Antigène anti-VIH: quel est le rôle joué dans le diagnostic?

Le diagnostic du virus de l'immunodéficience se fait de différentes manières. Cependant, les plus populaires de ces dernières années gagnent en systéme de test hypersensible. Avec leur aide, il est possible d'identifier cette maladie dès les premiers stades. Pour cela, on utilise l'antigène du VIH, dont la présence dans le corps est garantie pour indiquer un diagnostic désagréable et dangereux. Plusieurs études différentes sont utilisées pour le détecter.

Pourquoi la réaction des anticorps antigènes du VIH 1, 2 est-elle l'indicateur le plus fiable de la présence du virus de l'immunodéficience?

La vérification du virus de l'immunodéficience dans les établissements médicaux publics est gratuite. Mais il est produit en deux étapes, si nécessaire. Initialement, l'HA au VIH n'est pas testé. La première analyse de la présence ou de l’absence de cette maladie vise à identifier les anticorps. Ceci est un test ELISA. Le dosage immunologique permet d’identifier les personnes dont le virus de l’immunodéficience est garanti non infectées (dans le cas où le test a été effectué conformément à toutes les règles).

Ainsi que sous condition d'infection. Pourquoi conditionnel? Le fait est que les anticorps anti-VIH 1, 2, contrairement à l’hypertension de ce virus, sont sécrétés dans le corps pour d’autres raisons. De quoi parle-t-on exactement. Tout d'abord, cela est possible avec les maladies du système immunitaire. En cas de problèmes avec ce système vital, le corps en tant que défense produit des anticorps, qui sont déterminés au moyen d'un dosage immunoenzymatique, ainsi que ceux apparaissant dans cette maladie dangereuse. Si le résultat du test ELISA est positif, le patient est envoyé pour une recherche supplémentaire, basée sur l'identification de la réaction du type AG-AT 1,2. Les polycliniques utilisent souvent des transferts immunitaires. Il s'agit du type d'analyse le plus courant pour la détection du virus de l'immunodéficience. Ainsi, les antigènes et les anticorps anti-VIH 1 et 2 ne sont pas seulement détectés, ils sont également testés pour déterminer la force de la réaction.

Qu'est-ce que l'antigène p24 du VIH?

Avant de parler de la manière dont l’antigène du VIH / SIDA du VIH peut être détecté, il faut expliquer en quoi il consiste. Les scientifiques ont longtemps découvert que l’AG, qui est marqué sur les formulaires de test et dans les laboratoires avec le marquage p24, est une capside d’un rétrovirus. En termes simples, il s’agit d’une protéine du virus de l’immunodéficience. La détection de l'antigène du VIH est impossible sans la détection des anticorps des premier et deuxième types. Parce que l'hypertension est fortement associée aux anticorps. Ils se forment dans le corps en tant que réponse immunitaire à l'apparition d'anticorps, qui sont à leur tour une sorte d '"interventionnistes" visant à détruire le système immunitaire et à produire du matériel biologique dangereux.

Les anticorps et l'hypertension contre le VIH de type 1 et de type 2 sont détectés en réaction l'un avec l'autre. Les premiers jouent dans le corps humain le rôle de molécules étrangères. Ces derniers servent de type de révélateur de protéines ou de polysaccharides. Dans le cas du virus de l'immunodéficience, AH induit une réponse immunitaire. En conséquence, dans la médecine et la science liées à l'étude de cette maladie, ils sont classés comme immunogènes.

Les types d’antigènes 1 et 2 du VIH P24 ne sont détectés que par le biais d’une étude approfondie du matériel biologique. Le plus souvent, le sang veineux est utilisé pour l'analyse. Dans certains cas, il s'agit d'un liquide séminal ou sécrétoire approprié, sécrété par les organes génitaux féminins. Le test antigène VIH combiné est effectué selon trois méthodes connues. De quelles études spécifiques parle-t-on? Il s'agit d'un immunotransfert, d'un test combiné (test combiné VIH) et d'un test d'immunochimiluminescence. Chacun d'entre eux devrait être discuté séparément.

Immun blot: anticorps et antigènes du VIH 1 et 2

Comme mentionné ci-dessus, l'immunotransfert est l'un des tests les plus courants permettant de détecter un antigène du VIH. Comment est-il produit? Au départ, le patient prélève du sang dans une veine. L'enquête est faite sur un estomac vide. Trente à quarante minutes avant que le patient ne soit pas autorisé à fumer. L’essence de l’étude réside dans le fait que si une personne a un virus d’immunodéficience de type 1 ou 2 dans le corps, la réaction de l’antigène - anticorps est stable et indissociable. Le matériel biologique de la personne testée est d'abord divisé en un réactif spécial, puis placé sur une bandelette qui est généralement une plaquette thermoformée contenant des cellules de polystyrène. Suite à l'ajout de réactifs spéciaux, le technicien vérifie d'abord si cette réaction va se produire, puis, à l'aide de lavages de sang répétés, tire des conclusions sur sa résistance. Cela permet de comprendre s'il existe dans l'organisme un virus d'immunodéficience, qui est par la suite le facteur le plus important pour poser un diagnostic.

Il est recommandé de faire un test AH-AT pour le VIH, réalisé au moyen d'un immuno-transfert, au plus tôt quatre à cinq semaines après l'infection envisagée. Bien que ce test soit un système de quatrième génération, il n’appartient pas à l’hypersensibilité et présente une erreur de quelques pour cent (de deux à trois).

Analyse hypersensible: anticorps anti-VIH du VIH / VIH de type double (VIH) du type 1, 2

Le test VIH (VIH) ag-ab (AG-AT), à la différence du transfert immunitaire, est hypersensible. Les experts en médecine affirment que son utilisation est recommandée dans les deux semaines suivant l’infection présumée. Il est destiné à l'étude d'anticorps spécifiques, qui sont une sorte de réponse immunitaire du corps humain à une intervention telle que le virus de l'immunodéficience, ainsi que l'AG p24. Les anticorps duo VIH anti-VIH de types 1 et 2 visent également à détecter les anticorps dirigés contre cette maladie dangereuse. Avec son aide, il est possible non seulement de les détecter dans le sang, mais également de déterminer le type de maladie.

Le test antigène VIH combiné est un test de combinaison. Il vérifie également la réaction antigène-anticorps, qui indique la présence d'une terrible maladie dans le corps.

Analyse immunochimiluminescente: VIH 1,2 combo VIH VIH AT-AG IHLA

Le test ILHL pour le VIH at-ag est également hypersensible. La base de cette étude est une sorte de réaction AG-AT. La spécificité de la méthode est d'environ quatre-vingt-douze pour cent, alors que sa fiabilité varie de quatre-vingt-dix-huit à quatre-vingt-dix-neuf. Nous pouvons en conclure que cette analyse comporte une erreur, mais qu'elle est relativement petite. Et si nécessaire, facilement chevauché en revérifiant. Une telle analyse est appliquée dans les deux ou trois semaines suivant l’infection proposée.

Ce test VIH combiné vise à étudier le sang veineux en cas de contrôle de la présence du virus de l’immunodéficience dans le corps. Dans l'identification d'autres maladies et pathologies, on utilise de l'urine ou du liquide sécréteur, qui est sécrété par les organes génitaux. AT et AG pour le virus de l'immunodéficience avec ILA sont également testés pour la réaction. À cette fin, des réactifs spéciaux et des bandelettes avec des cellules sont utilisés. Réalisée en plusieurs étapes de l’étude, vous permet d’établir ou de réfuter le diagnostic avec précision.

Toutes les méthodes ci-dessus de diagnostic du virus de l'immunodéficience par une réaction AT-AG stable sont efficaces. Ils ne diffèrent que par les termes admissibles de l'étude. Le médecin devrait décider de la méthode à utiliser.

Antigène p24 du sérum

Ag p24 dans le sérum est normalement absent.

Ag p24 est une protéine de la paroi des nucléotides du VIH. Le stade des manifestations primaires après l’infection par le VIH est une conséquence de l’apparition du processus de réplication. Ag p24 apparaît dans le sang 2 semaines après l'infection et peut être détecté par ELISA entre 2 et 8 semaines. Deux mois après le début de l'infection, Ar p24 disparaît du sang. À l'avenir, dans l'évolution clinique de l'infection par le VIH, on note une deuxième augmentation de la teneur en protéines p24 dans le sang. Il tombe sur la période de formation du SIDA. Les systèmes de test existants du test ELISA pour la détection d'Ar p24 sont utilisés pour la détection précoce du VIH chez les donneurs de sang et les enfants, pour déterminer le pronostic de la maladie et surveiller le traitement. La méthode ELISA a une sensibilité analytique élevée, ce qui permet de détecter le VIH-1 Ag p24 dans le sérum à des concentrations de 5-10 pg / ml et de moins de 0,5 ng / ml de VIH-2, ainsi que de leur spécificité. Cependant, il convient de noter que la teneur en Ar p24 dans le sang est sujette à des variations individuelles, ce qui signifie que seuls 20 à 30% des patients peuvent être identifiés à l'aide de cette étude au début de la période suivant l'infection.

Les protéines IgM et IgG dans le sang apparaissent à partir de la 2ème semaine, atteignent un pic pendant 2 à 4 semaines et restent à ce niveau plusieurs fois - IgM de classe IgM pendant plusieurs mois, disparaissant au cours de l'année suivant l'infection, et AT IgG peut persister pendant des années.

L’apparition des classes AT à différents stades de l’infection par le VIH est présentée à la Fig.

Fig. L'apparition de classes AT à différents stades de l'infection par le VIH

Fig. L'apparition de classes AT à différents stades de l'infection par le VIH

Méthodes de diagnostic de l'infection à VIH

Actuellement, les nouvelles technologies de diagnostic permettent d'identifier les causes étiologiques et pathogéniques de nombreuses maladies et d'influencer fondamentalement les résultats du traitement. Les résultats les plus impressionnants de l’introduction de ces technologies dans la pratique clinique ont peut-être été obtenus dans le domaine de l’immunologie et du diagnostic des maladies infectieuses.

Les systèmes de test basés sur l’immunoanalyse enzymatique et l’analyse immuno-chimioluminescente permettent de détecter des anticorps de différentes classes, ce qui augmente considérablement l’informativité des méthodes de sensibilité et de spécificité cliniques et analytiques pour le diagnostic de maladies infectieuses. Il convient de noter que les avancées les plus significatives dans le diagnostic des infections sont associées à l’introduction dans la pratique de laboratoire de la méthode de la réaction en chaîne par polymérase, considérée comme le «gold standard» pour le diagnostic et l’évaluation de l’efficacité du traitement de nombreuses maladies infectieuses.

Pour l'étude peuvent être utilisés divers matériaux biologiques: sérum, plasma sanguin, grattage, biopsie, liquide pleural ou céphalo-rachidien (LCR). Tout d'abord, les méthodes de diagnostic en laboratoire des infections visent à identifier des maladies telles que l'hépatite virale B, C, D, l'infection à cytomégalovirus, les infections sexuellement transmissibles (blennorragie, chlamydia, mycoplasmes, ureaplasma), la tuberculose, l'infection à VIH, etc.

L’infection à VIH est une maladie causée par le virus de l’immunodéficience humaine (VIH), qui persiste longtemps dans les lymphocytes, les macrophages, les cellules du tissu nerveux, entraînant une lésion progressive et lente des systèmes immunitaire et nerveux du corps, se manifestant par des infections secondaires, des tumeurs, une encéphalite subaiguë et d’autres pathologies. changements.

Les agents infectieux - les virus de l’immunodéficience humaine des premier et deuxième types (VIH-1, VIH-2) - appartiennent à la famille des rétrovirus, la sous-famille des virus lents. Les virions sont des particules sphériques de 100–140 nm de diamètre. La particule virale a une membrane phospholipidique externe, comprenant des glycoprotéines (protéines structurales) de poids moléculaire spécifique, mesurée en kilodaltons. Dans le VIH-1, il s’agit des gpl60, gpl20, gp41. L'enveloppe interne du virus qui couvre le noyau est également représentée par des protéines de poids moléculaire connu - p17, p24, p55 (HIV-2 contient gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).

Le génome du VIH comprend l'ARN et l'enzyme transcriptase inverse (transcriptase inverse). Afin que le génome du retrovirus puisse fusionner avec le génome de la cellule hôte, l'ADN est d'abord synthétisé sur la matrice d'ARN viral à l'aide de la revertase. Ensuite, l'ADN du provirus est inséré dans le génome de la cellule hôte. Le VIH présente une variabilité antigénique prononcée bien supérieure à celle du virus de la grippe.

Chez les humains, les cibles principales du VIH sont les lymphocytes T, portant à la surface le plus grand nombre de récepteurs de CD4. Une fois que le VIH est entré dans la cellule avec l'aide de la revertase, le virus synthétise l'ADN, qui est inséré dans l'appareil génétique de la cellule hôte (lymphocytes CD4) et conserve son provirus à vie. Outre les lymphocytes T auxiliaires lymphocytaires, les macrophages, les lymphocytes B, les cellules de la névroglie, la muqueuse intestinale et certaines autres cellules sont également affectés. La diminution du nombre de lymphocytes T (cellules CD4) s'explique non seulement par l'effet cytopathogène direct du virus, mais également par leur fusion avec des cellules non infectées. Parallèlement à la défaite des lymphocytes T chez les patients infectés par le VIH, l'activation polyclonale des lymphocytes B s'accompagne d'une augmentation de la synthèse d'immunoglobulines de toutes les classes, en particulier d'IgG et d'IgA, et d'un épuisement ultérieur de cette partie du système immunitaire. La dérégulation des processus immunitaires se manifeste également par une augmentation du taux d'interféron α, la β2-microglobuline, une diminution du taux d'IL-2. À la suite d'un dysfonctionnement du système immunitaire, notamment avec une diminution du nombre de lymphocytes T (CD4) à 400 cellules dans 1 µl de sang ou moins, la réplication incontrôlée du VIH est favorisée par une augmentation significative du nombre de virions dans divers milieux corporels. À la suite de la défaite de nombreuses parties du système immunitaire, une personne infectée par le VIH devient sans défense contre les agents pathogènes de diverses infections.

Dans le contexte d'une immunosuppression croissante, développez des maladies évolutives graves que l'on ne retrouve pas chez une personne dont le système immunitaire fonctionne normalement. Ce sont des maladies que l’Organisation mondiale de la santé (OMS) a identifiées comme des maladies marqueurs du sida ou révélatrices du sida.

Maladies indicatrices du sida

Le premier groupe comprend les maladies caractérisées par un déficit immunitaire sévère seulement (taux de CD4 de 74 100 copies / ml, presque tous les patients développent un tableau clinique du SIDA (Senior D., E. Holden, 1996).

La probabilité de contracter le sida est 10,8 fois plus élevée chez les personnes dont le taux sanguin de VIH-1 est supérieur à 10 000 copies / ml que chez celles dont le taux sanguin de VIH-1 est de 20 000 copies / ml (PCR). L'évaluation des résultats de la thérapie antirétrovirale chez les personnes infectées par le VIH vise à réduire le taux d'ARN sérique du VIH.

Avec un traitement efficace, le niveau de virémie devrait diminuer 10 fois au cours des 8 premières semaines et être inférieur à la limite de sensibilité de la méthode (PCR) (

Table décodant les résultats du test VIH

Une attention particulière est actuellement accordée au diagnostic du VIH (virus de l'immunodéficience humaine) chez l'homme. La détection de la maladie à un stade précoce aidera au démarrage précoce du traitement, ce qui affectera considérablement l’augmentation de la durée de vie du patient.

Après un test VIH, le décodage des résultats est généralement positif ou négatif. Dans ce cas, il existe un diagnostic primaire et secondaire. Au primaire - une personne est contrôlée par ELISA. Si nécessaire, un deuxième test sanguin pour le VIH est effectué. Que signifie un résultat positif et négatif? Comment déchiffrer un test VIH? Pourquoi une personne qui n'est pas toxicomane ni alcoolique a-t-elle un partenaire sexuel permanent, déchiffrer l'analyse du virus de l'immunodéficience donne un résultat positif mais douteux?

A propos du VIH

Les agents responsables de la maladie sont du premier et du deuxième type. Une longue période de temps où leur présence dans une personne passe inaperçue, puis l’immunité est tout d’abord affectée, puis les autres systèmes d’une personne.

Dans la principale méthode de diagnostic en laboratoire du virus de l’immunodéficience, des anticorps anti-VIH sont détectés. Le dosage immuno-absorbant enzymatique (ELISA) est la base de la méthode, elle est sensible (99,5% et plus) et spécifique (99,8% et plus). De plus, lors du diagnostic du VIH par ELISA, l’antigène p24 est déterminé.

Chaque système de test comporte différents indicateurs, qui permettent d’identifier diverses structures protéiques de la coque virale. Les agents responsables du VIH sont de deux sous-types: 1er et 2e ou VIH-1 et VIH-2. Les particules virales ressemblent à une forme sphérique avec une coque externe phospholipidique. Pour le 1er sous-type, il a le poids moléculaire suivant: gp120, gp41, gp160. Le deuxième sous-type contient gp105, gp36, gp140. Pour la coque interne du virus, le poids moléculaire est également connu. Pour le 1er sous-type, il s'agit de p55, p17, p24. Pour le 2ème - p16, p25, p55.

Pour identifier un virus, il existe trois ensembles principaux de protéines pour chaque système de test.

En général, le résultat ELISA peut être:

• négatif;
• faux positif;
• faux négatif;
• douteux ou incertain.

Les méthodes de diagnostic sont des antigènes détectés, des anticorps.

A propos du résultat normal

Norma - ça veut dire quoi? Quand un test VIH est négatif, cela est considéré comme normal.

1. La dernière génération de systèmes de test ELISA vous permet de déterminer la présence d’anticorps anti-VIH et de particules de protéines. Si l'analyse est normale, les anticorps et les particules de protéines de l'agent pathogène ne se trouvent pas dans le sang. Mais il est possible de dire avec certitude qu’une personne est en bonne santé sur cette base si, avant de la poser, il n’y avait aucun risque d’infection pendant 3 mois. Sinon, vous devez répéter le test après un certain temps.

Il y a eu des cas où le VIH n'a été détecté qu'après 6 mois. Par conséquent, si le résultat est négatif et en cas de contact avec un patient infecté par le VIH, il est nécessaire, pour des raisons de fiabilité, de répéter les tests après trois, quatre et six mois. Il se trouve que le test ELISA a donné un résultat négatif et que la personne soupçonne clairement la présence de signes du VIH, il est recommandé de repasser le test. Un résultat erroné est possible en raison du moment précoce de l'analyse ou du facteur humain.

2. Si le résultat est négatif lorsque l'immunoblot est obtenu, alors c'est l'analyse la plus fiable.

Si une personne a un virus d'immunodéficience et que le résultat est négatif, il s'agit probablement d'une erreur médicale pouvant survenir à n'importe quel stade du test. Si, en répétant l'immunoblot après trois et six mois, le résultat est négatif, il n'y a alors plus rien à craindre, cela parle de la norme. Et ce n'est qu'après la réponse négative de l'immunoblot qu'un certificat attestant que l'analyse du VIH est négative est délivré.

3. La recherche par PCR sur le diagnostic du virus de l'immunodéficience chez l'adulte est très rarement utilisée et cette méthode est utilisée pour les enfants nouveau-nés.

La norme est également considérée comme un résultat négatif.

4. Selon des recherches sociologiques, de nombreuses personnes utilisent un test rapide de dépistage du VIH. À la vue d'une bande négative, les gens se calment et refusent de se rendre dans un établissement médical, malgré tous les signes d'infection par le VIH. Mais vous devez savoir que la précision du test rapide est de quatre-vingt-cinq pour cent. De plus, chez vous, vous pouvez le tenir incorrectement, sinon ses conditions de stockage seront violées. Il est encore plus probable que le résultat soit incorrect. Même prendre 8 heures avant de tester de l'eau alcaline minérale affectera le résultat du test. Par conséquent, le fait que le virus de l'immunodéficience humaine soit absent chez une personne sur la base d'un test rapide, même s'il est négatif, n'est pas toujours la bonne déclaration.

Analyse de décodage

Une fois que les personnes ont été testées, la question qui se pose est souvent de savoir comment déchiffrer le résultat de la recherche, que faire si un résultat positif est obtenu pour le VIH.

1. Si le test ELISA a montré la présence de tous ou presque tous les anticorps anti-antigènes selon ce système de test, cela signifie un test positif pour le VIH. Si la réponse après le deuxième dosage immunologique enzymatique sérologique est positive, il est nécessaire de procéder à un immunoblot. Décrypter les résultats sera plus précis. Si le dosage immunoenzymatique donne un résultat positif, l’analyse d’immunoblot suivante montre également la présence du VIH, puis le résultat final est présenté. Lorsque les tests sont décryptés, vous devez savoir qu'un test positif pour le VIH est déterminé par:

• de 60% à 65% 28 jours après l'infection;
• 80% en 42 jours;
• dans 90% après 56 jours;
• 95% en 84 jours.

Si la réponse au VIH est positive, cela signifie que des anticorps anti-virus ont été détectés. Pour éviter une réponse faussement positive, il est nécessaire de refaire le test, de préférence deux fois. Si des anticorps contre l'immunodéficience ont été détectés lors de la réalisation de deux tests sur deux ou lors de la réalisation de trois tests sur deux d'entre eux, le résultat est considéré comme positif.

L'antigène p 24 peut être détecté dans le sang dans les 14 jours suivant le jour de l'infection. En utilisant la méthode de dosage immunoenzymatique, cet antigène est détecté entre 14 et 56 jours. Après 60 jours, il n'est plus dans le sang. Cette protéine p24 ne repousse dans le sang que lorsque le sida se forme dans le corps. Par conséquent, les systèmes de dosage immuno-enzymatiques sont utilisés pour détecter le VIH dans les premiers jours de l’infection, pour déterminer l’évolution de la maladie et surveiller le processus de traitement. La haute sensibilité analytique de l’immunoessai enzymatique détecte l’antigène p24 dans le matériel biologique contenant le VIH du premier sous-type à une concentration de 5 à 10 pkg / ml, le VIH du deuxième sous-type étant inférieur ou égal à 0,5 ng / ml.

2. Le résultat douteux d'un dosage immunoenzymatique implique que, lors du diagnostic, le personnel médical confonde généralement quelque chose de confondu ou que la personne présente des signes d'infection et que le résultat est négatif, ce qui provoque des soupçons;

3. Un résultat faussement positif est le résultat de tests sanguins effectués dans les conditions suivantes du patient:

• la grossesse
• si une personne a des troubles hormonaux;
• avec immunosuppression prolongée.

Comment déchiffrer l'analyse dans ce cas? Un résultat faussement positif est obtenu si au moins une protéine est détectée.

En raison du fait que l'antigène p24 est très dépendant des variations individuelles, on utilise alors cette méthode pour détecter dans la première période d'infection de 20% à 30% des patients.

A propos des indicateurs après recherche par la méthode de la réaction en chaîne de la polymérase

En utilisant cette méthode, l'ARN et l'ADN du VIH sont détectés presque immédiatement après l'infection. Mais le diagnostic final n'est pas posé, il nécessite une confirmation obligatoire par d'autres méthodes. “Aide à déchiffrer le résultat de la PCR.” - assez souvent, une telle demande peut être entendue. Qu'est-ce qui est écrit dans ce cas, si un virus d'immunodéficience est détecté? Lorsque vous répondez au résultat de l'analyse effectuée par PCR, le nombre de copies d'ARN dans un millilitre de sang est indiqué. Le tableau ci-dessous montre le résultat en fonction des caractéristiques quantitatives dans le sang.

Qu'est-ce que cela signifie: les anticorps anti-VIH sont détectés (non détectés)

Le test ELISA (ELISA) est l’un des tests VIH les plus fiables. Pour détecter la présence de virus d'immunodéficience dans le sang, des anticorps sont testés. Devrais-je m'inquiéter s'ils ne sont pas trouvés? Qu'est-ce qu'un IFI positif?

Que disent les anticorps anti-VIH dans le sang?

Si un virus pathogène est entré dans le corps humain, le système immunitaire commence à produire des anticorps anti-VIH. Lorsque de tels composés protéiques sont trouvés dans l'échantillon de sang examiné, il s'agit d'un signal alarmant. Il y a de fortes chances qu'une personne soit infectée par un virus dangereux. L'antigène p24 du VIH détecté indique qu'une infection par le virus de l'immunodéficience s'est récemment produite. Antigène - matière organique. Sa quantité dans le sang diminue à mesure que l'organisme produit des anticorps. La quantité d'anticorps par unité de sang nous permet de prédire l'évolution de la maladie.

Une autre caractéristique importante est la charge virale (la concentration de cellules virales dans 1 ml de plasma sanguin). Plus l'ampleur de cet indicateur est grande, plus le système immunitaire est déprimé. Il n'est pas capable d'empêcher la reproduction du virus.

Après quelle heure les anticorps anti-VIH apparaissent-ils?

Un dosage immunoenzymatique du VIH est effectué 3 à 4 semaines après une éventuelle infection. Faire cela plus tôt n'a pas de sens, car les anticorps ne se sont pas encore formés, ou ils sont trop peu nombreux. Si une infection est survenue et qu'aucun anticorps anti-VIH n'est détecté dans le sang, un tel test est alors appelé faux négatif. Pour poser un diagnostic définitif, le test positif initial du test VIH ne suffit pas. Le garant de la fiabilité de la recherche est une nouvelle vérification. Nouveaux diagnostics réalisés après 3 mois et six mois. Si tous les résultats sont positifs, prescrire des tests supplémentaires.

Les termes indiqués sont moyens. Dans chaque cas, les termes sont différents. Si la partie du biomatériau infecté pénétrant dans l'environnement interne du corps était importante, des protéines protectrices - des anticorps - peuvent se former en une semaine. Ceci est possible avec la transfusion de sang infecté. Dans 0,5% des cas, il n’est possible de détecter le VIH qu’après un an. Cela se produit si le nombre de cellules virales est très petit.

Moment où les anticorps apparaissent dans le corps d’une personne infectée:

• dans 90 à 95% des cas - 3 mois après l'infection présumée;
• dans 5 à 9% des cas, après 6 mois;
• dans 0,5 - 1% des cas - à une date ultérieure.

Indicateurs standards pour la présence d'anticorps

Des anticorps, ou immunoglobulines, se forment lorsque des virus et des bactéries étrangers pénètrent dans le corps, ainsi que des composés organiques nocifs. Chaque cellule virale a son propre antagoniste. Des paires uniques sont formées: une cellule étrangère + une immunoglobuline. Après avoir détecté les anticorps présents dans le corps, les médecins reçoivent des informations sur les virus qui ont provoqué leur apparition. Les immunoglobulines sont divisées en 5 groupes:

1. IgA - sont responsables de la répulsion immunitaire contre le rhume, les inflammations de la peau, l’intoxication générale;
2. IgE - conçu pour lutter contre les parasites;
3. IgM - gardes du corps. Ils "attaquent" les cellules virales dès qu'elles entrent dans le sang;
4. IgD - alors que la direction de leur activité est inconnue. De telles immunoglobulines pas plus de 1%;
5. IgG - fournit une résistance à l'évolution prolongée de la maladie, est responsable de la protection du fœtus dans l'utérus et constitue la principale barrière contre les virus chez le nouveau-né. Une augmentation du taux d'IgG dans le sang peut indiquer le développement du VIH.

Taux normal d'IgG (gigamol par litre)

Enfants de 7,4 à 13,6 g / l

Adultes de 7,8 à 18,5 g / l

Pour identifier les anticorps anti-VIH, effectuez une analyse quantitative. Un résultat négatif est la norme pour une personne en bonne santé. Un test positif indique la pénétration dans le corps de particules virales contre lesquelles des immunoglobulines protectrices sont synthétisées.

Si dans la colonne "anticorps" est "+", il est trop tôt pour résumer, des recherches supplémentaires sont prescrites. L’infection par le VIH n’est pas toujours la cause d’une réaction positive. Souvent, d'autres causes d'anomalie se manifestent. Causes de réactions faussement positives:

• Au cours des 18 premiers mois de vie, les immunoglobulines de l’enfant sont contenues dans le sang de bébé de la mère pendant la grossesse;
• processus auto-immunes dans le corps;
• la présence de facteur rhumatoïde;
• médicaments.

L'analyse quantitative aide à déterminer le stade de la maladie. Si le nombre d'immunoglobulines est insignifiant, la maladie commence tout juste à se développer. La prévision dans un tel cas est favorable. Une concentration élevée de protéines protectrices peut indiquer que le VIH a atteint le stade final - le SIDA.

Allouer les types VIH 1 et 2. Chacun d'entre eux provoque la formation de certains anticorps. Déterminer le type d'anticorps facilite l'analyse qualitative. Sous la forme de tels tests, les chiffres 1 et 2 sont indiqués et les données sont renseignées devant chacune d’elles.

Comment détecter les anticorps anti-VIH

Le sérum est isolé d'une portion de sang veineux. Il est appliqué sur une base solide et associé à des cellules virales. Ensuite, la surface est traitée avec des enzymes spéciales. Dans le sang, où les virus d'immunodéficience étaient initialement présents, des anticorps sont produits après un rinçage.

Une personne qui doit donner du sang pour ses anticorps, 2 jours avant l'analyse, doit refuser les aliments gras et épicés, ne pas boire de boissons alcoolisées. Pendant 2 semaines, il est recommandé d'arrêter de prendre des médicaments antiviraux. Tous les médicaments ne doivent être utilisés qu'en cas d'absolue nécessité. À la veille du test, il est recommandé d’observer une paix psychologique et physique. L'analyse effectuée l'estomac vide le matin. Les études sur la présence d'anticorps sont reconnues comme les plus fiables pour le diagnostic de l'infection par le VIH. L'erreur ne dépasse pas 2%.

Indications pour ELISA, y compris les signes cliniques du VIH:

• rechutes persistantes de maladies infectieuses;
• fièvre prolongée;
• forte probabilité d'infection (relations sexuelles non protégées ou transfusion sanguine d'une personne séropositive);
• hospitalisation à l'hôpital;
• don de sang;
• la planification de la grossesse et son déroulement;
• blessure par une aiguille ou un autre objet pointu infecté par du matériel biologique;
• avant la chirurgie.

Les signes du VIH peuvent ne pas apparaître immédiatement. Dans certains cas, la maladie ne se fait pas sentir très longtemps (jusqu'à 10 ans). Ce fait empêche un diagnostic et un traitement rapides. Afin de reconnaître le virus de l'immunodéficience humaine à temps, il est nécessaire de passer des tests au moindre soupçon. Si le diagnostic est confirmé, tous les partenaires sexuels des personnes infectées sont identifiés. Ils devraient se faire tester et déterminer leur statut VIH. Le personnel médical travaillant avec des patients atteints du VIH devrait être soumis à des contrôles de routine.

Test VIH / SIDA - antigène p24 dans le sang

L'antigène p24 du sérum est normalement absent.

L'antigène p24 est une protéine de la paroi des nucléotides du VIH. Le stade des manifestations primaires après l’infection par le VIH est une conséquence de l’apparition du processus de réplication. L'antigène p24 apparaît dans le sang 2 semaines après l'infection et peut être détecté par ELISA entre 2 et 8 semaines. Deux mois après le début de l'infection, l'antigène p24 disparaît du sang. À l'avenir, dans l'évolution clinique de l'infection par le VIH, on note une deuxième augmentation de la teneur en protéines p24 dans le sang. Il tombe sur la période de formation du SIDA.

Les systèmes de test ELISA existants pour la détection de l'antigène p24 sont utilisés pour la détection précoce du VIH chez les donneurs de sang et les enfants, afin de déterminer le pronostic de la maladie et de surveiller le traitement. La méthode ELISA présente une sensibilité analytique élevée, ce qui permet de détecter l'antigène p24 du VIH-1 dans le sérum à des concentrations de 5 à 10 pg / ml et inférieures à 0,5 ng / ml de VIH-2 et à leur spécificité. Cependant, il convient de noter que la teneur en antigène p24 dans le sang est sujette à des variations individuelles, ce qui signifie que seuls 20 à 30% des patients peuvent être identifiés à l'aide de cette étude au début de la période suivant l'infection.

Des anticorps anti-p24 des classes IgM et IgG dans le sang apparaissent à partir de la 2ème semaine, culminent pendant 2 à 4 semaines et restent à ce niveau pendant différents temps - anticorps IgM pendant plusieurs mois, disparaissant au cours de l'année suivant l'infection, et les anticorps IgG peuvent persister pendant des années.

Anticorps anti-VIH 1 et 2 et antigène 1 et 2 du VIH (VIH Ag / Ab Combo)

Anticorps anti-VIH 1 et 2 et antigène 1 et 2 du VIH (VIH Ag / Ab Combo) - description complète du diagnostic, des indications et de l'interprétation des résultats.

Les anticorps anti-VIH 1 et 2 et les antigènes 1 et 2 du VIH (VIH Ag / Ab Combo) sont des anticorps produits dans l'organisme par le virus de l'immunodéficience humaine.

Le virus de l'immunodéficience humaine (VIH) fait partie de la famille des rétrovirus et endommage les cellules du système immunitaire. Le virus est de deux types, le VIH-1 est plus commun, le VIH-2 - principalement dans les pays africains.

Le VIH est inclus dans les cellules humaines, les particules virales se multiplient et, par conséquent, des antigènes du virus apparaissent à la surface des cellules, auxquelles les anticorps correspondants sont produits. Leur détection dans le sang vous permet d'établir un diagnostic d'infection par le VIH.

Les anticorps anti-virus de l'immunodéficience humaine peuvent être détectés trois à six semaines après leur introduction dans le sang. Une forte augmentation du virus dans le sang est caractéristique du stade de manifestations primaires, cette période tombe de la troisième à la sixième semaine après l'infection et est appelée "séroconversion". À ce stade, l’infection peut être détectée en laboratoire et cliniquement, elle ne se manifeste pas du tout ou bien elle se présente sous la forme d’une maladie du rhume avec une augmentation du nombre de ganglions lymphatiques.

Douze semaines après l’infection, des anticorps sont détectés chez presque tous les patients. Dans la dernière phase d'une maladie appelée SIDA, la quantité d'anticorps diminue.

Combien de temps après l'infection est détecté l'infection à VIH dépend du système de test utilisé dans un laboratoire particulier. Les systèmes de test combinés de quatrième génération détectent l’infection à VIH deux semaines après l’entrée du virus dans le sang. Et les systèmes de test de la première génération ont découvert le VIH seulement après 6 à 12 semaines.

Lors d'une analyse combinée, il est possible de détecter l'antigène p24 du VIH, qui est la capside du virus. Elle est déterminée dans le sang 1 à 4 semaines après l'infection, avant l'augmentation de la concentration d'anticorps dans le sang (avant la «séroconversion»). En outre, une étude combinée révèle des anticorps anti-VIH-1, VIH-2, disponibles pour le diagnostic deux à huit semaines après l’infection.

Avant la séroconversion, la p24 et les anticorps anti-VIH-1 et VIH-2 sont détectés dans le sang. Après la séroconversion, les anticorps se lient à l'antigène p24. Ainsi, p24 n'est pas détecté et les anticorps dirigés contre le VIH-1 et le VIH-2 sont détectés. Ensuite, p24 et les anticorps anti-VIH-1 et VIH-2 sont à nouveau détectés dans le sang. Lorsqu'une personne infectée par le VIH développe le sida, la production d'anticorps est violée, de sorte que les anticorps anti-VIH-1 et VIH-2 peuvent être absents.

Le diagnostic de l’infection à VIH se fait au stade de la planification de la grossesse et pendant l’observation actuelle d’une femme enceinte, car l’infection à VIH peut se transmettre de femme à foetus pendant la grossesse, pendant l’accouchement et pendant l’allaitement.

Indications pour le diagnostic du VIH

Sexe occasionnel.

Fièvre sans raisons objectives.

Ganglions lymphatiques enflés dans plusieurs zones anatomiques.

Préparation à l'étude

Le test de dépistage du VIH est effectué 3 à 4 semaines après le début de l’infection présumée. Si le résultat est négatif, l'analyse est répétée après trois et six mois.

Du dernier repas à la prise de sang, le délai devrait être supérieur à huit heures.

À la veille d'exclure du régime des aliments gras, ne prenez pas de boissons alcoolisées.

Pendant 1 heure avant de prendre le sang pour analyse ne peut pas fumer.

Il n'est pas recommandé de donner du sang immédiatement après une radiographie, une radiographie, une échographie ou une physiothérapie.

Le sang destiné aux recherches est prélevé le matin à jeun. Même le thé et le café sont exclus.

Il est permis de boire de l'eau pure.

20-30 minutes avant l'étude, il est recommandé au patient de se reposer physiquement et émotionnellement.

Matériel d'étude

Décoder les résultats du diagnostic du VIH

L'analyse est qualitative. Si aucun anticorps anti-VIH n'est détecté, la réponse est dite «négative».

Si des anticorps anti-VIH sont détectés, l'analyse est répétée avec une autre série de tests. Un résultat positif répété nécessite une étude d'immunoblot, le «gold standard» du diagnostic du VIH.

Norm: réponse négative.

1. La personne n'est pas infectée par le VIH.
2. La phase terminale de l'infection à VIH (SIDA).
3. Variante séronégative de l’infection à VIH (formation tardive d’anticorps anti-VIH).

Réponse positive.

1. Une personne est infectée par le VIH.
2. Le test n’est pas informatif chez les enfants de moins d’un an et demi nés de mères infectées par le VIH.
3. Résultat faussement positif en présence d'anticorps dans le sang au virus d'Epstein-Barr, principal complexe d'histocompatibilité, le facteur rhumatoïde.

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Qu'est-ce que l'antigène P24?

Le diagnostic clinique et de laboratoire de l’infection par le VIH comprend trois domaines:

1. Établir le fait de l'infection à VIH, le diagnostic de l'infection à VIH.
2. Détermination du stade de l'évolution clinique de la maladie et identification des maladies secondaires.
3. Pronostic de la progression de l'évolution clinique de la maladie, suivi en laboratoire de l'efficacité du traitement et des effets indésirables des antirétroviraux.

1. Établir l'infection à VIH, le diagnostic de l'infection à VIH

Pour déterminer l'infection par le VIH, les indicateurs spécifiques suivants sont utilisés: anticorps anti-VIH, antigènes du VIH, ARN du VIH et ADN du provirus. Les anticorps anti-VIH sont déterminés par dosage immunoenzymatique (ELISA) ou immunoblot, qui est essentiellement un type de test ELISA. Les antigènes du VIH (protéines) sont déterminés par ELISA. En utilisant des méthodes génétiques moléculaires de la réaction en chaîne de la polymérase (PNR) et de l'ADN b, l'ADN du VIH et l'ADN du provirus peuvent être déterminés. L'utilisation d'une méthode supplémentaire d'hybridation d'acides nucléiques avec des sondes d'ADN spécifiques permet de vérifier la spécificité des séquences d'ADN obtenues lors de la PCR. La sensibilité de la PCR est la détection de gènes viraux dans l'une des cinq mille cellules [27].

Lors de la primo-infection, la dynamique suivante des marqueurs du VIH dans le sang des personnes infectées est observée. Au cours du premier mois, il se produit une forte augmentation de la charge virale (teneur en ARN du VIH dans le plasma) du fait de l'activation du processus de réplication, puis, en raison de la dissémination du virus et de l'infection de masse des cellules cibles dans le sang et les ganglions lymphatiques, il est possible de déterminer l'ADN proviral. Le fait de détecter l’ADN du provirus intégré dans le génome de la cellule cible est d’une valeur diagnostique primaire.

La charge virale reflète l'intensité du processus de réplication dans les cellules infectées. Au cours de la période de primo-infection, le niveau de charge virale est différent lorsqu’il est infecté par différents sous-types de VIH, mais la dynamique de ses changements est à peu près la même. Ainsi, en cas d'infection par le sous-type B, par exemple, si, dans le premier mois après l'infection, la charge virale est de 700 copies / ml, le deuxième mois, le nombre diminue à 600, dans le troisième - à 100, dans le quatrième - à 50 copies / ml. Cette dynamique est observée dans le contexte d’une augmentation de la teneur en sang d’anticorps spécifiques contre le VIH. Le contenu en ADN proviral dans les cellules mononucléées du sang de personnes infectées par le VIH se caractérise par une relative constance au cours des six premiers mois et de légères fluctuations dans certains sous-types. Ainsi, les charges d'ARN et d'ADN ne sont pas identiques.

Au stade de l'incubation, pendant un certain temps, la formation d'anticorps spécifiques contre le VIH ne se produit pas en quantité suffisante pour déterminer les méthodes de laboratoire existantes. Avant l'enregistrement des anticorps, la protéine Nef dans le sang, qui réprime le processus de réplication, et la protéine structurale p24 sont observés dans le sang pendant une très courte période. L'antigène p24 peut être détecté dans le sang par la méthode d'analyse d'immunoenzyme dans les 1-2 péd après l'infection et être déterminé avant la 8ème semaine, puis son contenu diminue fortement. En outre, dans l'évolution clinique de l'infection par le VIH, une deuxième augmentation de la teneur en sang de la protéine p24 est notée. Il tombe sur la période de formation du SIDA. La disparition des protéines p24 essentielles dans le sang, non liées aux anticorps, et l'apparition d'anticorps spécifiques dirigés contre les protéines du VIH marquent l'apparition de la séroconversion (Fig. 9.6).

La virémie et l'antigénémie entraînent la formation d'anticorps spécifiques de la classe IgM (anti-p24, anti-gp41, anti-gp120, anti-gp160). Des anticorps libres des classes IgM et IgG dirigés contre la protéine p24 peuvent apparaître à partir de la 2ème semaine, leur contenu augmente pendant 2 à 4 semaines, pour atteindre un certain niveau, qui se maintient pendant des mois (IgM) et des années (IgG) (Fig. 9.7).

L'apparition d'une séroconversion complète, lorsqu'un niveau élevé d'anticorps IgG spécifiques dirigés contre les protéines structurelles du VIH p24, gp41, gp120, gp160 est détecté dans le sang périphérique, facilite grandement le diagnostic de l'infection par le VIH. Les anticorps anti-VIH apparaissent chez 90 à 95% des personnes infectées dans les 3 mois suivant l’infection, entre 5 et 9% - entre 3 et 6 mois à partir du moment de l’infection, et entre 0,5 et 1% plus tard.

Malgré le fait que les anticorps anti-VIH apparaissent à la dernière place, le principal indicateur de diagnostic de laboratoire à ce jour a été la détection d’anticorps spécifiques par ELISA et immunoblot.

Les données présentées dans les tableaux 9.2 [9.3] et 9.3 [montrent] démontrent clairement la haute sensibilité des systèmes de test immunoenzymatiques modernes pour la détection des anticorps anti-VIH, qui est supérieure à la sensibilité de l’immunotransfert. Dans certains cas, lorsqu’un résultat positif primaire est obtenu par ELISA, il n’est possible de le confirmer par immunoblot qu’après 2-3 semaines.

Lorsqu’on examine des patients infectés par le VIH (infectés par le VIH) à l’aide des systèmes de test par immunoblot de grandes sociétés du monde, des anticorps anti-gp160 et p24 / 25 sont détectés dans tous les cas. 9.4 [montrer]).

Des difficultés de détection des anticorps chez les patients infectés par le VIH peuvent survenir pendant les périodes de virémie et d’antigénémie massives, lorsque les anticorps spécifiques dans le sang sont associés à des particules virales et que le processus de réplication est en avance sur la production de nouveaux anticorps antiviraux. Cette situation peut survenir et disparaître au cours du processus d'infection [15].

Chez les patients dont le système immunitaire est initialement affaibli, les virémies et les antigénémies apparaissent plus tôt et restent élevées jusqu'à l’évolution de la maladie. Chez ces patients, la teneur en anticorps libres anti-VIH est faible, pour deux raisons: production insuffisante d'anticorps par les lymphocytes B et liaison des anticorps par les virions et les protéines solubles du VIH; par conséquent, pour déterminer l'infection, des systèmes de test avec une sensibilité accrue ou des méthodes d'analyse modifiées, permettant l'étape de libération des anticorps à partir de complexes immuns [7].

Le plus souvent, une diminution de la teneur en anticorps anti-VIH pour ces raisons se produit au stade terminal, lorsque les anticorps sériques anti-VIH dans le sérum peuvent ne pas être capturés par des méthodes de dosage immunoenzymatique ou par immunoblot (transfert Western). Outre l'apparition d'anticorps spécifiques anti-VIH, la réponse immunitaire au cours des quatre premiers mois est caractérisée par une diminution du contenu sanguin en CD4 + infecté et une augmentation du nombre de cellules CD8 +. En outre, le contenu des cellules portant les récepteurs CD4 et CD8 se stabilise et reste inchangé pendant un certain temps. L’augmentation du contenu en lymphocytes CD8 est une réaction protectrice, car La cytotoxicité dépendante des cellules est réalisée par les lymphocytes CD8 +, qui visent à détruire les cellules infectées par le VPH. Initialement, les lymphocytes cytotoxiques (CTL) répondent au virus de la protéine régulatrice Nef, qui joue un rôle important dans la réduction de la charge virale (ARN) dans le plasma d'une personne infectée par le VIH pendant les premiers mois. Ensuite, la réponse de la CTL et d’autres, y compris protéines structurelles du VIH 12 mois après l’infection, l’effet cytotoxique augmente considérablement.

Diagnostic de laboratoire de l'infection à VIH

Compte tenu de la dynamique susmentionnée des marqueurs spécifiques de l’infection à VIH dans la pratique, il est conseillé de respecter le diagnostic de laboratoire suivant chez l’adulte (Fig. 9.8-9.10).

Les diagrammes reflètent les trois étapes principales du diagnostic de laboratoire primaire de l’infection à VIH:

1. Dépistage.
2. Référence.
3. Expert

Le besoin de plusieurs étapes de diagnostic en laboratoire est principalement dû à des considérations économiques. Par exemple, le coût d’une recherche experte utilisant l’immunoempreinte avec des systèmes de test nationaux peut aller jusqu’à 40 USD, le dépistage (par ELISA) étant d’environ 0,2, soit un ratio de 1: 200.

Au premier stade (Fig. 9.8), les anticorps testés sont détectés avec un système de dosage immunoenzymatique pour la détection des anticorps dirigés contre les deux types de virus - VIH-1 et VIH-2.

Les fabricants des systèmes de test proposés utilisent des lysats viraux, des protéines recombinantes et des peptides synthétiques comme bases antigéniques. Chacun de ces porteurs de déterminants antigéniques du VIH a ses propres avantages et inconvénients. Par conséquent, lors du choix de systèmes de test de coût approximativement égal, il convient de préférer les ensembles avec la sensibilité la plus élevée (de préférence 100%). Parmi les systèmes de test à coût et sensibilité égaux, il est conseillé de s’appuyer sur ceux qui ont une spécificité maximale.

Sur la base du lysat du virus, les premiers systèmes de test pour le diagnostic en laboratoire de l'infection à VIH ont été créés. Dans les années 1980, ces systèmes de test étaient caractérisés par une sensibilité inférieure à 100% et une faible spécificité, se traduisant par un grand nombre (jusqu'à 60%) de résultats faussement positifs.

Lorsqu'un virion est formé dans une culture de lymphocytes, son enveloppe est créée à partir de la membrane externe et contient donc des antigènes du complexe d'histocompatibilité principal des classes I et II. Cette circonstance conduit à des réactions faussement positives dans le cas où il y aurait dans le sang des patients des anticorps anti-histo-compatibles allo-antigènes.

Plus tard, pour obtenir un virus, il a été proposé d’utiliser une culture de macrophages, dans laquelle les particules virales sont formées principalement au niveau intracellulaire en bourgeonnant non pas de la membrane cellulaire externe, mais à partir des membranes du réticulum endoplasmique. Cette technologie a réduit le nombre de résultats faussement positifs.

L'un des meilleurs parmi les caractéristiques les plus importantes - sensibilité et spécificité - est reconnu les systèmes de test immunoenzymatiques comprenant une combinaison de lysat viral purifié et de peptides synthétiques, qui sont les parties les plus significatives des protéines virales, ou protéines recombinantes, du point de vue de l'antigène.

La sensibilité du système de test dépend également des caractéristiques des autres composants du kit. Ainsi, les systèmes de test qui utilisent des conjugués qui reconnaissent des anticorps non seulement de la classe des IgG, mais également des IgM et des IgA, permettent de détecter la phase antérieure de séroconversion. Il semble prometteur d’utiliser des systèmes de test permettant de déterminer simultanément les anticorps antiviraux et l’antigène p24, ce qui permet de diagnostiquer l’infection à VIH en laboratoire encore plus tôt.

Le résultat positif principal doit être revérifié en réexaminant l'échantillon dans le même système de test, mais de préférence dans une autre série et un autre technicien de laboratoire. Si un résultat négatif est obtenu lors de la deuxième étude, celle-ci est réalisée pour la troisième fois.

Après confirmation d'un résultat positif, il est conseillé de prélever à nouveau le sang et de le tester pour rechercher les anticorps anti-VIH primaires. Des prélèvements de sang répétés permettent d'éviter l'erreur provoquée par l'inexactitude de l'étiquetage des éprouvettes et du remplissage des formulaires.

Séropositif au stade du dépistage, le sérum est envoyé pour des études de référence réalisées à l'aide de deux ou trois systèmes de test ELISA hautement spécifiques. Dans le cas de deux résultats positifs, une étude d’experts utilisant l’immunoblot est réalisée.

L'utilisation de systèmes de test d'immunoanalyse enzymatique de référence, qui peuvent être utilisés pour différencier des anticorps spécifiques du VIH-1 et du VIH-2, facilite les travaux ultérieurs et vous permet d'explorer immédiatement un échantillon positif au stade expert en utilisant un immunoblot approprié (VIH-1 ou VIH-2)..

L’expertise du laboratoire sur l’infection par le VIH repose uniquement sur le résultat positif de l’immunoempreinte (Western blot). Lors du diagnostic expert, il est nécessaire d'utiliser la nomenclature des gènes du VIH et des produits géniques proposée en 1990 par un groupe d'experts de l'OMS (Tableau 9.5 [show]).

La spécificité des bandes sur l'immunoblot doit être évaluée très soigneusement en utilisant les résultats des tests des sérums de contrôle (positifs et négatifs) menés en parallèle avec l'étude d'échantillons expérimentaux, ainsi qu'un échantillon d'immunoblot portant la désignation de protéines VIH (attaché par le fabricant au système de test). L'interprétation des résultats obtenus doit être effectuée conformément aux instructions jointes au système de test. En règle générale, le critère de positivité est la présence obligatoire d'anticorps dirigés contre deux protéines (précurseur, externe ou transmembranaire), codées par le gène env, et la présence éventuelle d'anticorps dirigés contre les produits de deux autres gènes structurels du VIH - gag et pol (tableau 9.6 [voir]).

En cas d'obtention d'un résultat douteux, il est nécessaire d'utiliser la liste de recommandations pour une clarification finale des résultats d'immunoempreinte (Tableau 9.7 [show]).

Selon les recommandations du Centre scientifique et méthodologique russe de prévention et de contrôle du sida, un résultat positif est considéré s'il existe des anticorps dirigés contre au moins une des protéines gp41, gp120, gp160 en combinaison avec des anticorps dirigés contre d'autres protéines spécifiques du VIH-1 ou sans eux [10]. Ces recommandations sont formulées sur la base de l’expérience acquise avec les sérums d’enfants de foyers nosocomiaux, qui ont souvent identifié des anticorps contre une seule des protéines de l’enveloppe du virus.

La partie principale des patients initialement examinés séropositifs en ELISA fait référence à la phase d'adénopathie généralisée persistante (PHL) ou à la phase asymptomatique. Par conséquent, sur l’immunoblot (bande de nitrocellulose sur laquelle sont immobilisées les protéines du VIH), la combinaison d’anticorps anti-VIH-1 suivante est habituellement déterminée: anticorps des protéines d’enveloppe gp160, gp120 et gp41, codées par le gène env, en combinaison avec des anticorps dirigés contre les protéines centrales p24 (protéine nucléocapside codée par le gène gag) et p31 / 34 (endonucléase codée par le gène pol).

Des réactions positives uniquement avec les protéines gag et / ou pol peuvent survenir dans le cas d'une phase précoce de séroconversion et indiquer également une infection provoquée par le VIH-2 ou une réaction non spécifique.

En cas d'obtention d'un résultat douteux, il est possible d'utiliser différentes techniques méthodologiques permettant de clarifier le fait de l'infection par le VIH

En fonction des capacités techniques (disponibilité des kits de diagnostic et des réactifs, équipement avec équipement spécial et formation du personnel), le laboratoire expert effectue des études de diagnostic supplémentaires (Fig.10.10).

Dans certains cas, il est conseillé d'utiliser des méthodes de génétique moléculaire pour déterminer les séquences génétiques du VIH dans le sérum, les lymphocytes sanguins ou les ganglions lymphatiques ponctués. Le test de la spécificité des séquences d'ADN obtenues par PCR peut être effectué par hybridation d'acides nucléiques avec des sondes d'ADN spécifiques.

Les méthodes de radioimmunoprécipitation (RIP) et d'immunofluorescence indirecte (IFL) peuvent également être utilisées pour la vérification finale des sérums avec des résultats douteux en immunoblot [14].

La détection de l'ARN du VIH dans le plasma par une méthode qualitative ou quantitative n'est pas importante pour le diagnostic de l'infection par le VIH. Un tel résultat doit être confirmé par des méthodes standard, telles que l’immunoempreinte, 2 à 4 mois après la réponse douteuse ou négative initiale.

L'isolement du VIH dans la culture cellulaire est la vérité ultime. Cependant, la méthode est compliquée, coûteuse et n’est réalisée que dans des laboratoires de recherche spécialement équipés.

Le contenu des cellules CD4 + dans le sang est un indicateur non spécifique. Toutefois, dans les cas controversés (ELISA "+", immunoblot "-", présence de signes cliniques d'infection par le VIH / SIDA), il peut être utilisé comme guide pour la prise de décision d'un expert. Si le laboratoire est capable d'effectuer uniquement un immunoblot, vous devez suivre les recommandations du tableau. 9.7 et dans la fig. 9.9.

Les personnes dont l’expertise du sérum a donné des résultats douteux (indéterminés), à l’exception de la détection d’anticorps dirigés contre p17 (VIH-1) ou p16 (VIH-2), doivent être retestées pendant 6 mois (après 3 mois). Dans le cas d’une véritable infection à VIH, après 3 à 6 mois, une tendance "positive" est observée dans le spectre des anticorps - la formation supplémentaire d’anticorps dirigés contre d’autres protéines du virus. Une fausse réaction se caractérise par la persistance d'une image douteuse d'immuno-blotting ou par la disparition de bandes suspectes. Si, après la période spécifiée, les résultats d'un immunoblot répété sont négatifs ou restent douteux, alors en l'absence de facteurs de risque, de symptômes cliniques ou d'autres facteurs associés à l'infection par le VIH, la personne peut être considérée séronégative pour les anticorps anti-VIH-1 et VIH-2.

De faux résultats positifs dus au contenu sanguin des patients en anticorps anti-histocompatibilité, les allo-antigènes faisant partie de l'enveloppe du VIH se manifestent sur l'immunoblot sous forme de bandes aux niveaux de gp41 et de gp31. Les causes d'autres réactions non spécifiques (par exemple, p24, que l'on retrouve souvent chez les individus présentant des processus auto-immuns) n'ont pas encore été clarifiées.

L’amélioration de la technologie de production des systèmes de test immunofermentaires a permis d’obtenir une sensibilité élevée - jusqu’à 99,99%, alors que la sensibilité de la méthode par immunoblot est de 97%. Par conséquent, un résultat négatif en immunoblot avec des résultats positifs en ELISA peut indiquer une période initiale de séroconversion, caractérisée par un faible niveau d'anticorps spécifiques. Par conséquent, il est nécessaire de répéter l’étude après 1,5 à 2 mois, c’est-à-dire le temps nécessaire pour effectuer la séroconversion, afin d’obtenir dans le sang une concentration d’anticorps spécifiques suffisante pour être détectée par immunoblot.

Un résultat positif (résultats) de l’étude au stade de référence ou seulement de dépistage du diagnostic de laboratoire d’infection par le VIH, c’est-à-dire un résultat positif pour tout système de test immunoenzymatique, qui n’a pas été confirmé par des méthodes expertes, est interprété comme la présence d’anticorps à réponse croisée dans le sang. Par réaction croisée, on entend la liaison d'anticorps de sites non spécifiques sur des protéines ou des peptides du VIH utilisés comme base antigénique dans le système de test dans lequel un résultat positif est obtenu.

En l'absence d'immunodéficience et de signes cliniques d'infection par le VIH, ces personnes sont considérées séronégatives pour les anticorps anti-VIH et doivent être retirées du registre.

Le diagnostic final d’infection à VIH n’est établi que sur la base de toutes les données cliniques, épidémiologiques et de laboratoire. Seul le médecin traitant a le droit d'informer le patient du diagnostic d'infection par le VIH.

La méthode principale de confirmation du diagnostic de laboratoire (expert) de l’infection par le VIH est l’immunoempreinte. Cependant, étant donné sa sensibilité plus faible par rapport à la méthode ELISA, un certain nombre de chercheurs ont suggéré d’utiliser une combinaison de plusieurs systèmes de test pour la détermination finale de la présence d’anticorps spécifiques contre le VIH. Par exemple, G. van der Groen et al. [30] ont proposé une méthode alternative d'immunoempreinte pour vérifier les résultats positifs de la phase de dépistage du diagnostic en laboratoire de l'infection par le VIH. Il consiste à étudier le matériel en parallèle dans trois systèmes de test basés sur diverses méthodes de détection d’anticorps spécifiques du VIH (plusieurs options ELISA, réaction d’agglutination) en utilisant des antigènes de nature différente. Les auteurs ont pu sélectionner de telles combinaisons de systèmes de test, dont l'utilisation confère une sensibilité et une spécificité de 100% par rapport aux résultats obtenus en immunoblot.

Le coût peu élevé de cette méthode de diagnostic expert est un avantage certain, mais le manque d’informations sur les protéines du virus qui contiennent spécifiquement des anticorps dans le sang du patient ne permet pas d’évaluer la spécificité de la réaction dans chaque cas individuel, ni de suivre les modifications du spectre des anticorps à un stade précoce de la séroconversion.

Le diagnostic de laboratoire de l'infection à VIH chez les enfants nés de mères infectées par le VIH présente ses propres caractéristiques [24]. À partir du moment de la naissance pendant une longue période (jusqu’à 15 mois), les anticorps maternels anti-VIH peuvent circuler dans le sang de ces enfants. Seules les immunoglobulines de la classe IgG pénètrent à travers la barrière placentaire, la détection de classes d'IgM et d'IgA spécifiques de HPM spécifiques du HPV chez l'enfant permet donc de confirmer l'infection, mais un résultat négatif ne peut indiquer l'absence de VIH.

Chez les enfants de moins de 1 mois, la réplication du VPH n'est pas encore disponible et la PCR est la seule méthode de vérification. La détermination de l'antigène p24 chez les enfants de plus d'un mois est également une méthode de confirmation.

Le manque d'anticorps anti-VIH chez les nouveau-nés ne signifie pas que le virus n'a pas pénétré la barrière placentaire. En tout état de cause, les enfants de mères infectées par le VIH sont soumis à un examen de laboratoire et à un diagnostic ainsi qu'à une observation pendant 36 mois à compter de la naissance [10].

Les résultats des tests de laboratoire sur les marqueurs de l’infection à VIH nécessitent une interprétation attentive et ne doivent être pris en compte qu’avec les données d’enquêtes épidémiologiques et cliniques. Par ailleurs, il convient de noter que, malgré la grande sensibilité des méthodes modernes, les résultats négatifs de la recherche ne peuvent totalement exclure la présence d’une infection par le VIH. Par conséquent, un résultat négatif de l'étude, par exemple en utilisant la méthode d'immunoblot, ne peut être formulé que par l'absence d'anticorps spécifiques contre le VIH-1 et le VIH-2.

Diagnostic de l'infection à VIH chez les patients séronégatifs

La qualité des systèmes de test utilisés dans le diagnostic en laboratoire de l'infection par le VIH s'améliore chaque année et leur sensibilité augmente. Cependant, la grande variabilité du VIH peut entraîner l’apparition de nouveaux types, auxquels les systèmes de test existants ne peuvent pas reconnaître les anticorps. De plus, il existe des cas de réponse humorale atypique du système immunitaire de l'hôte à un virus. Ainsi, L. Montagnier en 1996 a fait état de deux patients atteints du sida qui n'avaient pas détecté d'anticorps dans le sang au cours des quelques années précédentes. Le diagnostic a été établi sur la base de données cliniques et n'a été confirmé en laboratoire qu'avec la libération de HPV-1 en culture cellulaire. Dans de tels cas, il est nécessaire d’appliquer les recommandations de l’OMS selon lesquelles le diagnostic clinique de l’infection à VIH chez l’adulte et l’enfant est possible en présence de l’une des 12 maladies indicateurs du SIDA:

1. candidose de l'œsophage, de la trachée, des bronches, des poumons;
2. cryptococcose extrapulmonaire;
3. cryptosporidiose avec diarrhée depuis plus d'un mois;
4. lésion cytomégalovirale de tout organe (sauf et en plus du foie, de la rate et des ganglions lymphatiques chez un patient âgé de plus d'un mois):
5. infection causée par le virus de l'herpès simplex persistant plus d'un mois chez un patient âgé de plus d'un mois;
6. lymphome cérébral chez un patient de moins de 60 ans;
7. pneumonie interstitielle lymphocytaire chez un enfant de moins de 13 ans;
8. anti-infection causée par une bactérie du groupe Micobacterium avium intracellulare ou M. Kansassii;
9. Pneumonie;
10. leuco-encéphalopathie multifocale progressive;
11. Toxoplasmose du système nerveux central chez les patients âgés de plus d'un mois.

La présence de l'une de ces maladies vous permet de diagnostiquer une infection par le VIH en l'absence de possibilité d'effectuer des tests sanguins de laboratoire pour détecter la présence d'anticorps anti-VIH ou même en cas de résultat séronégatif.

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Source: Diagnostics, programmes et algorithmes de laboratoire médical. Ed. prof. AI Karpischenko, Saint-Pétersbourg, Intermedika, 2001