ANF ​​320, type homogène

Bonne journée! Il y a un an, sa fille (19 ans) souffrait d'arthrite réactive, comme ce fut le cas pour la yersiniose aiguë (confirmé, le taux d'IgA était élevé, la clinique était également traitée à l'Institut de recherche Nasonov). En rapport avec la déclaration du diagnostic, ils ont passé tous les tests d'accompagnement, a montré le médecin. Les anticorps contre l'ADN étaient 1,04; ANF ​​1: 320. Le médecin n'a rien dit à ce sujet. Un an plus tard, j'étais inquiet pour l'ANF. Maintenant tout le monde a passé, nous attendons. Tous les tests (sang total, c-reac. Protéines, biochimie, urine) sont normaux. Anticorps contre l'adn 0,74. ANF ​​n'est pas encore prêt. Il y a trois ans, en été, il y avait des éruptions cutanées sur le front avec des croûtes: un mois s'était écoulé. Il y a une sensibilité au soleil, il peut y avoir une tache sur la poitrine en passant. Je ne peux pas me concentrer sur la vie et travailler de l'excitation, en attendant l'ANF. Dites-moi, s'il vous plaît, que devrions-nous faire si - si c'est positif? Nous ne vivons pas à Moscou, nos rhumatologues n’ont plus confiance en eux depuis l’année dernière. Si nous allons pour un traitement, nous irons à Moscou. Merci d'avance!

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Facteur antinucléaire sur cellules HEp-2

La méthode de recherche utilisant des cellules épithéliales humaines HEp-2, qui permet de détecter des anticorps antinucléaires, est l’un des marqueurs des maladies systémiques du tissu conjonctif.

Synonymes russes

ANF, anticorps antinucléaires, anticorps antinucléaires (ANA).

Synonymes anglais

Anticorps antinucléaires (ANA), substrat Hep-2, ANA-Hep2, détection d'anticorps fluorescents anti-nucléaires (FANA).

Méthode de recherche

Immunofluorescence indirecte.

Quel biomatériau peut être utilisé pour la recherche?

Comment se préparer à l'étude?

Ne fumez pas pendant 30 minutes avant de donner du sang.

Informations générales sur l'étude

La définition du facteur antinucléaire (ANF) est le "gold standard" pour la détection des anticorps antinucléaires (ANA) et le diagnostic des maladies auto-immunes.

La pathogenèse des maladies systémiques du tissu conjonctif (SSTF) est étroitement associée aux désordres du système immunitaire et à la production accrue d’anticorps dirigés contre les structures de ses propres cellules. Les autoanticorps dirigés contre les composants du noyau cellulaire - les anticorps antinucléaires - interagissent avec les acides nucléiques et les protéines du noyau, les antigènes cytoplasmiques, qui se manifestent par des modifications inflammatoires des tissus et des organes, des douleurs articulaires et musculaires, une fatigue marquée, une perte de poids, des changements cutanés. L’ANA est présent dans de nombreuses maladies auto-immunes, mais il est particulièrement caractéristique du lupus érythémateux systémique (SLE). L’ANA est présent chez plus de 90% des patients atteints de maladies systémiques du tissu conjonctif; environ 200 variétés sont actuellement décrites, qui sont unies par un seul nom - facteur antinucléaire.

Lors de la détermination du FNA par la méthode de fluorescence indirecte, la lignée de cellules épithéliales transplantable de l'adénocarcinome HEp-2 humain est plus souvent utilisée. Les cellules Hep-2 sont un substrat très pratique pour la recherche en laboratoire, car elles ont un gros noyau et se développent sur le verre en une seule couche. Les AHA sont détectés en liant les cellules HEp-2 aux antigènes intracellulaires.

Dans cette étude, les cellules épithéliales Hep-2 sont cultivées sur des verres, fixées et incubées avec du sérum de patient dilué. Après élimination de l'excès de sérum, les cellules sont incubées avec des anticorps marqués à la fluorescéine, puis lavées à nouveau et examinées au microscope à fluorescence. Dans le même temps, le titre d'anticorps et le type de luminescence sont déterminés. Un titre de plus de 1: 160 est considéré comme un diagnostic. Avec une exacerbation des maladies rhumatismales, il dépasse 1: 640 et, au cours de la rémission, il diminue à 1: 160-1: 320. Plus il y a d'anticorps, plus le titre est élevé. Selon le type de luminescence, vous pouvez définir des cibles pour les anticorps antinucléaires, ce qui est d’une importance clinique significative et qui détermine la tactique d’un examen plus approfondi du patient. Les principaux sont les types de coloration nucléaire périphérique, granulaire (petit / grand), nucléolaire, centromérique et cytoplasmique. Chaque type de rayonnement possède des caractéristiques très caractéristiques qui vous permettent de distinguer une option d’une autre.

La coloration homogène (diffuse) est associée à la présence d'anticorps dirigés contre l'ADN double brin, les histones, et est caractéristique du LES et du lupus érythémateux.

La luminescence périphérique est provoquée par la distribution périphérique de la chromatine dans le noyau, est associée à des anticorps anti-ADN et est spécifique à la RCS. Ce type de luminescence est important pour se différencier de la coloration de la membrane nucléaire, qui se produit dans les maladies auto-immunes du foie.

La coloration granulaire (marbrée, réticulée) se produit le plus souvent et est la moins spécifique, détectée dans de nombreuses maladies auto-immunes. Dans ce cas, les auto-antigènes sont des complexes nucléoprotéiques du noyau (antigènes Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B et PCNA).

Des titres très élevés d'ANF avec une luminescence de type granulaire large indiquent souvent une maladie mixte du tissu conjonctif.

Coloration nucléaire (nucléolaire) due à la production d’anticorps dirigés contre les composants du nucléole (ARN polymérase-1, NOR, U₃RNP, PM / Scl), détectés dans la sclérodermie, maladie de Sjogren. L'ANA augmente parfois avec les maladies endocriniennes (diabète de type 1, thyroïdite, thyréotoxicose, syndrome polyendocrinien), les affections cutanées (psoriasis, pemphigus), pendant la grossesse, après une greffe d'organe et de tissu, chez les patientes sous hémodialyse.

La luminescence centromérique apparaît en présence d’anticorps dirigés contre les centromères des chromosomes et est caractéristique de la forme de sclérodermie, le syndrome CREST.

Le type de luminescence cytoplasmique est associé à des anticorps anti-ARNt synthétase, en particulier anti-Jo-1, caractéristiques des dermatomyosites et des polymyosites. Ce type de coloration est également déterminé en présence d'anticorps dirigés contre d'autres composants du cytoplasme dans l'hépatite auto-immune, cirrhose biliaire primitive.

La détection simultanée de différents types de luminescence indique la présence de différents types d'anticorps.

Chez les personnes en bonne santé, une luminescence granuleuse peut être détectée à des titres faibles, modérés ou élevés d'ANA, mais les types de luminescence à grain grossier ou homogènes ne doivent normalement pas être déterminés.

En fonction des résultats de l'évaluation du type de luminescence, d'autres tactiques sont en cours de développement pour traiter le patient et des études supplémentaires sont prévues pour clarifier le spectre des ANA.

À quoi sert la recherche?

• Pour le diagnostic des maladies systémiques du tissu conjonctif.
• Pour le diagnostic différentiel des maladies rhumatismales.
• Évaluer l'efficacité du traitement des maladies auto-immunes.
• Surveiller l'évolution des maladies systémiques du tissu conjonctif.

Quand une étude est-elle prévue?

• Avec des symptômes d'une maladie auto-immune (fièvre prolongée, douleurs articulaires, fatigue, perte de poids, modifications de la peau).
• Lors de la détection de changements caractéristiques de maladies systémiques du tissu conjonctif (augmentation de la RSE, taux de protéine C-réactive, complexes immuns en circulation).

Que signifient les résultats?

Raisons pour augmenter le titre de ANF dans les cellules HEp-2:

• lupus érythémateux disséminé (dans 95% des cas),
• dermatomyosite / polymyosite,
• sclérodermie systémique (dans 60 à 90% des cas),
• Syndrome de Sjogren (dans 40 à 70% des cas)
• maladie du tissu conjonctif mixte (syndrome de Sharpe),
• Syndrome de Raynaud
• lupus discoïde,
• drogue lupus,
• la polyarthrite rhumatoïde,
• vascularite nécrosante,
• mononucléose infectieuse,
• leucémie
• tumeurs malignes (principalement lymphome),
• myasthénie grave
• endocardite infectieuse,
• hépatite auto-immune chronique,
• cirrhose biliaire primitive
• tuberculose,
• pneumoconiose,
• fibrose pulmonaire interstitielle.

Facteur antinucléaire (HEp-2)

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• Code d'étude: 331
• Temps d'exécution: 5-6 jours (sauf samedi, dimanche)
• Analyse coûté 960 roubles.

La méthode de recherche utilisant des cellules épithéliales humaines est HEp-2, qui permet la détection des anticorps antinucléaires, considérés comme l’un des marqueurs des maladies dites du système conjonctif systémiques.

La détection du facteur antinucléaire (ANF) est une sorte de «standard de référence» pour la détection des anticorps antinucléaires (ANA) et la reconnaissance des maladies auto-immunes.

Les mécanismes pathogéniques des maladies systémiques du tissu conjonctif (ou NWPC) sont en corrélation avec des altérations du fonctionnement du système immunitaire de l'organisme et une production accrue d'anticorps contre les structures de leurs propres cellules. Les soi-disant auto-anticorps dirigés contre les composants du noyau cellulaire - les anticorps antinucléaires - interagissent avec les acides nucléiques, les protéines du noyau, les antigènes cytoplasmiques, ce qui entraîne des modifications inflammatoires dans divers tissus, organes, douleurs articulaires et musculaires, changements cutanés, perte de poids, fatigue marquée. Les anticorps antinucléaires sont détectés dans de nombreuses maladies de nature auto-immune, mais sont plus typiques du lupus érythémateux systémique (SLE). Les ANA sont enregistrés chez plus de 90% des personnes atteintes de NWPC; À ce jour, environ 200 variétés ont été décrites, réunies sous le nom unique de "facteur antinucléaire".

Lorsqu'un facteur antinucléaire est détecté par la méthode de fluorescence indirecte, la lignée cellulaire épithéliale transplantable de l'adénocarcinome laryngé humain (ou HEp-2) est plus souvent utilisée. Ses cellules sont un substrat très pratique pour la recherche en laboratoire, car elles possèdent des noyaux relativement gros et se développent également en une seule couche sur les verres. Le facteur antinucléaire se trouve dans la formation d'une liaison avec les antigènes intracellulaires des cellules ner-2.

Dans l'étude, les cellules HEp-2 sont cultivées sur des verres, soumises à une fixation et incubées avec du sérum de patient dilué. Après élimination de l'excès de sérum, les cellules sont incubées avec des anticorps marqués à la fluorescéine, dont un champ est à nouveau lavé puis examiné à l'aide d'un microscope à fluorescence, avec détermination du titre de l'anticorps, ainsi que du type de luminescence. Une valeur diagnostique est considérée comme un titre supérieur à 1: 160. En cas d’exacerbation des maladies rhumatismales, le titre dépasse 1: 640; pendant la rémission, il diminue jusqu’à l’étendue de 1: 160-1: 320. Avec des quantités croissantes d'anticorps, le titre augmente également. Le type de luminescence permet d'établir des cibles pour les anticorps antinucléaires; Ceci est important d’un point de vue clinique et permet de déterminer les tactiques d’examen du patient. Il existe différents types de coloration du noyau (par exemple périphérique, granulaire, nucléolaire, centromérique, cytoplasmique).

Pour chaque type de luminescence, il existe des caractéristiques très caractéristiques qui permettent de les distinguer les unes des autres.

La coloration homogène (diffuse) est associée à la présence d'anticorps dirigés contre l'acide désoxyribonucléique à double brin (ADN), les histones et est inhérente au lupus érythémateux systémique et au lupus érythémateux.

La luminescence périphérique est déterminée par la distribution périphérique dans le noyau de la chromatine, est associée à des anticorps contre l'acide désoxyribonucléique et est spécifique du lupus érythémateux disséminé. Ce type de luminescence est important à distinguer de la coloration de la membrane du noyau, qui se produit dans les pathologies auto-immunes du foie.

La coloration granulaire se trouve le plus souvent, est la moins spécifique, se trouve dans de nombreuses maladies de la nature auto-immune. Dans ce cas, les auto-antigènes sont des complexes nucléoprotéiques du noyau (Sm, U1-RNP et quelques autres).

Des titres très élevés de facteur antinucléaire avec une luminescence de type granulaire large indiquent souvent une maladie mixte du tissu conjonctif.

La coloration nucléaire (ou nucléolaire) est due à la formation d'anticorps dirigés contre les composants du nucléole (par exemple, l'ARN polymérase-1, NOR, certaines autres); trouvé dans le cas de la sclérodermie, avec la maladie de Sjogren. La formation d'anticorps antinucléaires augmente parfois avec certaines pathologies endocriniennes (par exemple, diabète sucré du premier type, inflammation thyroïdienne, thyréotoxicose, syndrome polyendocrinien), avec lésions cutanées (pemphigus, psoriasis), pendant la grossesse, après transplantation de tissus et d'organes chez des individus hémodialyse.

La luminescence centromérique est détectée lorsque des anticorps sont présents contre les chromosomes du centromère; caractéristique d'une certaine forme de sclérodermie, le syndrome dit de CREST.

Type cytoplasmique de lueur. Il est associé à des anticorps contre l'ARNt synthétase, se produit dans la dermatomyosite, la polymyosite. Ce type de coloration est également détecté en présence d'anticorps dirigés contre d'autres composants du cytoplasme en cas d'hépatite auto-immune, accompagnée d'une cirrhose biliaire primitive.

La détection simultanée de différents types de luminescence indique la présence de différents types d'anticorps.

Dans l’étude d’individus en bonne santé, une luminescence granuleuse peut être détectée dans le cas de titres faibles, modérés ou élevés d’anticorps antinucléaires, mais les types de luminescence à grains grossiers ou homogènes ne doivent pas être détectés.

Après avoir évalué le type de luminescence, d'autres stratégies de traitement sont déterminées et des études supplémentaires peuvent être menées pour clarifier le spectre des anticorps antinucléaires.

30 minutes avant de prendre le sang cesse de fumer.

Seuls certains des processus, conditions et maladies dans lesquels le but de la nomination de cette analyse.

Une étude sur le facteur antinucléaire (HEp-2) peut être menée pour identifier les maladies systémiques du tissu conjonctif (SSTV); à des fins de diagnostic différenciation des maladies rhumatismales; évaluer l'efficacité du traitement des maladies auto-immunes; afin de suivre les progrès de la ZLEA.

Vous trouverez ci-dessous quelques-uns des processus, états et maladies possibles dans lesquels un facteur antinucléaire (HEp-2) est détecté. Il convient de rappeler que le résultat d'une étude peut ne pas toujours être un critère suffisamment spécifique et suffisant pour permettre de tirer une conclusion. Les informations fournies ne servent en aucun cas à l'autodiagnostic et à l'autotraitement. Le diagnostic final n’est établi que par un médecin lorsqu’il combine les données obtenues avec les résultats d’autres méthodes de recherche.

Les raisons possibles de l'augmentation du titre de facteur antinucléaire: le lupus érythémateux système (SLE), la sclérodermie systémique, la dermatomyosite ou polymyosite, maladie du tissu conjonctif mixte (appelée maladie mixte du tissu conjonctif), le syndrome de Sjögren, le lupus discoïde, le syndrome de Raynaud, la polyarthrite rhumatoïde, le lupus dosage, la mononucléose infectieuse, vascularite nécrosante, certains néoplasmes malins (par exemple, lymphome, leucémie), endocardite infectieuse, myasthénie sévère, cirrhose biliaire primitive, maladie chronique hépatite immunitaire, pneumoconiose, fibrose pulmonaire interstitielle, tuberculose.

Facteurs pouvant influencer les résultats de l'étude

Faux résultat positif - il peut être associé aux points suivants: l'âge du sujet est âgé de plus de 60 à 65 ans (noté dans 10 à 37% des cas); une variété de drogues pouvant causer l’apparition de la drogue, le lupus, sels d'or et un certain nombre d'autres). L'utilisation de glucocorticoïdes (par exemple, la prednisone, la dexaméthasone, métipred) peut parfois conduire à un résultat faux négatif.

Dans 5% des cas de lupus érythémateux disséminé, il est possible d’obtenir un résultat négatif de l’étude (lupus érythémateux systémique ANF négatif). Dans de tels cas, la détermination des anticorps contre les antigènes SS (Ro) est nécessaire pour clarifier le diagnostic.

Un résultat positif de l'étude ne sert pas toujours d'indication absolue de la présence d'une maladie auto-immune. Ainsi, chez un certain nombre d'individus en bonne santé (3 à 13%), le titre du facteur antinucléaire est augmenté et peut atteindre 1: 320.

Les résultats de l'étude doivent être interprétés conjointement avec les données cliniques et d'autres indicateurs de laboratoire.

Si un résultat positif est obtenu, la détermination de la spécificité des anticorps antinucléaires par immunoblot est recommandée.

Facteur antinucléaire: ce que montre l'analyse

En médecine, il existe des conditions spécifiques dans lesquelles les cellules de défense commencent à attaquer leur propre corps, les maladies auto-immunes. La plupart de ces maladies se présentent sous une forme chronique et sont potentiellement dangereuses car elles peuvent causer de graves problèmes de fonctionnement de certains organes et systèmes. Cela conduit souvent à un handicap et à des conséquences graves.

Les possibilités de la médecine moderne sont grandes et il est possible d'identifier tous ces changements à un stade précoce et de commencer le traitement rapidement. L’une des études les plus fréquemment utilisées pour diagnostiquer ces affections est l’analyse des anticorps antinucléaires, en abrégé ANA.

Description

L'analyse de l'ANA est la méthode de diagnostic la plus informative en cas de suspicion de troubles auto-immuns, principalement de maladies du tissu conjonctif. Mais il y a aussi la présence d'anticorps dans les processus malins, infectieux, etc.

La plus grande sensibilité des anticorps à de telles maladies:

1. Lupus érythémateux systémique.
2. La polyarthrite rhumatoïde.
3. Maladies de Sjogren.

Ces cellules peuvent également être trouvées chez environ un tiers des patients atteints d'hépatite chronique.

L'augmentation des indicateurs est influencée par divers facteurs. En particulier le paludisme, la leucémie, la mononucléose infectieuse et bien plus encore.

Parallèlement à l'identification de l'ANA lors de la réalisation d'une étude, il est important d'évaluer les niveaux d'immunoglobulines telles que IgA, IgM, IgG. L'identification de ces composants dans le sang des patients peut indiquer un risque accru d'apparition de pathologies rhumatismales et de maladies du collagène.

Si la relation entre le contenu en anticorps et les symptômes n'a pas été identifiée, la présence même d'ANA dans le sang indique le choix de la stratégie de traitement appropriée. La préservation prolongée de crédits élevés indique un état de choses décevant. La réduction de ces titres indique une rémission de la pathologie, encore moins une mort rapide.

Cependant, ces anticorps peuvent être détectés chez un certain pourcentage d'individus en bonne santé et les titres d'ANF peuvent aller au-delà de la plage normale.

Indications pour l'étude

L'immunologiste et tout spécialiste certifié ont le droit d'interpréter les résultats en fonction de la zone de dommage.

Les indications pour cette étude sont:

1. Détection de maladies systémiques, ainsi que de troubles auto-immuns sans symptômes évidents.
2. Détection du lupus érythémateux systémique et son étude approfondie, sélection de stratégies de traitement.
3. Détection de drogue lupus.
4. La présence de certaines manifestations cliniques, telles que fièvre prolongée sans raison apparente, fragilité des articulations et de leurs douleurs, éruption cutanée, douleurs musculaires, degré élevé de fatigue.
5. Signes de manifestations symptomatiques de maladies mixtes: maladies de la peau et des organes internes, états convulsifs, augmentation des indicateurs de température.
6. Les médicaments sur ordonnance disopyramide, hydralazine, et plus.

Types d'examen

Détecter les anticorps dans le sang peut être de deux manières. La première technique est appelée microscopie à immunofluorescence indirecte. En présence d'anticorps, ils se lieront à des antigènes nucléaires spécifiques. On utilise des éléments qui brillent dans un spectre lumineux séparé. Au microscope, il devient possible d'identifier le type de luminescence.

En savoir plus sur le syndrome myofascial et la façon dont il est traité ici.

Cette méthode est reconnue comme la meilleure pour déterminer la valeur des anticorps antinucléaires. En outre, la technique a reçu le deuxième nom - bandelette réactive pour le lupus.
La deuxième méthode de diagnostic est l'analyse immunitaire enzymatique. Sa signification réside dans le fait que les anticorps présents dans le sang sont en corrélation avec l'antigène et que, par conséquent, la solution change de couleur.

Il est important de souligner que le dépistage positif ne peut être la seule raison pour poser un diagnostic.

Assurez-vous d’attribuer une étude supplémentaire permettant de déterminer la maladie à un stade précoce. En cas de filtrage négatif, on peut supposer qu'il n'y a pas de violation. Cependant, cela n'exclut pas la présence d'une maladie auto-immune chez le patient.

Le sang est donné pour le facteur antinucléaire avec d'autres tests. Mais le résultat final est influencé par la prise de certains médicaments et la présence chez le patient de pathologies de l'évolution chronique et aiguë. Un expert vous aidera à régler tous ces moments, puis il établira le diagnostic correct et vous indiquera comment procéder.

Interprétation des résultats

Dans une étude qualitative, les résultats suivants peuvent être obtenus:

• en dessous de 0,9 - négatif, norme;
• les valeurs de 0,9 à 1,1 sont douteuses;
• plus de 1,1 - positif.

Les patients posent souvent la question suivante: facteur antinucléaire 1: 160 est-il normal ou non? Tout ce qui est plus haut que cela est en dehors de la plage normale.

Voir aussi: Comment traiter l'épidurite de la colonne vertébrale

Il faut également garder à l'esprit qu'une préparation incorrecte et certaines nuances peuvent affecter les résultats:

1. Violation des principes de préparation.
2. Non-respect des règles de l'algorithme d'injection par un médecin spécialiste.
3. Acceptation de certains produits pharmaceutiques.
4. Le diagnostic d'urémie peut également fausser les résultats.

Un dépistage positif des anticorps antinucléaires peut indiquer la présence de maladies telles que le lupus érythémateux, une pathologie pancréatique, des troubles de la glande thyroïde, une pathologie hépatique, le syndrome de Sjogren, des lésions des tissus des poumons, des articulations, etc. Seul un médecin peut interpréter les résultats et prescrire un traitement supplémentaire.

Lors du décodage de cette étude, il convient de garder à l’esprit que, dans le cas de valeurs négatives, la probabilité de la présence d’une maladie n’est pas exclue.

Comment appliquer la crème Alezan pour les articulations est décrite en détail ici.

Si le dépistage de ces anticorps est positif sans symptômes associés, un examen plus approfondi est nécessaire.

Comment se préparer à l'étude

Le matériel d'analyse est le sang veineux.

Caractéristiques de préparation:

1. Matériel pris sur un estomac vide. Après le dernier repas, au moins 8 heures devraient s'écouler. Il est permis de boire de l'eau filtrée de haute qualité sans gaz.
2. Pré-deux heures avant le prélèvement sanguin, le tabagisme et l'utilisation de produits à base de nicotine sont exclus.
3. Quelques jours avant la manipulation, la consommation de boissons alcoolisées et de boissons énergisantes est exclue, il est interdit de s’engager dans un travail physique pénible.
4. En moins de deux semaines, la consommation de produits pharmaceutiques, en particulier d'hormones, d'antibiotiques et d'autres médicaments, devrait être complètement exclue.
5. Afin de valider l'étude, il est important de refaire le dépistage après deux semaines.

Attendez-vous à des résultats dans les 48 heures suivant la procédure. Il est possible de recevoir des données en urgence dans les 3 heures.

Conclusion

À partir de cet article, vous avez appris quel sang était prélevé pour analyse ANF et en quoi il consistait. Tous les anticorps ne peuvent pas être détectés lors de la réalisation de cette étude en raison de leur abondance. Afin de minimiser la possibilité d’apparition de résultats non fiables, il est nécessaire de mener une étude approfondie conjointement avec d’autres méthodes.

L'absence de titres élevés d'ANF ne signifie pas que le patient n'a pas de maladie systémique, tout comme un résultat positif ne peut être un argument sans équivoque pour poser un diagnostic.

Prise de sang et de quoi s'agit-il

Facteur antinucléaire sur cellules HEp-2

Facteur antinucléaire sur cellules HEp-2

La méthode de recherche utilisant des cellules épithéliales humaines HEp-2, qui permet de détecter des anticorps antinucléaires, est l’un des marqueurs des maladies systémiques du tissu conjonctif.

ANF, anticorps antinucléaires, anticorps antinucléaires (ANA).

Anticorps antinucléaires (ANA), substrat Hep-2, ANA-Hep2, détection d'anticorps fluorescents anti-nucléaires (FANA).

Immunofluorescence indirecte.

Quel biomatériau peut être utilisé pour la recherche?

Comment se préparer à l'étude?

Ne fumez pas pendant 30 minutes avant de donner du sang.

Informations générales sur l'étude

La définition du facteur antinucléaire (ANF) est le "gold standard" pour la détection des anticorps antinucléaires (ANA) et le diagnostic des maladies auto-immunes.

La pathogenèse des maladies systémiques du tissu conjonctif (SSTF) est étroitement associée aux désordres du système immunitaire et à la production accrue d’anticorps dirigés contre les structures de ses propres cellules. Les autoanticorps dirigés contre les composants du noyau cellulaire - les anticorps antinucléaires - interagissent avec les acides nucléiques et les protéines du noyau, les antigènes cytoplasmiques, qui se manifestent par des modifications inflammatoires des tissus et des organes, des douleurs articulaires et musculaires, une fatigue marquée, une perte de poids, des changements cutanés. L’ANA est présent dans de nombreuses maladies auto-immunes, mais il est particulièrement caractéristique du lupus érythémateux systémique (SLE). L’ANA est présent chez plus de 90% des patients atteints de maladies systémiques du tissu conjonctif; environ 200 variétés sont actuellement décrites, qui sont unies par un seul nom - facteur antinucléaire.

Lors de la détermination du FNA par la méthode de fluorescence indirecte, la lignée de cellules épithéliales transplantable de l'adénocarcinome HEp-2 humain est plus souvent utilisée. Les cellules Hep-2 sont un substrat très pratique pour la recherche en laboratoire, car elles ont un gros noyau et se développent sur le verre en une seule couche. Les AHA sont détectés en liant les cellules HEp-2 aux antigènes intracellulaires.

Dans cette étude, les cellules épithéliales Hep-2 sont cultivées sur des verres, fixées et incubées avec du sérum de patient dilué. Après élimination de l'excès de sérum, les cellules sont incubées avec des anticorps marqués à la fluorescéine, puis lavées à nouveau et examinées au microscope à fluorescence. Dans le même temps, le titre d'anticorps et le type de luminescence sont déterminés. Un titre de plus de 1: 160 est considéré comme un diagnostic. Avec une exacerbation des maladies rhumatismales, il dépasse 1: 640 et, au cours de la rémission, il diminue à 1: 160-1: 320. Plus il y a d'anticorps, plus le titre est élevé. Selon le type de luminescence, vous pouvez définir des cibles pour les anticorps antinucléaires, ce qui est d’une importance clinique significative et qui détermine la tactique d’un examen plus approfondi du patient. Les principaux sont les types de coloration nucléaire périphérique, granulaire (petit / grand), nucléolaire, centromérique et cytoplasmique. Chaque type de rayonnement possède des caractéristiques très caractéristiques qui vous permettent de distinguer une option d’une autre.

La coloration homogène (diffuse) est associée à la présence d'anticorps dirigés contre l'ADN double brin, les histones, et est caractéristique du LES et du lupus érythémateux.

La luminescence périphérique est provoquée par la distribution périphérique de la chromatine dans le noyau, est associée à des anticorps anti-ADN et est spécifique à la RCS. Ce type de luminescence est important pour se différencier de la coloration de la membrane nucléaire, qui se produit dans les maladies auto-immunes du foie.

La coloration granulaire (marbrée, réticulée) se produit le plus souvent et est la moins spécifique, détectée dans de nombreuses maladies auto-immunes. Dans ce cas, les auto-antigènes sont des complexes nucléoprotéiques du noyau (antigènes Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B et PCNA).

Des titres très élevés d'ANF avec une luminescence de type granulaire large indiquent souvent une maladie mixte du tissu conjonctif.

La coloration nucléaire (nucléolaire) due à la production d'anticorps dirigés contre les composants du nucléole (ARN polymérase-1, NOR, U3RNP, PM / Scl) est détectée dans la sclérodermie, maladie de Sjogren. L'ANA augmente parfois avec les maladies endocriniennes (diabète de type 1, thyroïdite, thyréotoxicose, syndrome polyendocrinien), les affections cutanées (psoriasis, pemphigus), pendant la grossesse, après une greffe d'organe et de tissu, chez les patientes sous hémodialyse.

La luminescence centromérique apparaît en présence d’anticorps dirigés contre les centromères des chromosomes et est caractéristique de la forme de sclérodermie, le syndrome CREST.

Le type de luminescence cytoplasmique est associé à des anticorps anti-ARNt synthétase, en particulier anti-Jo-1, caractéristiques des dermatomyosites et des polymyosites. Ce type de coloration est également déterminé en présence d'anticorps dirigés contre d'autres composants du cytoplasme dans l'hépatite auto-immune, cirrhose biliaire primitive.

La détection simultanée de différents types de luminescence indique la présence de différents types d'anticorps.

Chez les personnes en bonne santé, une luminescence granuleuse peut être détectée à des titres faibles, modérés ou élevés d'ANA, mais les types de luminescence à grain grossier ou homogènes ne doivent normalement pas être déterminés.

En fonction des résultats de l'évaluation du type de luminescence, d'autres tactiques sont en cours de développement pour traiter le patient et des études supplémentaires sont prévues pour clarifier le spectre des ANA.

À quoi sert la recherche?

• Pour le diagnostic des maladies systémiques du tissu conjonctif.
• Pour le diagnostic différentiel des maladies rhumatismales.
• Évaluer l'efficacité du traitement des maladies auto-immunes.
• Surveiller l'évolution des maladies systémiques du tissu conjonctif.

Quand une étude est-elle prévue?

• Avec des symptômes d'une maladie auto-immune (fièvre prolongée, douleurs articulaires, fatigue, perte de poids, modifications de la peau).
• Lors de la détection de changements caractéristiques de maladies systémiques du tissu conjonctif (augmentation de la RSE, taux de protéine C-réactive, complexes immuns en circulation).

Que signifient les résultats?

Raisons pour augmenter le titre de ANF dans les cellules HEp-2:

• lupus érythémateux disséminé (dans 95% des cas),
• dermatomyosite / polymyosite,
• sclérodermie systémique (dans 60 à 90% des cas),
• Syndrome de Sjogren (dans 40 à 70% des cas)
• maladie du tissu conjonctif mixte (syndrome de Sharpe),
• Syndrome de Raynaud
• lupus discoïde,
• drogue lupus,
• la polyarthrite rhumatoïde,
• vascularite nécrosante,
• mononucléose infectieuse,
• leucémie
• tumeurs malignes (principalement lymphome),
• myasthénie grave
• endocardite infectieuse,
• hépatite auto-immune chronique,
• cirrhose biliaire primitive
• tuberculose,
• pneumoconiose,
• fibrose pulmonaire interstitielle.

Qu'est-ce que c'est typique?

Pour SLE, lupus médicamenteux, sclérodermie systémique, hépatite chronique active

Pour le LES, syndrome de Sjogren, maladie du tissu conjonctif mixte, polyarthrite rhumatoïde

Pour polymyosite / dermatomyosite, sclérodermie, syndrome de Sjogren, SLE

Syndrome CREST (calcification de la peau, syndrome de Raynaud, dysfonctionnement œsophagien, sclérodactylie, télangiectasie)

Dermatomyosite / polymyosite, maladie hépatique auto-immune, cirrhose biliaire primitive

Qu'est-ce qui peut influencer le résultat?

• Un faux résultat positif contribue à:

• • être âgé de plus de 60 à 65 ans (dans 10 à 37% des cas);
  • l'utilisation de médicaments pouvant entraîner un lupus d'origine médicamenteuse propyluracile, quinidine, réserpine, streptomycine, sulfanilamide, tétracycline, diurétiques thiazidiques).

• La prise de glucocorticoïdes (prednisone, dexaméthasone, métipred) conduit parfois à un résultat faux négatif.

• Dans 5% des cas de LES, un résultat négatif de cette analyse est possible (SLE ANF négatif). Dans de telles situations, pour clarifier le diagnostic, il est nécessaire de déterminer les anticorps anti-antigènes SS (Ro).
• Un résultat de test positif n'est pas une preuve absolue d'une maladie auto-immune. Chez les personnes en bonne santé dans 3 à 13% des cas, le titre de l'ANF a augmenté et atteint 1: 320.
• Les résultats du test doivent être évalués conjointement avec les données cliniques et d'autres paramètres de laboratoire.
• Si un résultat positif de l’étude est recommandé pour déterminer la spécificité de l’ANA immunoblot.

• Anticorps anti-ADN double brin (anti-ADNdb)
• Anticorps aux antigènes nucléaires (ANA), criblage
• Anticorps dirigés contre l'antigène nucléaire extractible (ENA-screen)
• Anticorps anti-cardiolipine, IgG et IgM
• Anticorps antinucléaires (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, contre des histones, des nucléosomes, Ribo P, AMA-M2), immunoblot
• Numération globulaire complète (sans leucogramme ni ESR)
• Vitesse de sédimentation érythrocytaire (ESR)
• Antistreptolysine o
• Protéine C-réactive, quantitativement
• Facteur rhumatoïde
• Circulation Immunitaire Complexes (CIC)
• Composant complément C3
• Composante du complément C4

Qui fait l'étude?

• Wilson D. McGraw-Hill Manuel des tests de laboratoire et de diagnostic, 1st Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 p.
• Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, SH Rodrigues, Dellavance A, Andrade LE. Maladies anti-allergènes et maladies rhumatismales auto-immunes. Arthrite Rheum. Janvier 2011; 63 (1): 191-200.
• Kumar Y, A Bhatia, Minz RW. Tissu de connectivité: un voyage revisité. Diagnostic Pathol. 2 janvier 2009, 4: 1. PMID: 19121207 [PubMed].

Facteur antinucléaire sur cellules HEp-2: recherche dans le laboratoire KDLmed

La méthode de recherche utilisant des cellules épithéliales humaines HEp-2, qui permet de détecter des anticorps antinucléaires, est l’un des marqueurs des maladies systémiques du tissu conjonctif.

ANF, anticorps antinucléaires, anticorps antinucléaires (ANA).

Anticorps antinucléaires (ANA), substrat Hep-2, ANA-Hep2, détection d'anticorps fluorescents anti-nucléaires (FANA).

Immunofluorescence indirecte.

Quel biomatériau peut être utilisé pour la recherche?

Comment se préparer à l'étude?

Ne fumez pas pendant 30 minutes avant de donner du sang.

Informations générales sur l'étude

La définition du facteur antinucléaire (ANF) est le "gold standard" pour la détection des anticorps antinucléaires (ANA) et le diagnostic des maladies auto-immunes.

La pathogenèse des maladies systémiques du tissu conjonctif (SSTF) est étroitement associée aux désordres du système immunitaire et à la production accrue d’anticorps dirigés contre les structures de ses propres cellules. Les autoanticorps dirigés contre les composants du noyau cellulaire - les anticorps antinucléaires - interagissent avec les acides nucléiques et les protéines du noyau, les antigènes cytoplasmiques, qui se manifestent par des modifications inflammatoires des tissus et des organes, des douleurs articulaires et musculaires, une fatigue marquée, une perte de poids, des changements cutanés. L’ANA est présent dans de nombreuses maladies auto-immunes, mais il est particulièrement caractéristique du lupus érythémateux systémique (SLE). L’ANA est présent chez plus de 90% des patients atteints de maladies systémiques du tissu conjonctif; environ 200 variétés sont actuellement décrites, qui sont unies par un seul nom - facteur antinucléaire.

Lors de la détermination du FNA par la méthode de fluorescence indirecte, la lignée de cellules épithéliales transplantable de l'adénocarcinome HEp-2 humain est plus souvent utilisée. Les cellules Hep-2 sont un substrat très pratique pour la recherche en laboratoire, car elles ont un gros noyau et se développent sur le verre en une seule couche. Les AHA sont détectés en liant les cellules HEp-2 aux antigènes intracellulaires.

Dans cette étude, les cellules épithéliales Hep-2 sont cultivées sur des verres, fixées et incubées avec du sérum de patient dilué. Après élimination de l'excès de sérum, les cellules sont incubées avec des anticorps marqués à la fluorescéine, puis lavées à nouveau et examinées au microscope à fluorescence. Dans le même temps, le titre d'anticorps et le type de luminescence sont déterminés. Un titre de plus de 1: 160 est considéré comme un diagnostic. Avec une exacerbation des maladies rhumatismales, il dépasse 1: 640 et, au cours de la rémission, il diminue à 1: 160-1: 320. Plus il y a d'anticorps, plus le titre est élevé. Selon le type de luminescence, vous pouvez définir des cibles pour les anticorps antinucléaires, ce qui est d’une importance clinique significative et qui détermine la tactique d’un examen plus approfondi du patient. Les principaux sont les types de coloration nucléaire périphérique, granulaire (petit / grand), nucléolaire, centromérique et cytoplasmique. Chaque type de rayonnement possède des caractéristiques très caractéristiques qui vous permettent de distinguer une option d’une autre.

La coloration homogène (diffuse) est associée à la présence d'anticorps dirigés contre l'ADN double brin, les histones, et est caractéristique du LES et du lupus érythémateux.

La luminescence périphérique est provoquée par la distribution périphérique de la chromatine dans le noyau, est associée à des anticorps anti-ADN et est spécifique à la RCS. Ce type de luminescence est important pour se différencier de la coloration de la membrane nucléaire, qui se produit dans les maladies auto-immunes du foie.

La coloration granulaire (marbrée, réticulée) se produit le plus souvent et est la moins spécifique, détectée dans de nombreuses maladies auto-immunes. Dans ce cas, les auto-antigènes sont des complexes nucléoprotéiques du noyau (antigènes Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B et PCNA).

Des titres très élevés d'ANF avec une luminescence de type granulaire large indiquent souvent une maladie mixte du tissu conjonctif.

La coloration nucléaire (nucléolaire) due à la production d'anticorps dirigés contre les composants du nucléole (ARN polymérase-1, NOR, U3RNP, PM / Scl) est détectée dans la sclérodermie, maladie de Sjogren. L'ANA augmente parfois avec les maladies endocriniennes (diabète de type 1, thyroïdite, thyréotoxicose, syndrome polyendocrinien), les affections cutanées (psoriasis, pemphigus), pendant la grossesse, après une greffe d'organe et de tissu, chez les patientes sous hémodialyse.

La luminescence centromérique apparaît en présence d’anticorps dirigés contre les centromères des chromosomes et est caractéristique de la forme de sclérodermie, le syndrome CREST.

Le type de luminescence cytoplasmique est associé à des anticorps anti-ARNt synthétase, en particulier anti-Jo-1, caractéristiques des dermatomyosites et des polymyosites. Ce type de coloration est également déterminé en présence d'anticorps dirigés contre d'autres composants du cytoplasme dans l'hépatite auto-immune, cirrhose biliaire primitive.

La détection simultanée de différents types de luminescence indique la présence de différents types d'anticorps.

Chez les personnes en bonne santé, une luminescence granuleuse peut être détectée à des titres faibles, modérés ou élevés d'ANA, mais les types de luminescence à grain grossier ou homogènes ne doivent normalement pas être déterminés.

En fonction des résultats de l'évaluation du type de luminescence, d'autres tactiques sont en cours de développement pour traiter le patient et des études supplémentaires sont prévues pour clarifier le spectre des ANA.

À quoi sert la recherche?

• Pour le diagnostic des maladies systémiques du tissu conjonctif.
• Pour le diagnostic différentiel des maladies rhumatismales.
• Évaluer l'efficacité du traitement des maladies auto-immunes.
• Surveiller l'évolution des maladies systémiques du tissu conjonctif.

Quand une étude est-elle prévue?

• Avec des symptômes d'une maladie auto-immune (fièvre prolongée, douleurs articulaires, fatigue, perte de poids, modifications de la peau).
• Lors de la détection de changements caractéristiques de maladies systémiques du tissu conjonctif (augmentation de la RSE, taux de protéine C-réactive, complexes immuns en circulation).

Que signifient les résultats?

Raisons pour augmenter le titre de ANF dans les cellules HEp-2:

• lupus érythémateux disséminé (dans 95% des cas),
• dermatomyosite / polymyosite,
• sclérodermie systémique (dans 60 à 90% des cas),
• Syndrome de Sjogren (dans 40 à 70% des cas)
• maladie du tissu conjonctif mixte (syndrome de Sharpe),
• Syndrome de Raynaud
• lupus discoïde,
• drogue lupus,
• la polyarthrite rhumatoïde,
• vascularite nécrosante,
• mononucléose infectieuse,
• leucémie
• tumeurs malignes (principalement lymphome),
• myasthénie grave
• endocardite infectieuse,
• hépatite auto-immune chronique,
• cirrhose biliaire primitive
• tuberculose,
• pneumoconiose,
• fibrose pulmonaire interstitielle.

Qu'est-ce que c'est typique?

Pour SLE, lupus médicamenteux, sclérodermie systémique, hépatite chronique active

Pour le LES, syndrome de Sjogren, maladie du tissu conjonctif mixte, polyarthrite rhumatoïde

Pour polymyosite / dermatomyosite, sclérodermie, syndrome de Sjogren, SLE

Syndrome CREST (calcification de la peau, syndrome de Raynaud, dysfonctionnement œsophagien, sclérodactylie, télangiectasie)

Dermatomyosite / polymyosite, maladie hépatique auto-immune, cirrhose biliaire primitive

Qu'est-ce qui peut influencer le résultat?

• Un faux résultat positif contribue à:

• • être âgé de plus de 60 à 65 ans (dans 10 à 37% des cas);
  • l'utilisation de médicaments pouvant entraîner un lupus d'origine médicamenteuse propyluracile, quinidine, réserpine, streptomycine, sulfanilamide, tétracycline, diurétiques thiazidiques).

• La prise de glucocorticoïdes (prednisone, dexaméthasone, métipred) conduit parfois à un résultat faux négatif.

• Dans 5% des cas de LES, un résultat négatif de cette analyse est possible (SLE ANF négatif). Dans de telles situations, pour clarifier le diagnostic, il est nécessaire de déterminer les anticorps anti-antigènes SS (Ro).
• Un résultat de test positif n'est pas une preuve absolue d'une maladie auto-immune. Chez les personnes en bonne santé dans 3 à 13% des cas, le titre de l'ANF a augmenté et atteint 1: 320.
• Les résultats du test doivent être évalués conjointement avec les données cliniques et d'autres paramètres de laboratoire.
• Si un résultat positif de l’étude est recommandé pour déterminer la spécificité de l’ANA immunoblot.

• Anticorps anti-ADN double brin (anti-ADNdb)
• Anticorps aux antigènes nucléaires (ANA), criblage
• Anticorps dirigés contre l'antigène nucléaire extractible (ENA-screen)
• Anticorps anti-cardiolipine, IgG et IgM
• Anticorps antinucléaires (anti-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, histones, nucléosomes, Ribo P, AMA-M2), immunoblot
• Numération globulaire complète (sans leucogramme ni ESR)
• Vitesse de sédimentation érythrocytaire (ESR)
• Antistreptolysine o
• Protéine C-réactive, quantitativement
• Facteur rhumatoïde
• Circulation Immunitaire Complexes (CIC)
• Composant complément C3
• Composante du complément C4

Qui fait l'étude?

• Wilson D. McGraw-Hill Manuel des tests de laboratoire et de diagnostic, 1st Ed Normal, Illinois, 2007: 55-57 p.
• Mariz HA, Sato EI, Barbosa SH, SH Rodrigues, Dellavance A, Andrade LE. Maladies anti-allergènes et maladies rhumatismales auto-immunes. Arthrite Rheum. Janvier 2011; 63 (1): 191-200.
• Kumar Y, A Bhatia, Minz RW. Tissu de connectivité: un voyage revisité. Diagnostic Pathol. 2 janvier 2009, 4: 1. PMID: 19121207 [PubMed].

Anticorps antinucléaires. Informations générales

ANA est un groupe aAT hétérogène qui réagit avec différents composants du noyau. La méthode de criblage standard pour déterminer l'ANA est une réaction d'immunofluorescence indirecte (NRIF) utilisant des coupes au cryostat de cellules hépatiques de souris ou de rat (rein) ou de Hep-2 (cellules épithéliales du larynx humain) comme substrat. L'utilisation de cellules HEp-2 standardisées est préférable car elle permet d'augmenter considérablement la sensibilité de la méthode et de décrire de manière fiable divers types de luminescence du noyau. Lorsque les ANA sont testés par la méthode NRIF, ils sont traditionnellement appelés facteurs antinucléaires (ANF).

ANF ​​est l'un des principaux tests de laboratoire de dépistage utilisés pour diagnostiquer les maladies rhumatismales systémiques. L'étude ANF est très utile pour le diagnostic du LES et du DSS, le diagnostic des US et du PM / DM, l'évaluation du pronostic et la surveillance de l'évolution de l'arthrite chronique juvénile et du phénomène de Raynaud. Les résultats positifs de la détermination de l'ANF sont considérés comme des critères de diagnostic obligatoires pour le lupus d'origine médicamenteuse, le syndrome du tissu conjonctif mixte (SSTF), l'hépatite auto-immune, et ne présentent aucune valeur diagnostique ni pronostique prouvée pour la PR, la sclérose en plaques, la thyroïde, les infections, la purpura idiopathique et la fibromyalgie. La fréquence de détection des FNA augmente avec l'âge, en particulier chez les femmes.

Chez les patients présentant des résultats positifs à l'ANA, il est recommandé de réaliser des tests de confirmation - détermination de l'ANA spécifique d'antigènes nucléaires et cytoplasmiques (ADN ds, Sm, SS-A / Ro, SS-B / La, Scl-70, RNP), à l'aide de méthodes ELISA., IB, RID, RIA, etc.

Facteur antinucléaire (ANF, HEp-2) avec détermination du type de luminescence (dans le sang)

Anticorps antinucléaires (ANA, ANA, anticorps antinucléaires, facteur antinucléaire-ANF) - Méthode NIF sur la lignée cellulaire HEp-2 avec détermination du type de luminescence. - un indicateur de maladies auto-immunes du tissu conjonctif. ANA est un groupe d’autoanticorps dirigés contre des protéines et d’autres composants (y compris l’ADN) présents dans les noyaux des cellules. Principales indications d'utilisation: diagnostic d'exclusion - lupus érythémateux disséminé (on pense que les ANA apparaissent dans 90% des cas de LES, autrement dit, un résultat négatif avec une probabilité d'environ 90% exclut le diagnostic de LES), le diagnostic différentiel des collagénoses systémiques (lupus erythematosus systémique, sclérodermes, sclérodermes). périartérite, dermatomyosite), hépatite chronique active.

À ce jour, plus de 200 espèces d’ANA ont été décrites et sont dirigées contre les acides nucléiques, les histones, les protéines de la membrane nucléaire, les composants de l’épissure, les ribonucléotides, les protéines nucléolaires et les centromères. Cependant, ils endommagent le tissu conjonctif, ce qui a contribué à l’introduction de la définition du facteur antinucléaire comme test des maladies systémiques du tissu conjonctif. Par "facteur antinucléaire", on entend un test de détection d'anticorps antinucléaires utilisant la méthode d'immunofluorescence indirecte.

Une méthode permettant de détecter le facteur antinucléaire dans le sang (anticorps antinucléaires) est la méthode d'immunofluorescence indirecte consistant à appliquer le sérum du patient sur les cellules d'une lignée cellulaire humaine HEp-2 (cellules de carcinome épithélial laryngé humain contenant différents antigènes nucléaires) à l'aide d'un conjugué marqué. avec des anticorps humains. D'autres lignées de cellules humaines peuvent être utilisées comme substrats. Cependant, en raison de la bonne morphologie et de la facilité de culture, les lignées Hep-2 sont devenues le substrat généralement reconnu de l'immunofluorescence indirecte. La méthode de détection de l'ANF a été développée par Tan en 1982, en utilisant la lignée de cellules épithélioïdes transplantables humaines HEp-2 comme substrat. Cette lignée cellulaire, dérivée d'un adénocarcinome du larynx humain, est une grande cellule épithéliale polyploïde non squameuse qui forme une monocouche sur du verre. Le sérum du patient est incubé avec un substrat tissulaire, tandis que les anticorps antinucléaires du sérum du patient (le cas échéant) sont associés aux antigènes nucléaires correspondants. Les sites de liaison des auto-anticorps sont détectés à l'aide d'un antisérum anti-humain marqué à la fluorescéine. Les résultats de la réaction sont évalués par microscopie à l'aide d'un microscope à luminescence et par une évaluation visuelle de la nature de la luminescence des anticorps liés. Parmi les avantages de HEp-2 (par rapport aux cryosections de tissus animaux), il y a la fréquence élevée de division cellulaire, qui permet de détecter des anticorps dirigés contre des antigènes exprimés uniquement lors de la division cellulaire, et l'absence d'une matrice cellulaire de tissu rendant difficile la visualisation d'une luminescence spécifique par rapport aux coupes histologiques. Dans certaines maladies, telles que le LES, la sclérodermie systémique (sclérodermie systémique), certaines infections, le système immunitaire des patients perçoit les noyaux (protéines nucléaires) de leurs propres cellules tissulaires comme des corps étrangers et leur produit des anticorps (anticorps antinucléaires - AHA). Cependant, ils endommagent le tissu conjonctif, ce qui a contribué à l’introduction de la définition du facteur antinucléaire comme test des maladies systémiques du tissu conjonctif.

Lors de l'interprétation des données, il convient de garder à l'esprit que le spectre AHA comprend un grand groupe d'auto-anticorps dirigés contre l'ADN, les nucléoprotéines, les histones, les ribonucléoprotéines nucléaires et d'autres composants du noyau. Ainsi, l’essai vise à détecter divers anticorps dirigés contre les composants du noyau et du cytoplasme, qui ont d’abord été détectés avec le SLE. Par la suite, les critères de diagnostic du test ont été élargis en relation avec la détection de ces anticorps et dans d’autres maladies du tissu conjonctif.

Les tests de dépistage pour la détermination des AHA totaux utilisent généralement un ensemble des antigènes suivants, qui sont les principaux marqueurs des maladies auto-immunes du tissu conjonctif: SS-A (Ro), SS-B (La), BNP70, Sm, RNP / Sm, J01, centromère B. Antigènes majeurs utilisés dans les kits modernes de détection des anticorps nucléaires de la classe IgG sont représentés par le jeu suivant:

1. 1. SS-A (Ro) - ribonucléoprotéines nucléaires (polypeptides). Les anticorps qui s'y trouvent se retrouvent plus souvent dans la sclérodermie systémique (60% des cas), le syndrome de Sjogren (jusqu'à 70% des cas) et dans le LES (jusqu'à 30% des cas). On pense que si ces anticorps sont détectés dans le sang de femmes enceintes, il s'agit d'un indicateur du risque d'augmentation de la survenue d'un syndrome de type lupus néonatal chez le nouveau-né (syndrome de lupus néonatal). Ces anticorps de la mère traversent le placenta et endommagent le fœtus, entraînant une anémie hémolytique et une thrombocytopénie. Les conséquences graves incluent la défaite du système conducteur du cœur de l'enfant (jusqu'à la cardiostimulation constante). Il a été noté que les femmes qui avaient un titre significatif de ces anticorps pendant la grossesse, sans signes cliniques évidents, développaient alors toute maladie auto-immune, y compris le LES.
2. 2. SS-B (La) - protéines nucléaires. Les anticorps dirigés contre eux sont détectés dans 60% des cas dans le syndrome de Sjogren et dans 15% des cas dans le LES.
3. 3. Scl-70 est une protéine-enzyme impliquée dans le métabolisme des acides nucléiques (topoisomérase-1). Les anticorps dirigés contre cette protéine sont les plus spécifiques de la sclérodermie systémique (jusqu'à 70% des cas).
4. 4. ADN double brin - ADN natif. Les anticorps anti-ADN sont les plus spécifiques pour le LES (jusqu'à 80% des cas) et pratiquement indétectables pour la polyarthrite rhumatoïde et la sclérodermie.
5. 5. RNP / Sm - Le complexe antigène RNP / Sm est constitué de ribonucléoprotéines Ul: Ul-68, Ul-A, Ul-C, U5, U6; ainsi que des polypeptides Sm: SmA |, SmB | B, SmD, SmE, SmF, SmG. Les anticorps produits pour ces antigènes sont les plus spécifiques des maladies mixtes du tissu conjonctif - c.-à-d. en présence de symptômes de sclérodermie, de polyarthrite rhumatoïde, de LES, de polymyosite (environ 95% des cas) et, dans une moindre mesure, du LES (jusqu'à 30% des cas).
6. 6. Jo-1 - enzyme - ARN synthétase de transport d'aminoacyle. Les autoanticorps dirigés contre cette protéine ont une signification diagnostique dans la myosite (polymyosite / dermatomyosite).
7. 7. CENP-B (Centromer) - pour la détection des anticorps anti-acétomères (anti-Centromer B), afin de diagnostiquer le syndrome de CREST (ce syndrome associe calcification de la peau, syndrome de Raynaud, troubles de la motilité de l'œsophage, sclérodactylie, télangiectasie). Le syndrome CREST désigne une variante de la sclérodermie systémique (sclérose systémique). Ces anticorps chez les patients indiquent une évolution favorable de la sclérodermie systémique et suggèrent une petite lésion des organes internes.
8. 8. Les cellules Hep-2 sont des cellules de carcinome épithélial du larynx humain de la lignée Hep-2 contenant de nombreux antigènes nucléaires, y compris l'antigène SS-A (Ro) et les antigènes du centromère. Les anticorps anti-hép-2 sont présents chez les patients atteints de polymyosite et de dermatomyosite dans 90% des cas.
9. 9. Mitochondries (PDC) - PDC - complexe pyruvate déshydrogénase. Un grand groupe d'anticorps antimitochondriaux sont des auto-anticorps formés sur les enzymes du complexe pyruvate déshydrogénase, situé dans la mitochondrie des cellules et impliqué dans la décarboxylation oxydante du pyruvate.

Une ANA est souvent détectée dans la cirrhose biliaire.

Les AHA ne pénètrent généralement pas dans les cellules vivantes et sont donc inoffensifs. Mais parfois, ils forment des complexes antigène-anticorps qui provoquent des lésions tissulaires (comme par exemple en cas de LES, lésions rénales). En liaison avec l'implication de nombreux organes dans le processus pathologique, la valeur diagnostique de la détermination de l'AHA est faible et les résultats de l'analyse ne confirment que partiellement les données cliniques.

En plus des maladies rhumatismales, l'ANA peut également être détecté dans les cas d'hépatite chronique active dans jusqu'à 50% des cas. L'apparence (titres faibles) est possible avec les maladies inflammatoires, l'oncologie et les infections virales.

• Taux de détection comparatif des anticorps antinucléaires.