    Un test sanguin de PCR pour l'hépatite C devrait donner un chiffre qui détermine le génotype. Les réponses de laboratoire peuvent indiquer «non typé», ce qui signifie qu'un virus contenu dans du sang humain n'est pas détecté par le système de test. Cela peut indiquer que le génotype n'est pas typique pour une zone géographique donnée. Dans ce cas, vous devez répéter l'analyse avec une plus grande sensibilité du système de diagnostic.

    Décodage de l'analyse PCR pour l'hépatite C

    Le test de déchiffrement quantitatif PCR de l'hépatite C peut être basé sur les données ci-dessus. Lors de l'obtention des résultats des tests de laboratoire, les données suivantes sont généralement écrites:

    • «Trouvé» / «non trouvé» (PCR de haute qualité pour l'hépatite C);
    • le nombre de fractions contenant l'ARN, par exemple 831 680 ME / ml (analyse PCR quantitative);
    • la figure qui détermine le génotype du VHC, par exemple - 1, 2, 3, 4;
    • Le nom du test est le plus souvent en temps réel.

    Le plus important pour déchiffrer l'analyse de la PCR pour l'hépatite C est le deuxième paragraphe, qui montre la charge virale, qui détermine le pronostic, la méthode et la durée du traitement.

    Si le test PCR de recherche de l'hépatite C est négatif et si le test ELISA est positif, qu'est-ce que cela signifie?

    Pour déchiffrer les tests de laboratoire, il est important de contacter un hépatologue ou un spécialiste des maladies infectieuses, qui expliquera les informations obtenues en fonction du type de système de diagnostic et de son seuil de sensibilité. Dans la pratique médicale, il existe de nombreuses données de tests sanguins qui peuvent induire en erreur une personne sans formation médicale.

    Par exemple, si le test de PCR de l’hépatite C est négatif et si le test ELISA est positif, il se peut qu’il n’y ait pas de VHC dans le sang du patient à l’heure actuelle, mais il souffrait auparavant d’une forme aiguë de l’hépatite C. il y a des anticorps dans le sang qui ont été produits après l'invasion du virus dans le passé. Mais dans la pratique médicale moderne, l’analyse ELISA est considérée comme insuffisamment fiable et donne souvent des résultats inhabituels. Les médecins l’utilisent donc comme test de dépistage primaire. Lors du diagnostic d'une maladie, les spécialistes sont guidés avec précision par les tests PCR.

    Vidéo utile

    La vidéo suivante donne une description très détaillée et intéressante de l’essence de la méthode PCR, de la manière dont l’analyse est effectuée:

    Conclusion

    Pour l'analyse de la PCR pour l'hépatite C, le sang veineux est généralement prélevé. Le plus souvent, il y a un double apport de matériel biologique - pour ELISA et directement pour le test PCR. Pour que les résultats des tests soient corrects, il est nécessaire de respecter les règles de base pour l'échantillonnage en laboratoire de matériel biologique:

    • le sang à analyser est donné dans la première moitié de la journée à jeun;
    • entre le repas et le sang doit prendre au moins 8 heures;
    • l'alcool et les aliments frits doivent également être exclus avant le test;
    • la veille du don de sang, il est nécessaire d'éviter un effort physique intense.

    Les résultats des tests sanguins sont généralement prêts le lendemain.


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