Diagnostic du virus de l'hépatite C

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Le virus de l'hépatite C (VHC) est un virus de la famille des Flaviviridae contenant de l'ARN. Cette infection est capable de se multiplier dans les cellules sanguines (monocytes, neutrophiles, lymphocytes B et macrophages) et touche également les cellules du foie lui-même - les hépatocytes. En raison du degré élevé d'activité mutationnelle, ce type d'hépatite est capable d'éviter l'exposition au système immunitaire humain.

Il existe 11 génotypes et la masse de sous-types d'un tel virus, qui diffèrent par le degré d'atteinte hépatique et ont une incidence sur la durée du traitement de l'hépatite. Une telle variété d'hépatite C nécessite différentes méthodes de traitement antiviral. Par exemple, les génotypes de l'hépatite 1 et 4 doivent être traités pendant 48 semaines et pour un traitement contre les virus des deuxième et troisième types, cela peut ne prendre que 24 semaines.

Après que le test rapide de dépistage de l'hépatite C ait donné un résultat positif, une analyse PCR est effectuée pour détecter l'ARN du virus dans des échantillons de sang.

Diagnostic PCR

La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) est une technique expérimentale de détection des virus. Une telle analyse de l'hépatite C peut augmenter de manière significative la concentration de certains fragments d'ADN ou d'ARN du virus dans les échantillons transférés. Cela permet de les reconnaître et même de compter le nombre.

Ce test de l'hépatite C est effectué selon la procédure suivante:

  1. Un échantillon de sang (matériel génétique) pouvant contenir le gène de l'hépatite souhaité est inséré dans un tube à essai. Des substances spéciales, des amorces, sont placées dessus. Ce sont des segments courts du gène souhaité, synthétisés chimiquement. De l'ADN ou de l'ARN polymérase est également ajouté à ce vaisseau, capable de former des chaînes d'acide nucléique complètement identiques à l'original. Une sélection de nucléotides libres, qui sont des matériaux de construction spéciaux pour l'ADN et l'ARN, est ajoutée à la composition obtenue et l'un d'eux contient de minuscules particules de phosphore radioactif.
  2. Le mélange résultant est initialement chauffé à 95 degrés, de sorte que les deux hélices d’ADN entrelacées à l’état normal sont déroulées.
  3. Pour poursuivre l'analyse, le médicament est refroidi et les amorces se fixent à la section souhaitée du génome du virus de l'hépatite, empêchant ainsi l'ADN de se former en une double hélice. Lorsque le mélange refroidit, la polymérase recherche des chaînes uniques de nucléotides. Lors de la fixation de cette enzyme, celle-ci glisse le long de la chaîne d'ADN (en bloc le long de la corde) et, sur la double hélice, ne peut pas «fonctionner», le mélange est chauffé à cette fin.
  4. Pour prolonger l'analyse, un réchauffement est effectué, ce qui conduit à nouveau à la séparation des chaînes de nucléotides. Lorsque de tels cycles de PCR sont effectués dans l'échantillon, le nombre de gènes d'hépatite souhaités augmente dans une proportion géométrique et les matériaux génétiques restants ne sont produits (formés) que de manière linéaire.
  5. Pour compléter l'étude, la solution est nettoyée des particules nucléotidiques résiduelles. Ils sont séparés par électrophorèse, avec la séparation par les paramètres du poids moléculaire des chaînes d'ADN. De tels tests d'hépatite C utilisant la PCR vous permettent de déterminer si les gènes viraux souhaités sont présents dans l'échantillon ou non.

L'avantage de ce test est le seuil très élevé de la réaction PCR. Idéalement, une telle technique de diagnostic ne requiert qu'un génome du virus pour l'ensemble de l'échantillon.

De plus, cette PCR est complètement spécifique. Dans chacun des gènes, il existe une séquence unique de nucléotides qui, comme une empreinte digitale, ne peut être répétée nulle part. Pour cette analyse sur l'hépatite C, les amorces sont synthétisées de manière à ce qu'elles correspondent absolument aux régions uniques des gènes recherchés, qu'aucune autre séquence ne possède.

Cette technique vous permet également d’analyser l’hépatite C et de les déterminer, ce qui aide à établir le diagnostic final.

Une telle analyse de laboratoire fournit des informations autres que la présence ou l'absence d'ARN du virus de l'hépatite C ou d'un autre type d'échantillons de sang. En déterminant le paramètre du rayonnement radioactif, il est possible d'identifier quelle quantité du matériel génétique souhaité se trouvait à l'origine dans l'échantillon étudié. Cela vous permet de déterminer le paramètre de la charge virale appelée concentration de particules d'ARN de l'hépatite dans un certain volume.

Analyse qualitative de la PCR

Cette analyse permet de déterminer la présence du virus de l'hépatite B dans des échantillons de sang. Il devrait être effectué pour toutes les personnes à qui on a trouvé des anticorps anti-hépatite.

À la suite de telles recherches, il ne peut y avoir que deux valeurs:

  • "Détecté." Un tel résultat de test positif est interprété comme suit: dans l'échantillon analysé, des fragments de matériel biologique de l'ARN du virus de l'hépatite ont été trouvés. Il s’ensuit que le patient était infecté par ce virus. Cela peut indiquer que l'hépatite pathogène se multiplie dans le corps et infecte de nouvelles cellules, détruisant le foie.
  • "Non détecté." Ce résultat indique que dans un échantillon analysé dans ce laboratoire, aucun fragment d’ARN spécifique du virus de l’hépatite C n’a été détecté, mais il est également possible que la concentration de l’ARN du virus pathogène dans l’échantillon de test soit telle que le test n’ait pas permis de le détecter.. Dans de tels cas, il est dit que le niveau de concentration est inférieur au seuil de sensibilité du test.

Un tel test peut également être faux positif ou faux négatif, en raison de la contamination du biomatériau ou de la présence dans les échantillons de substances spécifiques qui réagissent avec les composants chimiques nécessaires à l'analyse.

Il convient de souligner que dans les phases aiguës de l'hépatite C, une étude qualitative utilisant la méthode PCR permet de détecter son ARN après 1-2 semaines à partir du moment de l'infection de l'organisme. Cela signifie que la maladie peut être détectée bien avant l'apparition de ses symptômes externes ou l'apparition d'anticorps anti-hépatite dans le corps.

Le prélèvement sanguin (dans une veine) est effectué de préférence sur un estomac vide.

Analyse quantitative par PCR

À l'aide de cette analyse, déterminez le niveau de concentration du virus de l'hépatite chez le patient (charge virale). Un tel test doit être passé pour estimer la quantité d’ARN du virus par unité d’un certain volume.

Les tests de déchiffrement de l’hépatite C, effectués selon cette méthode, peuvent avoir les résultats suivants:

  • Indicateur quantitatif (en chiffres)

La concentration en virus (quantité) est donnée en termes numériques. À cette fin, différentes unités de mesure sont utilisées: soit UI / ml (unité internationale par millilitre), soit copies / ml (nombre de copies de l’ARN du virus par millilitre). En moyenne, 1 UI / ml correspond à 4 copies / ml, car les systèmes de test différents ont des facteurs de conversion différents pour ces unités.

Les valeurs de faible charge virale sont considérées comme inférieures à 400 000 UI / ml, et 8 000 000 UI / ml sont élevées.

Une telle évaluation quantitative permet de déterminer le degré de contagiosité de la maladie ("contagiosité") du patient. Plus cet indicateur d'analyse est élevé, plus la probabilité de transmission du pathogène à d'autres personnes (par contact sexuel ou verticalement) est élevée.

Ce verdict signifie que la méthode quantitative n'a pas permis de détecter l'ARN de l'hépatite, mais que le virus lui-même est présent dans le corps, mais à de très faibles concentrations. Ceci a été confirmé par une analyse qualitative supplémentaire de la PCR et, par son résultat positif, témoigne de la présence de l'hépatite.

  • Résultat non détecté

    Cette interprétation positive de l'analyse suggère que le test quantitatif lui-même dans un échantillon de sang ne pourrait pas détecter de particules d'ARN spécifiques du virus de l'hépatite C.

  • Une analyse quantitative de la PCR réalisée à différentes périodes de traitement antiviral (1ère, 4ème, 12ème et 24ème semaines) permet de juger de l’efficacité du traitement et d’apporter les modifications nécessaires.

    Spécificité d'analyse

    Ce test doit être passé pour déterminer les différents génotypes de l'hépatite C. Il existe actuellement 11 génotypes de cet agent pathogène et de nombreux sous-types. Dans notre pays, les génotypes de l'hépatite C des 1ère, 2ème et 3ème espèces sont communs. En laboratoire, ils peuvent identifier différents sous-types de ces espèces: 1a, 1b, 2a, 2b ou 3, 4, 5, 6 génotypes avec diverses modifications des sous-types. Pour toutes ces hépatites, la spécificité de la détermination est de 100%.

    La spécification de la modification du génotype permet de sélectionner le traitement approprié. La présence d'un type particulier de génotype chez un patient n'indique pas que la maladie est plus facile ou plus complexe, il ne s'agit que de types du virus de l'hépatite et rien de plus.

    Dans les cas où le génotype du virus ne peut pas être isolé en laboratoire, le résultat peut être donné: «Non typé. Étaient des génotypes étudiés: tel ou tel »(par exemple, 1a, 2c, 3av). Ce décodage suggère qu’il n’existait dans ce laboratoire aucun réactif approprié permettant de déterminer le génotype du virus de l’hépatite. L'étude a été testée pour les virus, les données de la liste, mais leur conformité avec les échantillons d'ARN n'a pas été identifiée.

    Pour établir un diagnostic final, un seul type d'analyse est insuffisant. Chacun des tests peut donner un résultat faussement positif. Pour déterminer avec précision le type d'hépatite et l'étendue des dommages causés par cette infection du corps, effectuez une étude approfondie. Il effectue une biopsie du foie et teste ses enzymes: ALT, ASAT, ainsi que la phosphatase alcaline et la LDH. Un test de bilirubine et une analyse de l'indice de prothrombine peuvent également être effectués.

    Seul un ensemble de tests de ce type et d’analyses de laboratoire, assorti d’une analyse générale de l’état du patient, permettra de déterminer la présence d’une hépatite dans le corps, sa forme ainsi que sa gravité. Sur cette base, le médecin peut déterminer la poursuite du traitement et établir un pronostic éventuel pour le patient.

    Hépatite à arn avec quantifier la norme

    Le virus de l'hépatite C est capable de se multiplier dans les cellules sanguines et de provoquer des maladies lymphoprolifératives. Grâce aux multiples mutations, la défense immunitaire du corps s'affaiblit et des génotypes et sous-types du virus apparaissent. Avec la détermination correcte et opportune d'un type particulier, l'efficacité du traitement antiviral dépend. Le risque d'infection est que la maladie est asymptomatique. Seulement 15% des 100 personnes peuvent avoir des nausées et des vomissements, perdre du poids et de la fièvre

    Définition du virus de l'hépatite C

    Le taux standard d'hépatite C est compris entre 40 et 60 nm, avec pour la plupart des lipides, une atteinte hépatique résultant d'une évolution aiguë ou chronique de la maladie. L'hépatite C, à savoir le virus à ARN de la famille des Togaviridae, est extrêmement persistante, transmise par transfusion sanguine ou par l'utilisation d'objets non stériles, de produits d'hygiène inappropriés, etc. L'analyse quantitative permet d'analyser le sang et d'identifier la structure génétique du virus infecté.

    Afin de déterminer l'hépatite C et ses génotypes, une analyse quantitative est effectuée. Selon l'analyseur, il est possible de déterminer trois niveaux d'incidence du virus à ARN.

    Les sous-types peuvent produire diverses modifications. La spécificité et la sensibilité de l'analyseur doivent donc être de cent pour cent. En plus de détecter la maladie chez un patient, il est nécessaire de déterminer son degré de gravité. Certains laboratoires ne disposent pas de toutes les données sur le décodage du virus à ARN, une possibilité de réponse faussement positive est possible.

    La recherche sur l'hépatite C sera plus précise lors de l'étude de ces indicateurs:

    AlAT, AsAT; Bouclier alcalin; LDH.

    Attirant l'attention sur les résultats de ces indicateurs et l'état général du corps, un résultat est affiché, montrant le degré d'infection, la forme et le nombre de cellules de l'hépatite C dans le sang. Cela contribue au processus de guérison et à l'efficacité du traitement antiviral.

    Types d'analyse pour l'hépatite C

    Une réaction en chaîne multidimensionnelle (PCR) donne une idée du nombre de particules d'ADN dans les analyses de patients, et identifiera correctement l'agent infectieux.

    Des agents causant des maladies infectieuses peuvent apparaître. Une infection du foie, telle que l'hépatite C, peut être traitée à notre époque, lorsqu'elle est détectée à temps. Si un virus est suspecté, une analyse PCR est effectuée.

    Étant donné que les symptômes du virus peuvent être masqués pendant longtemps, une personne peut ne pas ressentir l’apparition de la maladie. Mais avec un examen approfondi dans 60 à 70% des cas, l’hépatite C est détectée. La première analyse, dans laquelle il s’agit du test ELISA, est suivie du diagnostic PCR. L'analyse est effectuée à certaines périodes pour déterminer le stade de la maladie et prescrire le traitement approprié. Pour s'en passer, sans appliquer toutes ces procédures, il est possible de se faire vacciner contre l'hépatite.

    L'analyse, y compris le diagnostic PCR, fournit une image de la maladie et de son degré d'activité au cours des différentes périodes de développement.

    Il existe d’abord une analyse qualitative qui ne fait que confirmer l’hypothèse relative à l’infection, puis une analyse quantitative déterminant la charge hépatique. L’option idéale serait un résultat négatif pour l’hépatite C dans le matériel génétique du patient.

    Analyse qualitative et quantitative

    Il existe des analyses qualitatives et quantitatives. L’essence de la première est qu’elle détermine la présence d’une infection dans le sang. Et cela signifie que le virus infecte les cellules hépatiques saines. Lorsque des anticorps anti-hépatite C sont détectés chez un patient, un test qualitatif est immédiatement effectué. Le taux que le résultat devrait donner est «non détecté dans le sang». Lors de la détermination de la concentration d'un virus, il est nécessaire de connaître la sensibilité du système de diagnostic, car les personnes sous traitement antiviral peuvent effectuer l'analyse. Le degré de sensibilité de l'analyseur ne doit pas être inférieur à 50 UI / ml.

    Lorsqu'un virus est détecté, une analyse quantitative est effectuée, c'est-à-dire la charge virale, qui détermine la concentration du virus dans le sang et la gravité de la maladie.

    L'ARN viral, qui se trouve dans une certaine quantité de sang, est défini comme la norme au taux de 1 ml pour 1 centimètre cube. Après avoir quantifié la charge virale, il est possible de juger du degré d’infection dans un environnement non encore infecté. Dès que la concentration d'hépatite C augmente dans le sang, il est nécessaire de l'isoler de l'environnement.

    Dans les premières étapes, il est important de détecter le degré de concentration de l'hépatite afin de déterminer le rythme de la rééducation. Si le taux d'hépatite C est dépassé de plus de 800 000 UI / ml, il est considéré comme trop élevé, avec une augmentation pouvant aller jusqu'à un million - critique. Si la plage quantitative est inférieure à 400 000 UI / ml, il est considéré que l'infection des personnes autour sera moins probable. Cette figure montre clairement que l'hépatite C est présente dans le corps à très faible dose. L’analyse n’ayant pas permis de déterminer la valeur quantitative des particules d’ARN du virus, elle a été renommée plusieurs fois pour un diagnostic précis.

    Résultats de l'analyse quantitative

    La tâche de déterminer la quantité de charge virale dans le sang d'un patient consiste à identifier le degré d'infection chez les autres.

    Test de l'hépatite C

    vous permet d'évaluer l'efficacité du traitement antiviral, le degré de contagiosité et le nombre de tissus infectés.

    Il est important de prévenir la progression de la maladie, de prendre des mesures préventives à temps, de prescrire le traitement approprié sur la base du diagnostic PCR. Si, selon les résultats, le niveau de charge virale est inférieur à 400 000 UI / ml, la concentration peut alors être minimale, ce qui indique un rétablissement complet possible. La norme pour un résultat positif est l'absence d'infection.

    Les résultats de l'analyse PCR:

    Une réponse positive signifie qu'il y a une infection dans le matériel biologique. L'analyse permet de déterminer le nombre exact de cellules infectées. La réponse négative indique l'absence d'infection, qui est soigneusement recherchée dans le corps.

    La méthode de détermination quantitative de l'hépatite C est précise et informative. Elle est réalisée sur un équipement extrêmement sensible. Le déchiffrement des résultats de l'analyse vous permet de savoir si l'infection et ses spécificités, de voir le plus petit nombre de cellules infectées sur des analyseurs très sensibles.

    L'analyse donne rarement des résultats faussement positifs ou opposés, ce qui se produit le plus souvent dans les études de dosage immunologique.

    Récemment, la recherche d'une «analyse quantitative de l'hépatite avec décodage» apparaît de plus en plus dans les moteurs de recherche de ressources Internet.

    En effet, le virus de l'hépatite est répandu et dangereux, la maladie affecte le foie. Son nom vient du lat. L'hépatite est une inflammation du foie. L'infection se produit par le sang ou sexuellement et, le plus souvent, les adultes ont entre 25 et 50 ans.

    Il existe plusieurs types de cette maladie. L'hépatite C n'a pas une sévère gravité, mais dans 40 à 70% des cas, elle devient chronique et peut provoquer une cirrhose et un cancer. Cette maladie nécessite un diagnostic précis et une interprétation des données pour lesquelles des techniques ont été développées. L'un d'eux est l'analyse de l'ARN du VHC par PCR.

    Analyse d'ARN d'ARN du VHC par PCR

    L'ARN (acide ribonucléique) est un type de macromolécule, l'un des composants d'une cellule vivante. L'ARN est responsable du codage de l'information génétique. Le virus de l'hépatite C contient une molécule d'ARN et a tendance à muter. 6 de ses sous-types sont connus, ainsi que de nombreux sous-types.

    La maladie dans son stade chronique conduit à une fibrose du foie - les tissus conjonctifs se développent, la structure de l'organe est progressivement perturbée. La fibrose peut être traitée rapidement, car le foie n'a pas encore subi de processus destructif. Contrairement à la cirrhose, une maladie hépatique irréversible grave dans laquelle une fibrose peut se développer sans prendre les mesures nécessaires à temps.

    Une personne soupçonnée d’avoir un virus de l’hépatite B est déterminée par ses anticorps. S'ils ne le sont pas, la maladie est exclue. S'ils sont disponibles, ils ont recours à la méthode de la PCR (réaction en chaîne de la polymérase). En biologie moléculaire, il est expérimental mais occupe une place prépondérante parmi les méthodes de diagnostic des maladies infectieuses. Avec elle, vous pouvez augmenter de manière significative la concentration de fragments moléculaires dans l’échantillon. 10 jours après l'infection, il est déjà possible de déterminer l'ARN dans le sang.

    Cette méthode est la seule à pouvoir détecter la maladie à ses débuts. À d'autres égards (par exemple, par des tests sanguins biochimiques), cela ne peut pas être fait, car le foie n'est pas encore affecté.

    Les tests d'hépatite C avec décodage (PCR) sont un indicateur fiable de la présence du virus dans le sang humain.

    La méthode a été découverte en 1993 par le biochimiste Kerry Mullis, pour lequel il a remporté le prix Nobel. La PCR était une percée en médecine et en science, car elle permettait d'identifier rapidement et avec précision les infections dans le sang et dans d'autres matériaux biologiques humains. En d'autres termes, la méthode a accéléré le développement du diagnostic des maladies infectieuses.

    L'analyse d'ARN d'ARN du VHC par PCR est efficace pour les raisons suivantes:

    a une bonne sensibilité - même une petite quantité de virus dans le sang est détectée; le virus lui-même est déterminé, pas les sous-produits qu'il crée; Le type d'agent pathogène est déterminé.

    Différences dans l'analyse quantitative de l'ARN du VHC à partir de l'analyse qualitative

    La méthode PCR comprend deux moyens principaux d’étudier le matériel biologique pour la recherche du virus de l’hépatite C:

    Ces études ont différentes tâches.

    Une analyse qualitative de l'hépatite avec décodage confirme la présence du virus après la découverte d'anticorps dans le sang. Si l'étude a donné un résultat positif, la maladie est détectée. En d'autres termes, une personne est infectée. Si un résultat négatif est obtenu, cela signifie que la personne n'est pas infectée ou que la concentration du virus est trop petite. Cette concentration n'est pas détectée de cette façon.

    En outre, le tableau clinique de la maladie repose sur les marqueurs de l'hépatite C et l'interprétation de l'analyse. Les principaux marqueurs sont les immunoglobulines (anticorps) M et G. Leur présence dans le sang du patient indique un processus non caractéristique pour un organisme en bonne santé. Sur la base de la présence de ces anticorps, le patient établit généralement le diagnostic principal.

    Une analyse quantitative est prescrite pour la détection primaire des anticorps et, si nécessaire, le traitement.

    En outre, une analyse quantitative de l'hépatite C est prescrite pour la détection de l'hépatite mixte (infection par plusieurs virus à la fois).

    Une analyse quantitative avec décodage est réalisée afin de:

    clarification du diagnostic final; établir des prévisions sur l'évolution de la maladie et son traitement - extension, réduction du traitement ou changement de tactique; suivi thérapeutique.

    L'indicateur international UI / ml signifie que la quantité d'ARN dans 1 ml de sang est examinée. Un indicateur quantitatif élevé indique une probabilité accrue d'infecter une autre personne.

    Pour que les résultats soient vrais, vous devez suivre le régime établi avant de donner du sang:

    venez au laboratoire l'estomac vide, la dernière fois que vous pouvez manger 8 heures avant l'intervention; deux jours avant l'étude, les aliments gras et frits sont interdits; échographie, massage, physiothérapie avant l'étude ne peut être effectuée; les médicaments sont interdits pour la journée; s'il est impossible d'annuler la consommation de certains médicaments, cela est signalé avant le prélèvement de sang; avant la procédure, il est recommandé de réduire autant que possible les charges physiques et nerveuses.

    Le respect de ces exigences sera la clé pour obtenir les résultats corrects d’une analyse quantitative de l’hépatite C.

    Interprétation de l'analyse quantitative

    Après avoir obtenu des indicateurs d'analyse quantitative, il est nécessaire de déchiffrer les résultats des tests de dépistage de l'hépatite C. Les résultats sont calculés à la fois en unités UI / ml et en copies par ml. Pour obtenir les résultats, convertis en copies, utilisez plusieurs techniques.

    Moniteur HCV (facteur de conversion en ME - 2,7); LCX HCV RNA (facteur de conversion en ME - 3,8).

    Tableau Interprétation de l'analyse quantitative de l'ARN du VHC par PCR.

    Hépatite à arn

    «L’identification des gènes du virus de l’hépatite C (HVC) dans le sang du patient est la deuxième étape du diagnostic en laboratoire de cette pathologie infectieuse. Pour détecter un agent pathogène dépourvu de membrane cellulaire et, par conséquent, d'antigènes de surface, la méthode de la réaction en chaîne de la polymérase est utilisée. En utilisant cette méthode, la molécule est directement déterminée, dans laquelle toute son information génétique est codée - ARN.

    L'ARN - L'acide ribonucléique, avec l'ADN, fait partie des cellules de tous les organismes vivants. Le virus de l'hépatite C contient une molécule d'ARN et peut le transformer.

    Le test du génome HVC est généralement prescrit après un test sanguin biochimique général et l'obtention d'une réponse positive aux anticorps (anti-HVC).

    Qu'est ce que cela signifie?

    La recherche sur les anticorps à HVC est une projection, par exemple, il peut être utilisé pour examiner un grand nombre de personnes (médecins, les femmes enceintes, les patients des hôpitaux, des donateurs, consommateurs de drogues injectables, séropositifs). Les résultats négatifs des analyses de laboratoire de l'anti-HVC dit que la réponse est détectée candidat immunitaire au virus dans le sang. Un résultat négatif peut être obtenu dans de tels cas:

    Si une personne n'a jamais été infectée par l'hépatite C.

    Si la sensibilité du système de test de laboratoire était inférieure à la concentration d'anti-HVC.

    Si l'infection est survenue il y a moins de 2 mois et que la présence d'anti-HVC dans le sang ne suffit pas pour la déterminer. Quand une réponse fausse négative due à des facteurs humains.

    Si le résultat obtenu est que les anticorps des patients HVC détectés, cela signifie que le virus de l'hépatite C est dans le corps du sujet au moment de l'enquête ou avait du sang il y a quelque temps. Si un résultat positif pour l'anti-HVC, il est nécessaire pour les tests de laboratoire supplémentaires qui permettent de détecter le matériel génétique de l'agent pathogène, déterminer la concentration de ses gènes (la charge virale, virémie) et établir le génotype.

    Analyse de l'ARN du virus de l'hépatite C

    Le génome de HVC dans des conditions de laboratoire peut être détecté à l'aide de plusieurs études:

    ADN ramifié (p-ADN);

    amplification transcriptionnelle (TMA);

    réaction en chaîne de la polymérase (PCR).

    La méthode de l'ADN-p est un moyen peu coûteux et facile de détecter le génome viral chez un grand nombre de personnes examinées. Son principal inconvénient est sa faible sensibilité: il ne révèle le HVC que lorsque sa concentration dépasse 500 UI / ml.

    La méthode d'amplification transcriptionnelle détecte les acides nucléiques du virus dans le sérum. L’analyse a une sensibilité élevée (5-10 UI / ml), mais elle n’a pas encore été suffisamment intégrée à la pratique de laboratoire omniprésente.

    La méthode PCR en Russie est l'examen de laboratoire le plus répandu et le plus accessible avec une sensibilité élevée (de 50 à 60 UI / ml).

    L’étude PCR est réalisée dans tout laboratoire clinique disposant de l’accréditation appropriée. Une très importante nuance de cette méthode de diagnostic, qui affecte le résultat de l'analyse, est la sensibilité du système de test utilisé en laboratoire. Par exemple, la sensibilité diagnostique de 60 UI / ml, comme dans les laboratoires Invitro, permet la détection de l'ARN viral 3 mois après l'infection. À faible sensibilité du système de test, les gènes de l'agent pathogène peuvent ne pas être détectés même 4 mois après l'infection.

    ARN du virus de l'hépatite C: méthode PCR

    La méthode PCR présente de nombreux avantages par rapport aux autres tests de laboratoire pour la détection des gènes de HVC:

    haute sensibilité. La méthode permet de déterminer le matériel génétique de l'agent pathogène même avec sa concentration minimale dans l'échantillon;

    grande spécificité. Identifie les gènes d'un virus d'un génotype particulier parmi une variété d'ADN et d'ARN d'autres agents pathogènes, ce qui permet le génotypage de l'agent pathogène;

    vitesse de tenue. L'absence d'un long processus de culture de l'agent pathogène raccourcit le délai d'obtention du résultat jusqu'à plusieurs heures; universalité de l'analyse.

    La procédure de recherche universelle permet l'utilisation simultanée d'un échantillon de sang humain pour détecter le matériel génétique de différents agents pathogènes. Ces avantages permettent de considérer la PCR comme le "gold standard" pour le diagnostic en laboratoire de l'hépatite virale C ainsi qu'un dosage immunoenzymatique anti-HVC.

    La PCR est une étude utilisée pour déterminer les gènes de HVC dans le sang d'un individu. L’étude comprend plusieurs étapes:

    Échantillonnage du biomatériau.

    Augmenter à plusieurs reprises la concentration de copies d'ARN dans l'échantillon sélectionné.

    Détection de matériel génétique à l'aide de systèmes de test spéciaux.

    Après avoir prélevé le sang veineux du patient, le processus de réplication multiple (amplification, copie) des gènes de HVC est initié artificiellement.

    Pour ce faire, modifiez plusieurs fois la température à l'intérieur du tube contenant le biomatériau. Lorsque le nombre de copies d'ARN dans l'éprouvette atteint la valeur souhaitée, effectuez la détection de l'agent pathogène à l'aide d'un diagnostic spécial.

    qualitatif (détecte la présence d'un virus),

    quantitatif (détermine la concentration de gènes viraux par unité de volume)

    génotypique (établit le génotype de l'agent pathogène).

    ARN de l'hépatite C: analyse qualitative

    La tâche de la PCR de qualité consiste à déterminer la présence de HVC dans le biomatériau présenté. Cette étude est généralement réalisée pour le diagnostic de dépistage de la maladie ou la détection du portage. Attribuez-le après la détection d'un anti-HVC par ELISA.

    Pour diagnostiquer l'hépatite C, il suffit de détecter qualitativement le matériel génétique du VHC, c'est-à-dire sans compter sa concentration dans le volume sanguin. Le résultat d'une PCR de haute qualité peut être: "l'ARN est détecté" ou "l'ARN n'est pas détecté".

    La précision de la méthode correspond à 95%. Dans le même temps, la précision des diagnostics de test atteint 100% et le facteur humain, qui est toujours présent dans les études de laboratoire, atteint 5%. Pour éviter une analyse faussement négative, en particulier chez les personnes à faible virémie, une grande sensibilité du système de diagnostic utilisé dans l’étude est nécessaire. La sensibilité du système de test ne doit pas être inférieure à 60 UI / ml.

    ARN de l'hépatite C: analyse quantitative

    L'analyse quantitative est prescrite lorsque vous avez besoin de connaître le niveau de virémie dans le corps humain. Les indications pour mener cette étude sont:

    résultat positif de la PCR de haute qualité, à condition de détecter les anticorps anti-virus;

    établir le stade de la pathologie;

    détermination de la charge virale dans l'hépatite;

    le choix d'associations d'antiviraux;

    surveiller une réponse virologique au traitement antiviral;

    évaluation de la probabilité de transition d'une hépatite C aiguë à une infection chronique.

    Le résultat de l'analyse est exprimé en UI / ml (unités internationales dans 1 ml de sérum) ou en copies / ml (nombre de copies de gènes du virus dans 1 ml de sérum). La PCR quantitative n'est pas normale: normalement, le gène HVC dans le sang humain ne doit pas être détecté. Les résultats de l'enquête sont comparés aux valeurs de référence établies pour différents degrés de charge virale.

    Ainsi, les indicateurs (en UI / ml):

    au-dessous de 4 × 10 * 5 sont considérés comme une faible virémie;

    de 4 × 10 * 5 à 8 × 10 * 5 - moyenne;

    plus de 8 × 10 * 5 - élevé.

    Plus le nombre de copies d'ARN viral dans le sang est important, plus la maladie est agressive et plus le risque de transmission du virus à d'autres est élevé. Mais le niveau de charge virale n'est pas le seul indicateur qui affecte la gravité de la pathologie et le pronostic ultérieur du patient: le génotype de l'agent pathogène est également important.

    L'établissement d'un génotype est nécessaire pour attribuer le schéma thérapeutique correct. Il détermine également le pronostic pour la santé et la vie du patient. Par exemple, le génotype du virus 3 conduit souvent à une fibrose ou à une cirrhose du foie, en comparaison avec les patients porteurs d'un génotype.

    Hépatite C: analyses et transcription

    ARN Le diagnostic de l'hépatite C ne peut être établi uniquement à l'aide des résultats d'une analyse qualitative et / ou quantitative de la PCR: la détermination de HVC et du niveau de charge virale ne suffit pas pour prescrire un traitement antiviral adéquat. Un patient potentiel doit être examiné de manière exhaustive (clinique, laboratoire, instrumentale) afin d’obtenir une image objective de la pathologie. Attribuez correctement un ensemble d'examens pour établir le diagnostic de l'hépatite C, puis seul le médecin peut déchiffrer les résultats correctement.

    PCR de haute qualité pour l'hépatite C

    Faire face à l'hépatite virale C n'est vraiment pas facile. La raison en est la capacité de l’infection à muter et à éviter la résistance réciproque de l’immunité humaine.

    Le diagnostic de la pathologie est un processus complexe en l'absence de symptômes.

    Les porteurs du virus ne sont souvent pas conscients de leur état grave, ne voient pas la nécessité de subir une analyse PCR de l'hépatite C, ni de contacter un hépatologue.

    Plus sur la pathologie

    À ce jour, il existe 6 génotypes connus de l'hépatite virale de forme C. En outre, les experts distinguent également un nombre décent de sous-types.

    En raison de leur définition correcte, on leur prescrit une PCR pour l'hépatite c. Après cela, le médecin sera en mesure de prescrire le bon traitement, ce qui donnera l'efficacité souhaitée.

    Il est important d’arrêter la transformation du virus au stade chronique de la maladie. Vous pouvez augmenter vos chances de guérison si vous arrivez à temps avec un médecin qualifié, qui prendra avec compétence le diagnostic du corps et vous prescrira un traitement médical.

    À ces fins, il vaut la peine d'être attentif à tous les signaux de votre corps. On entend par ARN du virus de l'hépatite C le processus inflammatoire qui se produit dans l'organe du foie.

    La forme virale de l’hépatite C pénètre dans le corps et perturbe le fonctionnement du foie. Après cela, l'infection pénètre dans le sang, fusionne avec les cellules du foie et s'efforce de détruire les hépatocytes.

    La base tissulaire de l'organe subira des modifications et s'effondrera de plus en plus sous l'influence du virus.

    En conclusion, la cirrhose ou le cancer va commencer à se transformer en arn du virus de l'hépatite C. Ces renaissances sont lourdes d'une fin fatale pour le patient.

    Si le virus ne se fait pas sentir sous la forme de symptômes externes, cela signifie que pendant de nombreuses années, une personne malade peut même ne pas soupçonner ce qui lui arrive réellement.

    Ce n'est que par hasard, après avoir réussi l'examen, qu'il pourra se renseigner sur la pathologie, mais il sera peut-être trop tard.

    Lorsque des tests d’ARN du virus de l’hépatite C sont effectués, le spécialiste examine attentivement la chaîne de l’acide ribonucléique.

    Comme vous le savez, cela fait partie de l’ADN. Lorsque les résultats de l'hépatite C du virus à ARN sont déterminés, le médecin devra établir un diagnostic et prescrire un traitement efficace.

    Dans ce cas, l'automédication ne devrait pas être présente, la situation est trop dangereuse pour expérimenter avec votre santé.

    L'hépatite virale C est...

    Sous hépatite virale C, on entend une maladie infectieuse causant des coups impitoyables au foie.

    Une personne est infectée par le virus du VHC par la circulation sanguine. Des cas similaires ont été enregistrés lors d'une transfusion sanguine.

    Les centres médicaux peu fiables n'effectuent pas toujours une stérilisation complète des instruments médicaux.

    Il est possible qu'une infection par l'hépatite C se produise lors de rapports sexuels. Mais ce type d’infection est extrêmement rare.

    Des cas d'infection de la mère à l'enfant ont également été enregistrés pendant la gestation.

    Types d'hépatite C

    Aujourd'hui, les experts distinguent 2 types d'évolution de l'hépatite virale C: chronique et aiguë. Ci-dessous, nous passerons brièvement en revue chacun d’entre eux.

    Pointu

    La forme de la maladie est traitable. Mais il est important de ne pas hésiter à consulter le médecin pour que la maladie ne passe pas au stade chronique.

    Chronique

    C'est une forme dangereuse de la maladie. La maladie est observée tout au long de la vie d’une personne. Cela réduit considérablement la qualité de vie de la victime, ce qui réduit la fonctionnalité de l'organe du foie.

    L'évolution de la maladie se termine par des complications désagréables telles qu'un oncodiagnostic ou une cirrhose.

    Il convient de noter que le risque de transition d'une toxicité aiguë à une toxicité chronique est élevé. Ceci est confirmé par les statistiques. 70 à 90% des personnes sont confrontées à une situation similaire.

    Le danger de la forme chronique est que la maladie est presque sans symptômes visibles. Une personne peut se plaindre de détérioration générale, de nausées et de vomissements, de fièvre.

    En outre, il n’est pas exclu le manque total de désir de manger, ce qui conduit à une perte de poids spectaculaire.

    Groupe de risque

    Les personnes infectées peuvent ne pas ressentir les symptômes du tout, sans même penser aux problèmes qu’elles ont surmontés. Une maladie est découverte par hasard lorsqu'une personne s'est présentée au rendez-vous du médecin sur un sujet complètement différent.

    Le risque d'infection par l'hépatite C devrait inclure:

    • les enfants infectés par les mères;
    • les personnes ayant des problèmes de drogue;
    • adhérents de tatouages ​​et piercings. Pas toujours dans les salons utiliser des instruments stériles;
    • patients transfusés;
    • les personnes ayant subi une greffe d'organe avant 1992. En effet, jusqu'à présent, l'hémodialyse n'était pas fournie dans la pratique médicale.
    • Infecté par le VIH;
    • le personnel hospitalier qui travaille avec des personnes atteintes d'hépatite.

    Pourquoi dois-je effectuer une PCR pour l'hépatite C?

    Sous PCR pour l'hépatite C, l'explication de l'analyse associée à l'idée du nombre de particules d'ADN chez un patient qui permet de déterminer l'agent causal de la maladie virale mérite d'être comprise.

    À notre époque, le VHC est en cours de traitement et il est donc important d'identifier la maladie rapidement. En cas de suspicion de présence de la pathologie dans le corps humain, la PCR ne peut être évitée.

    L'article a déjà indiqué que les symptômes de l'hépatite C ne sont pas toujours très prononcés.

    Le corps peut ne pas donner de signaux du tout et, par conséquent, la personne ne sentira pas que la maladie est en cours.

    Si, toutefois, la PCR est réalisée, et au préalable, par un test ELISA, il est alors possible de détecter la maladie dans 60 à 70% des cas et de commencer le traitement avec compétence.

    Grâce à cette analyse, il est possible d’établir l’étendue de la propagation de la pathologie et de choisir un traitement. Pour éviter de telles conséquences, il est nécessaire de faire toutes les vaccinations nécessaires contre l'hépatite.

    Il existe plusieurs types d’analyses: PCR quantitative et qualitative.

    Une deuxième analyse est tout d’abord réalisée, qui permet de confirmer l’hypothèse selon laquelle les soupçons du médecin concernant l’infection du patient étaient justifiés.

    Et alors seulement, la PCR quantitative permet de comprendre la charge à laquelle le foie est confronté.

    Types d'analyse PCR

    Une analyse qualitative de la PCR pour l'hépatite C permet de déterminer l'infection dans le matériel du patient, dans ce cas le sang est utilisé.

    Avec un résultat positif, on découvre que le virus inflige des coups impitoyables aux cellules saines de l'organe. Si des anticorps ont été trouvés, un test qualitatif est effectué.

    Une analyse quantitative de l'hépatite C détermine la charge et la concentration de l'infection dans le matériel sanguin.

    Il vous permet également de définir la gravité de la pathologie. Le degré d'hépatite C doit être détecté à un stade précoce pour qu'un médecin puisse ensuite développer un programme de réadaptation.

    L'importance de l'analyse PCR pour le diagnostic de l'hépatite virale C

    La réaction en chaîne de la polymérase permet d’accroître la concentration de fragments d’ADN dans du matériel biologique.

    L'analyse des échantillons est vraiment efficace et donne une grande précision. Par conséquent, elle est largement utilisée dans la pratique médicale.

    Grâce à la précision des diagnostics, il est possible de déterminer des pathologies infectieuses et héréditaires.

    L'essence du test sanguin utilisant la PCR est contenue dans la copie multiple d'un fragment spécifique du gène de l'ADN.

    Les données obtenues aideront un spécialiste à établir un diagnostic précis, à comprendre le contenu du matériel relatif au VHB et à déterminer les causes de l’infection.

    Toutes ces informations seront utiles lors du traitement ultérieur.

    Indications pour les tests de réaction en chaîne de la polymérase.

    Pour détecter les signes du VHC dans les matériaux du patient, des médecins expérimentés ont mis au point des systèmes de test spéciaux.

    Les indications pour la PCR sont dans ces cas:

    • après avoir effectué des études sérologiques, des résultats douteux ont été obtenus;
    • il est devenu nécessaire de déterminer le génotype exact du VHC;
    • Il est important de contrôler les résultats du traitement antiviral.

    Comment faire l'analyse de la réaction en chaîne de la polymérase

    Un test PCR est effectué conformément à l'algorithme suivant:

    1. Un spécialiste du sang va interférer avec le tube.
    2. Le matériau est mélangé avec du praumera, une solution tampon et une matrice ADN.
    3. Le mélange doit être chauffé à une température de 95 degrés Celsius.
    4. Après le matériau doit être autorisé à refroidir.
    5. Lorsque les résidus de nucléotides sont extraits de la solution, le médecin déterminera s’il existe un gène du virus de l’hépatite C dans l’échantillon.

    Dans ce contexte, l'hépatologue sera en mesure de déterminer le stade de la pathologie et de prescrire un traitement efficace.

    Si, au cours de l'hépatite, la charge virale est faible, le traitement doit être effectué avec succès, mais le traitement doit être modifié car le traitement n'apporte pas de résultats satisfaisants.

    Avantages de l'utilisation de la PCR

    À des fins de diagnostic, la méthode de la réaction en chaîne de la polymérase ne doit pas être sous-estimée. Parmi les nombreux avantages à l'avant-plan, il y a la précision et la sensibilité du test.

    Grâce à l'analyse, il est possible d'obtenir un maximum d'informations sur le comportement du virus à ARN dans le corps humain affecté.

    Grâce à la recherche, le médecin peut confirmer le diagnostic. Ce test est souvent utile au spécialiste s’il a des doutes sur l’état du patient.

    Un avantage important sera le fait que la PCR implique l'utilisation non seulement de sang, mais également de salive, d'urine et d'autres sécrétions humaines en tant que matériel biologique.

    Les études sont effectuées le plus rapidement possible. Par conséquent, le patient ne tardera pas à anticiper les résultats du test et, si nécessaire, peut compter sur un traitement précoce.

    La PCR vous permet également de déterminer l'activité de l'hépatite virale C, ainsi que la menace que le patient porte.

    Si un traitement efficace a été prescrit par un hépatologue, cela signifie que lors du test PCR, il sera noté que le virus a cessé de frapper de nouvelles cellules.

    Des résultats similaires sont obtenus par la réception de médicaments de haute qualité, utilisés avec précision par le patient avec les instructions écrites du médecin.

    Par exemple, des médicaments d’origine indienne ayant fait leurs preuves - des génériques.

    L'importance de la fréquence de réalisation d'une étude PCR

    Au cours de l'évolution de la maladie à différentes phases, le médecin peut prescrire le passage des tests PCR. Cette mesure offre l’occasion de comprendre l’efficacité du traitement et de déterminer le moment de sa mise en œuvre à l’avenir.

    Si les réponses au test sont positives, la période sera considérablement réduite, sinon le traitement devra être prolongé.

    Sur la base de la pratique existante, il convient de noter que la PCR est généralement effectuée sur 1, puis 4, ainsi que 12 et 24 semaines du cycle thérapeutique et thérapeutique.

    Si, lors du troisième test de PCR, les indicateurs ne changent pas en faveur de la reprise, le cours devrait être changé. Il s'avère que la thérapie ne correspond pas au corps.

    Le résultat d’un test quantitatif est de comprendre l’évaluation des résultats associés au verdict au-dessous des plages mesurées, sinon il peut y avoir des marques qui ne se trouvent pas dans le sang.

    L'indice de sensibilité d'une analyse qualitative est inférieur à celui de son prédécesseur. Les deux types de tests avec décodage - manquant, indiqueront que le virus de l'hépatite C n'a pas été trouvé.

    Dans les cas où les tests comportent des anomalies, des tests supplémentaires peuvent être attribués. Le plus souvent, il s'agit d'une biopsie. La procédure déterminera l'étendue des dommages aux organes du foie.

    Si les modifications des analyses obtenues sont hors normes, le virus continue de croître et la maladie prend de l'ampleur.

    Des facteurs tels que:

    • la présence dans les matières d'héparine ou de substances ne permettant pas à la PCR de fonctionner en mode normal;
    • contamination des échantillons de sang;
    • erreur de laboratoire;
    • Le test a été réalisé en non-conformité aux normes existantes.

    Si le résultat diffère selon les laboratoires, une autre méthode de recherche du matériel biologique des patients peut être mise en cause.

    Rnk virus de l'hépatite C qu'est-ce que c'est

    Le virus de l'hépatite C (VHC) est responsable d'environ 20% des hépatites aiguës, de 60 à 70% des hépatites chroniques et d'environ 30% des cas de cirrhose et de cancer du foie. Le VHC, découvert en 1989, est un virus à ARN du genre Flavivirus de la famille des Togaviridae, d’une taille de 40 à 60 nm, avec une prédominance du contenu lipidique. Il existe au moins 6 génotypes et 50 sérotypes du VHC. La connaissance du génotype ou du sérotype (anticorps de génotype spécifique) du VHC est utile pour recommander et prescrire un traitement. Le VHC se transmet par contact avec du sang contaminé ou des produits sanguins contaminés: transfusions sanguines, utilisation d'aiguilles et de seringues après une autre personne, sans stérilisation ou mal stérilisés, tatouages, vaccination avec du matériel non stérilisé, partage d'une brosse à dents, d'une trousse de rasage, d'une pince à épiler, d'un ensemble de manucure. Présent dans les milieux biologiques (salive, lait, pertes vaginales, sperme, etc.), mais à une concentration inférieure à celle du virus B. Peut être transmis de la mère au fœtus. Le niveau de transmission verticale chez les femmes enceintes positives pour l'anti-VHC est estimé entre 2,7 et 4,4%. Ce chiffre atteint une valeur de 5,4 à 8,6% chez les femmes enceintes co-infectées par le VHC et le VIH. Environ 85% de la forme aiguë devient chronique. Un carcinome hépatocellulaire peut survenir chez environ 20% des patients atteints de cirrhose du foie (en moyenne plus de 30 ans) et 1 à 5% d’entre eux sont infectés par le VHC.


    L'apparition de la maladie est insidieuse, le virus s'appelle une bombe à retardement ou un tueur affectueux. Les fenêtres sérologiques entre la présence du VHC et la détection des anti-VHC varient selon les patients. Les tests immunologiques actuels détectent les anticorps en moyenne 7 à 8 semaines après le début de la maladie. En cas de rétablissement spontané, l'anticorps anti-VHC peut persister toute la vie ou diminuer progressivement pour disparaître au cours de plusieurs années. Chez les patients présentant une infection anti-VHC chronique, ils persistent indéfiniment. Parmi la population à faible risque, le nombre de personnes qui abandonnent le diagnostic est compris entre 0,5 et 1%.


    L'analyse de l'ARN du VHC (définition de l'ARN du virus de l'hépatite C), souvent appelée analyse PCR de l'hépatite C, est un test sanguin qui permet d'identifier directement le matériel génétique du virus de l'hépatite (chaque virus est une particule d'ARN). Ce test est le plus souvent effectué par la méthode PCR, d'où le nom de PCR de l'hépatite C. Il existe des tests qualitatifs et quantitatifs pour l'ARN du VHC.


    L'analyse qualitative indique la présence d'un virus dans le sang. Ce test doit être effectué pour tous les patients présentant des anticorps anti-hépatite C. Son résultat peut être détecté ou non. Valeurs de référence (la valeur qui devrait être normale) - non détectées. Un résultat trouvé peut indiquer que le virus se multiplie et infecte toutes les nouvelles cellules du foie. Un test PCR qualitatif a une certaine sensibilité. Cela signifie que si le virus est présent dans le sang à une très faible concentration (inférieure au seuil de sensibilité de la méthode), aucun résultat ne peut être obtenu. Par conséquent, lors de l'exécution d'une PCR de haute qualité chez des patients présentant une virémie basse (concentration virale), par exemple, sous traitement antiviral, il est important de connaître la sensibilité du système de diagnostic. Pour contrôler la réponse virologique au cours du traitement antiviral, il est souhaitable d’utiliser un système de diagnostic avec une sensibilité d’au moins 50 UI / ml.

    Préparer le patient: don de sang à jeun

    Matériel: plasma sanguin.

    ARN du virus de l'hépatite C, détermination quantitative

    Qu'est-ce que l'ARN quantitatif de l'hépatite C?

    Détermination quantitative de l'ARN de l'hépatite par PCR.

    Indicateurs analytiques: la détection de l'ARN du virus de l'hépatite C par la méthode de la réaction en chaîne de la polymérase (PCR) et la détermination de la charge virale dans le plasma sanguin.

    Le fragment à déterminer est une région conservatrice du génome du virus de l'hépatite C. La spécificité de la détermination est de 98%. La sensibilité de détection est de 600 UI / ml de particules virales dans le plasma sanguin.

    Pourquoi est-il important de procéder à la quantification de l'ARN du virus de l'hépatite C?

    La caractérisation quantitative de la teneur en ARN du virus de l'hépatite C dans les échantillons cliniques est importante pour évaluer l'efficacité du traitement antiviral et a une signification pronostique pour déterminer la chronicité de cette hépatite. Si la concentration en virus est inférieure à 8 x 105 UI / ml (2 x 106 copies / ml), le pronostic du traitement est favorable, s’il est supérieur, il est alors recommandé d’utiliser un autre schéma thérapeutique. Une charge virale inférieure à 8 x 105 UI / ml (2x10 copies / ml) ainsi que la détermination du génotype du virus constituent un paramètre indépendant et extrêmement précis de l'efficacité du traitement. Une diminution de 85% de la concentration en ARN du virus de l'hépatite C le troisième jour suivant le début du traitement est un paramètre rapide et précis permettant de prévoir l'efficacité du traitement conduisant à une réponse virologique précoce.

    Quels symptômes l’ARN du virus de l’hépatite C fait-il quantifier?

    Indications pour l'analyse:

    • Test qualitatif positif pour la présence d'ARN du virus de l'hépatite C dans le sérum.
    • Déterminer la tactique de traitement des patients.
    • Évaluation précise de l'efficacité du traitement.

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    Analyse PCR

    L'analyse de l'ARN du VHC (définition de l'ARN du virus de l'hépatite C), souvent appelée analyse PCR de l'hépatite C, est un test sanguin qui permet d'identifier directement le matériel génétique du virus de l'hépatite (chaque virus est une particule d'ARN). Ce test est le plus souvent effectué par la méthode PCR, d'où le nom de PCR de l'hépatite C. Il existe des tests qualitatifs et quantitatifs pour l'ARN du VHC.

    L'analyse qualitative indique la présence d'un virus dans le sang. Ce test est nécessaire pour tous les patients présentant des anticorps anti-hépatite C. Son résultat peut être "détecté" ou "non détecté". Valeurs de référence (valeur qui devrait être normale) - «non détecté». Le résultat de «détecté» peut indiquer que le virus se multiplie et infecte toutes les nouvelles cellules du foie. Un test PCR qualitatif a une certaine sensibilité (10-500 UI / ml). Cela signifie que si le virus est présent dans le sang à une très faible concentration (inférieure au seuil de sensibilité de la méthode), un résultat «non détecté» peut être obtenu. Par conséquent, lors de l'exécution d'une PCR de haute qualité chez des patients présentant une virémie basse (concentration virale), par exemple, sous traitement antiviral, il est important de connaître la sensibilité du système de diagnostic. Pour contrôler la réponse virologique au cours du traitement antiviral, il est souhaitable d’utiliser un système de diagnostic avec une sensibilité d’au moins 50 UI / ml. Ces critères sont remplis, par exemple, par les analyseurs HCB-TEST COBAS AMPLICOR (sensibilité analytique de 50 UI / ml ou 100 copies / ml), l'ARN du VHC RealBest (sensibilité analytique de 15 UI / ml ou 38 copies / ml), etc.

    Coût pcr

    L'analyse PCR dont le coût dépend des réactifs utilisés et peut aller de 300 roubles. jusqu'à 5000 roubles va d'un jour à une semaine.

    Outre la méthode PCR, l'amplification de la transcription (TMA) est également utilisée pour détecter l'ARN du VHC, qui présente une meilleure sensibilité (environ 5 à 10 UI / ml), mais cette méthode n'est pas encore courante en Russie.

    À quelle fréquence faut-il effectuer une PCR sur l'hépatite C? Elle est généralement effectuée immédiatement après la détection des anticorps anti-hépatite C et après la 4ème, 12ème, 24ème semaine du traitement antiviral, ainsi que 24 semaines après l'achèvement du HTP, puis une fois par an dans le cas d'une RVS.

    Fig. 1. Exemple des résultats d’une PCR de haute qualité sur l’hépatite C.

    L'analyse quantitative de la PCR (charge virale) est un test de la concentration du virus (virémie) dans le sang. La charge virale est le nombre d'unités de matériel génétique (ARN viral) présentes dans un certain volume de sang (généralement 1 ml, ce qui correspond à 1 centimètre cube). Cette quantité est exprimée en chiffres, en unités de mesure UI / ml (unités internationales par millilitre). La quantité de virus peut être affichée de différentes manières. Par exemple, 1,5 million d'UI / ml, ce qui correspond à 1 500 000 UI / ml ou à 1,5 * 10 6 UI / ml. Certains laboratoires utilisent d’autres unités de mesure - copies / ml. Le taux de conversion des copies en unités internationales est différent pour différents systèmes de test. Les valeurs approximatives peuvent être recalculées en utilisant la formule 1 UI / ml = 4 copies / ml, par exemple 5,5 * 10 5 UI / ml = 2,2 * 10 6 copies / ml.

    Il est important de savoir qu’il n’existe aucun lien direct entre la concentration du virus dans le sang et la gravité de l’hépatite C.

    Qu'est-ce que la charge virale affecte?

    Tout d'abord, sur l'infectivité. Plus la concentration du virus est élevée, plus le risque de transmission du virus est élevé, par exemple par contact sexuel ou de manière verticale. Deuxièmement, la concentration du virus affecte l'efficacité du traitement (si le traitement doit être effectué sur la base d'interféron). Ainsi, une faible charge virale est un facteur favorable au cours du traitement et très défavorable. En outre, la PCR quantitative revêt une grande importance lors de la conduite d'un traitement par interféron afin d'évaluer son succès et de planifier la durée du cours. Ainsi, avec une réponse rapide au traitement et une faible virémie avant le traitement, la durée du traitement peut être réduite. Inversement, avec une lente diminution de la concentration du virus, le HTP peut être prolongé.

    Quelle charge est considérée comme basse et quelle charge est élevée?

    Une charge supérieure à 800 * 10 3 ou 800 000 ME / ml est considérée comme élevée, ce qui correspond à environ 300 * 10 4 ou 3 000 000 copies / ml. La charge supérieure à 1 * 10 7 ME / ml est considérée comme très élevée. Cependant, jusqu'à présent, il n'y avait pas de consensus parmi les spécialistes sur les valeurs qui distinguent la virémie haute et la virémie basse. Ainsi, dans certaines œuvres, le chiffre est de 400 000 ME / ml.

    À quelle fréquence avez-vous besoin d'un test quantitatif?

    Il est généralement fait avant le traitement et après la 12ème semaine de traitement pour évaluer son efficacité dans le cas où l'ARN est encore déterminé par un test qualitatif.

    Le résultat d'un test quantitatif peut être une évaluation quantitative de la virémie dans le format décrit ci-dessus, ainsi que les résultats "situés en dessous de la plage de mesure" et "non détectés".

    Le seuil de sensibilité de la PCR quantitative est généralement supérieur à qualitatif. Ainsi, pour le système COBAS AMPLICOR, il est de 600 ME / ml. Le résultat «non détecté» peut signifier que le test quantitatif et le test qualitatif de confirmation n'ont pas détecté d'ARN viral. Le résultat «en dessous de la plage de mesure» signifie que le test quantitatif n'a pas révélé l'ARN de l'hépatite C, mais que le virus est présent à une concentration très faible (dans l'éventualité où un test qualitatif de confirmation supplémentaire était réalisé).


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