Utilisation du diagnostic PCR

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La réaction en chaîne de la polymérase (PCR) en biologie moléculaire est une méthode expérimentale de détection des virus. Il vous permet d’augmenter considérablement la concentration de certains fragments d’acide nucléique (ADN) dans des échantillons de matériel biologique, ce qui permet de les déterminer (reconnaître) et de les compter.

L'analyse est effectuée comme suit. Du matériel génétique (un échantillon de sang), qui peut potentiellement inclure le gène souhaité, est introduit dans le tube. Des amorces sont également placées - des segments synthétisés chimiquement d’une petite longueur du gène souhaité.

Un ADN ou une ARN polymérase est également ajouté dans le vaisseau, ce qui permet d’aligner une chaîne d’acides nucléiques complètement identique à celle de l’origine. La composition résultante est injectée et un ensemble de quatre nucléotides libres - un matériau de construction spécial pour l'ARN ou l'ADN, dont l'un contient des particules de phosphore radioactives.

Le mélange obtenu est chauffé à 95–96 ° C. C'est pourquoi deux hélices d'ADN, qui sont normalement entrelacées, sont tissées. Ensuite, le médicament est refroidi et les amorces se fixent à la région souhaitée du génome viral, empêchant l’ARN (ou l’ADN) de former à nouveau une double hélice.

En cours de refroidissement, la polymérase recherche une chaîne de nucléotides libre. Pour le fonctionnement de cette enzyme, une seule chaîne de nucléotides est nécessaire. Comme la polymérase glisse le long de la chaîne d’ADN (comme un anneau sur une corde), elle n’est pas capable de travailler sur une double hélice.

Ensuite, un cycle de chauffage répété est effectué, ce qui permet de séparer les chaînes de nucléotides. À chacun de ces cycles de PCR, la quantité dans l'échantillon du gène d'hépatite souhaité augmente de manière exponentielle, et le reste du matériel génétique est produit (se développe) de manière linéaire.

Après purification de la solution à partir des résidus de nucléotides et séparation par électrophorèse des chaînes d'ADN par le paramètre de poids moléculaire, on peut facilement déterminer s'il existe ou non un gène souhaité dans l'échantillon étudié.

Avantages de la PCR

Les tests de laboratoire utilisant la PCR permettent d'obtenir encore plus d'informations que la présence de l'ARN du virus. En déterminant le paramètre du niveau de rayonnement radioactif, il est possible d'identifier la quantité de matériel génétique qui était à l'origine contenue dans l'échantillon étudié. Dans le cas de l'hépatite B, déterminez l'indicateur de charge virale

Un autre avantage de cette méthode est le très haut degré de sensibilité de la réaction CR. Il est beaucoup plus élevé que les méthodes classiques de détection de virus. Idéalement, pour identifier le gène souhaité, pour la PCR, un seul virus dans l'échantillon suffit.

De plus, la PCR est complètement spécifique. Ses amorces sont conçues de manière à correspondre pleinement aux régions uniques des gènes souhaités qu'aucune autre séquence ne possède. Comme les empreintes digitales sont uniques, il existe des séquences de nucléotides uniques dans chaque gène.

Analyse qualitative de la PCR

L'analyse qualitative vous permet d'identifier uniquement la présence d'un virus dans le sang. Ce test doit être effectué chez tous les patients chez qui des anticorps anti-hépatite C ont été détectés dans le sang. Il ne peut en résulter que l'une des deux valeurs suivantes: «détecté» ou «non détecté». Chez une personne en bonne santé, la norme (valeur de référence) doit être "non détectée".

Il existe une interprétation particulière de ces résultats de la recherche qualitative:

  • Le résultat est "détecté". Cela signifie qu'un fragment d'ARN spécifique au virus de l'hépatite C a été trouvé dans l'échantillon de matériel biologique prélevé analysé. Par conséquent, le patient est infecté par le virus de l'hépatite C. Si le résultat d'une PCR de haute qualité est «détecté», cela indique que le virus se multiplie et à ce moment, il infecte de nouvelles cellules du foie dans le corps.
  • Le résultat est "non détecté". Un tel verdict indique que dans l'échantillon de matériel biologique obtenu dans ce laboratoire et analysé, aucun fragment d'ARN spécifique du virus de l'hépatite C n'a été trouvé, mais que la concentration en ARN de l'infection par l'agent pathogène était inférieure à la limite de sensibilité du test.

Dans la phase aiguë de l'ARN du virus de l'hépatite C, de telles études qualitatives par la méthode PCR peuvent être détectées dès 1-2 semaines immédiatement après l'infection du corps, c'est-à-dire bien avant l'apparition des anticorps anti-hépatite.

Des résultats de test inexacts de cette étude peuvent être obtenus par:

  • biomatériau contaminé;
  • la présence d'héparine dans le sang du patient;
  • la présence dans l'échantillon de substances chimiques ou protéiques (inhibiteurs) agissant sur les divers composants de la PCR.

Pour effectuer une analyse qualitative de la PCR, aucune préparation spéciale du patient pour l’étude n’est requise. Le sang veineux est utilisé comme matériau.

Evaluation des résultats

Les tests PCR de haute qualité ont un certain degré de sensibilité et, en fonction de la précision des recherches et du niveau d’équipement du laboratoire, ils peuvent varier de 10 à 500 UI / ml.

Cela signifie que si le virus dans l'échantillon de sang est présent à une très faible concentration (inférieure à la valeur seuil de la sensibilité de ce laboratoire), le résultat peut alors être déterminé comme "non détecté" chez un patient patient. Pour cette raison, lors de l'analyse qualitative de la PCR avec un faible niveau de virémie (faible concentration de virus), par exemple, pour les patients sous traitement antiviral, il est très important de connaître le seuil de sensibilité de ce système de diagnostic.

Variantes de systèmes de diagnostic

Pour contrôler la réponse virologique, il est recommandé d'utiliser des systèmes de diagnostic avec un seuil de sensibilité d'au moins 50 UI / ml pour un traitement antiviral. Ces critères sont satisfaits, par exemple, avec les analyseurs Cobas Ampicolor HCV-Test (exacts à 50 UI / ml), ainsi qu'avec l'ARN RealBest HCV (avec une sensibilité de 15 UI / ml).

Selon les recommandations de l’OMS, pour établir un diagnostic définitif de l’hépatite C, il est nécessaire de se baser uniquement sur la base d’une triple détection du RNA du virus C dans les échantillons de sérum du patient, en l’absence d’autres variétés de marqueurs de l’hépatite.

Outre les méthodes de PCR, un test TMA (méthode d'amplification de la transcription) est également utilisé pour détecter l'ARN du VHC chez les patients. Son seuil de sensibilité est optimal (5 à 10 UI / ml), mais dans notre pays une telle méthode de test n’est pas encore très répandue.

Gamme de modifications de virus détectables

Une telle détermination qualitative dans le sérum de la présence d'ARN du virus de l'hépatite C permet de déterminer plusieurs génotypes de ce virus. Actuellement, la science connaît plus de six génotypes de ce virus, ainsi que près de 10 sous-types de cette maladie.

Dans notre pays, les virus communs 1, 2, 3 génotypes. Les laboratoires peuvent détecter les génotypes suivants: 1a et 1b, 2a, 2b et 2c, ainsi que 3, 4, 5a et 6, quels que soient leurs sous-types. Pour toutes les modifications de virus, la spécificité de la détection est de 100%.

Analyse quantitative par PCR

À l'aide d'un test PCR quantitatif, on détermine le niveau de concentration du virus de l'hépatite dans des échantillons de sang (charge virale). Ce test de virémie (concentration en virus) vous permet de déterminer le nombre d'unités d'un certain matériel génétique (l'ARN le plus viral), qui est détecté dans une certaine quantité. Dans ce cas, déterminez sa concentration en 1 ml, ce qui correspond à 1 cu. voir

Les paramètres quantitatifs de l'analyse sont exprimés sous forme de chiffres; à cet effet, les unités internationales (UI) par millilitre (ml), appelées UI / ml, sont utilisées comme unités de mesure. Or, dans certains laboratoires, la quantité de virus peut être déterminée dans d'autres unités: le nombre de copies par ml est indiqué en copies / ml.

  • Dates: pour l’hépatite C, une telle analyse quantitative de la PCR est effectuée immédiatement avant le début du traitement. Puis les 1ère, 4ème, 12ème et 24ème semaines. L'évaluation à la 12e semaine est indicative, elle permet de déterminer l'efficacité du traitement.
  • Préparation à l'analyse. Pour effectuer une analyse quantitative de la PCR, aucune préparation spéciale du patient pour l'étude n'est requise. Une demi-heure avant l'échantillonnage ne devrait pas fumer. Le sang veineux est utilisé comme matériel de laboratoire.

Evaluation des résultats

Pour différents systèmes de test de laboratoire, il existe différents facteurs de conversion pour cet indicateur en UI / ml. En moyenne, ils prennent un paramètre de conversion, dans lequel 4 copies / ml = 1 UI / ml. Ainsi, si le laboratoire donne le résultat de l'analyse PCR, 2,4 * 10 6 copies / ml, ce paramètre doit être divisé en 4 et nous obtiendrons 6 * 10 5 UI / ml.

Une charge de 800 000 UI / ml est considérée comme élevée, ce qui correspond approximativement à 3 000 000 copies / ml. Selon certains auteurs, une faible virémie correspond aux paramètres de la PCR quantitative inférieurs à 400 000 UI / ml.

À la suite du test quantitatif, les résultats finaux peuvent être fournis non pas sous forme de valeur numérique, mais: «en dessous de la plage de mesure» ou «non détectée».

  • Evaluation: "en dessous de la plage de mesure." Cela suggère que le test quantitatif n'a pas pu détecter l'ARN du virus de l'hépatite C, mais que le virus lui-même est présent dans le corps à de très faibles concentrations. Ceci est mis en évidence par un test qualitatif supplémentaire confirmant la présence du virus.
  • Note: non détecté. Ce résultat indique que le test quantitatif n'a pas été trouvé dans l'échantillon d'ARN du virus.

Le paramètre de la charge virale, tout d’abord, détermine le degré de contagiosité de la maladie, le niveau de "contagiosité" du patient. Plus la concentration de virus du patient est élevée, plus grande est la probabilité de le transmettre à d’autres personnes. Par exemple, lors d'un rapport sexuel avec une personne malade ou verticalement. Cet indicateur quantitatif permet également de déterminer l'efficacité du traitement du patient.

Effectuer une analyse quantitative du CCP est important pour la thérapie antivirale, en évaluer le succès et planifier la durée du cours. Ainsi, avec une réponse rapide du corps au traitement et un faible degré de virémie, la durée du traitement peut être raccourcie.

Si le paramètre de PCR quantitative est lentement réduit, le traitement antiviral doit être prolongé ou modifié. Si le niveau de charge virale est faible, il s'agit d'un facteur favorable au traitement, mais s'il est élevé, la méthode de traitement utilisée est inefficace et les médicaments ou les méthodes d'utilisation doivent être modifiés.

Diagnostic avec PCR pour l'hépatite C

Tout le monde ne sait pas pourquoi ils utilisent la méthode de diagnostic PCR pour l'hépatite C. L'un des groupes de maladies les plus répandus est celui des maladies infectieuses du tube digestif. Le plus souvent, l'estomac (ulcères), les intestins (colite, entérite) et le foie (hépatite) en souffrent.

Parmi tous les organes énumérés ci-dessus, le plus lourd fardeau est imposé au foie. Dans le corps, le rôle du foie est extrêmement important:

  1. Pratiquement toutes les réactions métaboliques ont lieu dans le foie (c’est là que se forment tous les types de composants vitaux qui permettent au corps de fonctionner pleinement).
  2. Le foie est le principal organe de désintoxication. Grâce à son aide (notamment via la bile), de nombreux substrats sont éliminés, ce qui peut provoquer une intoxication et avoir des conséquences graves.

Malheureusement, beaucoup de gens ne surveillent pas leur santé, à cause de ce que le foie commence à souffrir. Une hépatite d'étiologies diverses (virale, toxique) se développe généralement.

Définition de l'hépatite

Les hépatites virales occupent une place importante parmi les maladies du foie. La gravité de l'évolution de la maladie, la complexité du traitement les placent en première place parmi les pathologies de l'autre nature de cet organe.

Toutes les hépatites sont divisées en aiguë et chronique. Les hépatites A et B sont classées comme aiguës, parmi les hépatites chroniques C en premier.

Cette maladie est causée par le virus de l’hépatite C. Une des caractéristiques de cette maladie est qu’elle peut durer longtemps sans manifestation clinique.

Il se transmet principalement par le sang. Avec le flux de sang, le virus pénètre dans le foie, où il commence à se multiplier dans ses cellules. L'accumulation de virions entraîne la destruction de l'hépatocyte infecté. En réponse, des anticorps commencent à être produits, lesquels commencent à attaquer les restes d'hépatocytes. De ce fait, un pool contre les cellules hépatiques se développe avec le temps, ce qui aggrave l'évolution de la maladie.

En raison du fait que la maladie est asymptomatique ou asymptomatique et que les signes cliniques n'apparaissent qu'avec des lésions cellulaires importantes, cette maladie nécessite la création de méthodes de diagnostic permettant de détecter sa présence et de prendre les mesures appropriées.

Diagnostic de l'hépatite C: analyses qualitatives et quantitatives

Actuellement, pour le diagnostic de l'hépatite C en utilisant des méthodes telles que la biopsie du foie, l'immunogramme.

Ils vous permettent de déterminer directement la présence d'hépatocytes infectés (échantillon de biopsie du foie) ou d'anticorps spécifiques dirigés contre les cellules affectées (immunogramme). Cependant, il existe une méthode qui vous permet de déterminer de manière fiable la présence du virus lui-même. Cette PCR est une réaction en chaîne de la polymérase.

L'essence de cette méthode réside dans le fait que dans certaines conditions, la production de chaînes d'ARN se produit. Cela est dû au fait qu'il y a des fragments d'une particule virale dans le sang ou dans la biopsie en question. Lors de la connexion de certaines molécules dans le milieu, il se produit une synthèse de chaînes complémentaires à l'ARN viral. Par la suite, lors de leur analyse et de leur comparaison avec la séquence nucléotidique connue du virus de l’hépatite C, il est possible de déterminer si le virus est présent dans le corps et si une atteinte hépatique est présente.

La PCR est effectuée après la détection d'anticorps spécifiques dans le sang contre le virus de l'hépatite. Après le test, le résultat est obtenu - l'ARN est «détecté» ou «non détecté». Parfois, il peut dire «pas assez de matériel» - dans ce cas, il est nécessaire de répéter l'analyse pour l'hépatite C.

Si le nombre de particules virales est inférieur à la quantité minimale requise, nous pouvons alors affirmer qu'il n'y a pas d'hépatite et que des quantités minimales de matériel génétique pourraient être «confondues» en raison du mimétisme du matériel génétique ou de certaines séquences de nucléotides pouvant coïncider avec celui du virus.

  1. Avec la PCR, un résultat négatif peut être observé lorsqu'il y a effectivement des particules virales dans le sang, mais elles sont si petites (une infection est survenue récemment ou l'analyse a été précédée d'un traitement antiviral intensif à long terme) que le système de test n'a tout simplement pas pu déterminer correctement leur concentration. ARN - "non détecté."
  2. Si la PCR a un résultat positif, il y a tellement de particules virales dans le sang que leur nombre dépasse le seuil de sensibilité inférieur du système de test. Dans ce cas, le risque de développer un processus infectieux est élevé (ou il est déjà présent à un stade assez avancé). Habituellement, une quantité élevée de virus est déjà une indication pour le traitement et la greffe de foie ultérieure.

Parfois, un test peut devenir un faux positif ou un faux négatif.

Un résultat de PCR faussement négatif de l'hépatite est observé lorsque certains composants, inhibant la production de copies de la particule virale, sont présents dans le milieu réactionnel. De ce fait, il est impossible d'obtenir une image fidèle de l'état du sang, ce qui contribue au passage du virus et à la progression de la maladie. La présence d'héparine dans le sang peut également affecter la réaction (en réduisant la viscosité relative du sang). Une interprétation erronée de l'analyse est possible même lorsque les conditions de transport et de stockage du matériel soumis à l'enquête n'étaient pas remplies.

Résultats faux positifs, lors du diagnostic de l'hépatite C, PCR le plus souvent lorsque le tube ou l'environnement de travail est contaminé. De plus, des résultats positifs peuvent être observés en présence d'autres groupes de virus de l'hépatite (dus à une réaction croisée).

Analyse qualitative de la PCR pour la détection de l'hépatite C

La présence dans le sang d'un grand nombre de cryoglobulines affecte également directement la conduite de la PCR. Pour cette raison, il est impératif de déterminer leur concentration dans le sang avant de rechercher l'hépatite C afin de détecter la distorsion du résultat à l'avance et de la prévenir.

Après ces tests, il devient clair s'il y a des particules virales dans le sang. Lors de leur détermination, il est recommandé de commencer immédiatement une thérapie antivirale afin de ralentir la progression du processus. Contrairement à l'hépatite B, il n'existe pas de traitement complet contre l'hépatite C; la maladie ne fait que passer au stade latent et commence à progresser plus lentement. Les dommages au foie sont inévitables. À la dernière étape du processus, lorsque le foie ne peut plus assumer sa fonction, il peut être nécessaire de le greffer.

Le traitement s'effectue principalement avec deux médicaments - l'interféron et la ribavirine.

Prouvé leur efficacité pour ralentir le processus de défaite des hépatocytes. En cours de route, la thérapie par perfusion est nécessairement prescrite pour faciliter le travail du foie.

Tous les patients ayant constaté une augmentation du nombre de particules virales dans le sang sont obligatoirement enregistrés auprès d'un hépatologue. Plusieurs fois par an, il leur est recommandé de se soumettre à un examen préventif afin de déterminer la progression du processus et la détection rapide des indications de transplantation. En outre, il est possible d’utiliser des hépatoprotecteurs, bien que les opinions des médecins diffèrent quelque peu. Certains pensent que ces médicaments vous permettent de suspendre le processus et de protéger les hépatocytes non encore affectés. d'autres sont convaincus qu'il est inutile de les prendre et qu'un traitement antiviral intensif devrait être mis en place.

Ainsi, l'hépatite C appartient à la catégorie des maladies, dont l'identification présente certaines difficultés. L’amélioration des méthodes de diagnostic, ainsi que les examens préventifs effectués en temps voulu, permettront de réduire l’incidence de cette maladie. La prévention de cette maladie est importante. Il faut soigneusement éviter le contact avec le sang, refuser de prendre des médicaments, alors seulement cette maladie sera éradiquée. Le principal aspect de la prévention et du traitement est l’attitude consciente du patient à l’égard de sa santé.

PCR non détectée contre l'hépatite C

L'analyse PCR de l'hépatite C est un prélèvement sanguin intraveineux visant à déterminer le virus à ARN de l'hépatite au niveau génétique. L'analyse tire son nom de la méthode de recherche.

La PCR est une réaction en chaîne de la polymérase, utilisée pour déterminer la présence d'hépatite C dans le sérum, le résultat pouvant être positif ou négatif.

Les avantages de la méthode PCR

Cette méthode de diagnostic présente les avantages suivants:

  1. La méthode PCR permet de déterminer les résultats suivants:
    • la présence d'un virus à ARN;
    • degré de rayonnement;
    • information génétique originale;
    • caractère unique et unique des données génétiques.
  2. Vous pouvez utiliser tout matériel clinique nécessaire:
    • du sang;
    • plasma;
    • l'urine;
    • fluides corporels et excréta;
    • crachats et autres.
  3. Vous permet de déterminer dans le sang de plus d'un microorganisme à la fois, contrairement à d'autres échantillons.
  4. Obtenir des résultats dans les 24 heures.
  5. Méthodes simplifiées de stockage et de transport des analyses, les agents pathogènes sont déterminés même dans un environnement mort.
  6. Le caractère unique de la PCR vous permet d’identifier certains micro-organismes qui ne se prêtent à aucun autre échantillon.
  7. Haut degré de sensibilité des réactifs, le test est le plus précis du genre.

Caractéristiques de l'analyse qualitative de la PCR

Un test qualitatif est effectué pour déterminer la présence d'un virus dans le sang et obtenir un résultat négatif ou positif.

L'indication de ce type de diagnostic est la détection d'anticorps anti-hépatite C dans le corps du patient.

Résultats possibles:

  • détecté (positif);
  • non détecté (négatif).

Un test de qualité ne convient pas aux patients présentant une très faible teneur en virus dans le sang, il a donc une certaine sensibilité.

Détecter le virus de l'hépatite C peut se faire quelques semaines après l'infection du corps, même en l'absence d'anticorps dirigés contre cet agent pathogène. Ce résultat indique la présence dans le corps et dans le groupe sanguin d'un fragment d'ARN caractéristique de l'hépatite C.

Le patient est considéré comme infecté par ce virus et subit une propagation supplémentaire de cellules pathogènes dans le corps.

Résultat "non détecté"

Cette option indique qu’il n’ya pas de fragments d’ARN spécifiques à l’hépatite C dans l’échantillon de matériel biologique testé, ce qui est un résultat négatif.

La sensibilité du test ne révélant pas la faible teneur en fragments d'ARN, le résultat «non détecté» n'est pas toujours plausible.

Caractéristiques d'interprétation des résultats

La principale caractéristique de l'interprétation des résultats est le seuil de sensibilité de la méthode PCR.

Cela dépend des indicateurs suivants:

  • exactitude de l'étude;
  • le type et la qualité de l'équipement utilisé.

Il est à noter que la sensibilité peut varier entre 10 et 500 UI / ml. Il en résulte que si un virus est présent dans le corps du patient étudié à une concentration inférieure à 10 UI / ml, le test indiquera le résultat «non détecté». Mais cela ne signifie pas que l'agent pathogène est complètement absent.

Variantes de systèmes de diagnostic

Pour le moment, les options suivantes sont disponibles pour les systèmes de diagnostic:

  1. Si du sang est prélevé sur un patient sous traitement antiviral, des systèmes de diagnostic d’une sensibilité d’au moins 50 UI / ml doivent être utilisés. Les analyseurs suivants sont utilisés à cette fin:
    • Cobas Ampicolor HCV-Test;
    • RealBest ARN du VHC.
  2. Pour établir un diagnostic définitif d '"hépatite C", il est nécessaire de détecter le virus à ARN dans trois échantillons de matériel biologique différents. Ces recommandations sont élaborées par l'Organisation mondiale de la santé. Si le résultat est trois fois négatif, le diagnostic n'est pas confirmé.
  3. À l'heure actuelle, en plus de la méthode PCR, il existe un test plus précis, appelé TMA (méthode d'amplification de la transcription). Son seuil de sensibilité est beaucoup plus élevé que dans d'autres méthodes de diagnostic.

Gamme de modifications de virus détectables

A ce stade du développement génétique, plusieurs types et variantes de modification virale sont connus.

Les diagnostics de laboratoire dans notre pays avec une précision absolue peuvent déterminer les génotypes suivants:

Caractéristiques de l'analyse quantitative par PCR

L'analyse quantitative est la définition du virus de l'hépatite C dans le corps humain. Au cours de l'étude, l'ARN et la charge virale dans le matériel de départ sont déterminés par PCR. Sinon, nous pouvons dire que le test vous permet d'identifier le nombre de cellules virales contenues dans un fluide biologique. Pour ce type d'étude, seul le sang veineux est utilisé. Il n'y a pas de préparation de test spécifique.

L'analyse quantitative vous permet de surveiller le stade du traitement déjà commencé et d'évaluer son efficacité. Pour l'évaluation, les données de test sont prises avant et pendant les interventions thérapeutiques. À l'aide des résultats obtenus, il est possible de prédire l'évolution de la maladie.

Avec le succès de la méthode de traitement choisie après 3 mois, la quantité d’ARN devrait diminuer plusieurs fois. Selon les recommandations, une analyse quantitative est effectuée après un, puis après trois et six mois. Le dernier résultat avec le succès du traitement devrait être négatif.

Evaluation des résultats du test PCR quantitatif

Dans notre pays, il existe 2 options possibles pour évaluer le résultat d’un test PCR quantitatif:

  • le nombre de copies par millilitre de fluide biologique;
  • le nombre d'unités internationales par millilitre.

Pour obtenir des unités internationales, le nombre de copies est divisé par 4.

Il y a 2 niveaux de charge ou virémie:

  • élevé avec PCR supérieure à 800 000 UI / ml;
  • faible avec PCR inférieure à 400 000 UI / ml.

Le résultat du test quantitatif offre 2 options:

  • "En dessous de la plage de mesure";
  • "Non détecté" (négatif).

Note: «en dessous de la plage de mesure»

Une telle conclusion est faite lorsqu'un test quantitatif à l'ARN n'a pas détecté l'agent responsable de l'hépatite C dans le matériau source de la cellule, mais le virus est toujours présent dans le sang. La fiabilité de l'analyse est confirmée par la méthode qualitative, car le seuil de sensibilité du test quantitatif peut ne pas détecter de faibles valeurs et concentrations de l'agent pathogène.

Note: "non détecté"

Une telle conclusion est faite lorsque les virus à ARN de l'hépatite C n'ont pas été détectés dans le matériel source lors du diagnostic, ce qui est un résultat négatif.

Interprétation des résultats de l'analyse du test PCR quantitatif

En utilisant l'indicateur de charge virale, déterminez:

  • le degré de négligence de la maladie;
  • à quel point le patient est contagieux
  • efficacité du traitement antiviral.

Plus le taux de virus de l'hépatite C dans l'organisme est élevé, plus le patient est dangereux pour les autres et plus sa maladie est évolutive.

La PCR de l'hépatite C est une méthode de diagnostic importante, en particulier lors d'interventions thérapeutiques. Grâce aux résultats négatifs ou positifs obtenus, il est possible d'évaluer leur efficacité, de guérir complètement le patient ou de réduire la durée du traitement.

Auteur: Petrunina Svetlana Sergeevna,
infirmière en unité de soins intensifs
spécialisation - intoxication aiguë, réanimation,
spécifiquement pour le site moizhivot.ru

Vidéo utile sur la réaction en chaîne de la polymérase

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Une analyse qualitative de la réaction en chaîne de la polymérase - La PCR pour l'hépatite C détermine la présence ou l'absence de VHC dans le corps. En laboratoire, la structure de l'ARN, incluant le virus, est étudiée. En cas de détection du virus C, il est nécessaire de suivre un traitement, car l’état négligé du foie aura des conséquences graves. Une PCR de haute qualité est également effectuée après la récupération pour confirmer l'absence d'anticorps. Assigné pour l'inspection de routine. Avec une faible concentration de l'agent causal dans le sang, la PCR (qualitative) peut ne rien détecter du fait que le système de diagnostic a ses propres seuils de sensibilité. Dans le cas du stade initial de la maladie ou de la forme bénigne, les ultra-diagnostics par PCR sont effectués sur un équipement ultra-sensible.

Qu'est-ce que le virus à ARN?

Le terme ARN du virus de l'hépatite C (ou ARN du virus de l'hépatite C) désigne la maladie du foie elle-même. Le virus C se lie à la cellule saine du corps en pénétrant à l'intérieur. Au fil du temps, se répandant dans tout le corps, il suffit de pénétrer dans le sang. En conséquence, l'agent pathogène pénètre dans le foie, fusionne avec ses cellules et travaille dur. Les cellules hépatiques (hépatocytes) travaillent sous son influence, subissent des modifications et en meurent. Plus le virus C reste longtemps dans le foie, plus le nombre de cellules meurent. Au fil du temps, développez des maladies dangereuses qui entraînent une dégénérescence maligne et la mort.

L'infection du foie par ce type de virus peut ne pas se manifester de l'extérieur. Pendant de nombreuses années ou décennies, une personne infectée se sent complètement en bonne santé et seul un examen aléatoire révèle le plus souvent une pathologie. Lors du don de sang pour l'hépatite, une partie de la chaîne d'ARN (acide ribonucléique), qui fait partie du gène humain (ADN), est examinée. Les résultats des tests de laboratoire ne doivent pas être utilisés pour l'auto-traitement, car il ne s'agit que d'un indicateur. L'image exacte et le diagnostic ultérieur sont mieux déterminés par le médecin.

Une fois terminé: indications pour la recherche

Pour confirmer le VHC, une analyse PCR est effectuée (réaction en chaîne de la polymérase). Les études de PCR aident à trouver le matériel pathogène dans la structure de l'ARN et à prescrire un traitement efficace. Nommé dans les cas suivants:

  • détection de signes d'inflammation du foie;
  • études de dépistage pour la prévention;
  • examen des personnes en contact;
  • diagnostic d'hépatite d'origine mixte (détermination du principal agent pathogène);
  • déterminer le niveau d'activité de reproduction du virus dans la forme chronique;
  • cirrhose du foie;
  • déterminer l'efficacité du traitement prescrit.

Les études de PCR sont prescrites par un médecin afin de déterminer l'efficacité d'un traitement pour l'hépatite.

Il existe une analyse qualitative et quantitative de la PCR. La PCR quantitative montre le ratio de pourcentage d'ARN par le nombre de porteurs de virus dans le sang et qualitative indique la présence ou l'absence de virus. Un indicateur de qualité positif (présence d'ARN de l'hépatite C) nécessite également des recherches quantitatives. Un niveau élevé de concentration de l'agent responsable de l'hépatite C est associé au risque de transmission, c'est-à-dire d'infection de tiers. Un faible nombre est mieux traitable. La quantité de virus à ARN dans le sang n’est pas liée à l’intensité de la maladie. Une analyse par PCR est également effectuée dans le cas d'un traitement par interféron afin de prescrire la durée et la complexité du traitement.

Caractéristiques de l'analyse PCR de haute qualité pour l'hépatite C

Une analyse qualitative avec l'indice de réaction en chaîne de la polymérase est attribuée à tous les patients présentant des anticorps dans le sang pour l'hépatite C. Ceux qui ont été guéris et qui sont guéris doivent repasser le test. Il est recommandé de réussir le test de dépistage de l'hépatite B, puis, en cas de conclusion positive, et de l'hépatite D. En outre, la réaction analysée qualitativement doit être réalisée en association avec d'autres tests sanguins. Les analyses fourniront une image complète de la propagation virale.

D'après les résultats du test, seul un test positif pour l'hépatite C sera visible ou négatif, c'est-à-dire la présence ou l'absence d'un virus. Si la sortie est "détectée", le virus est et reste actif. La désignation "non détecté" indique l'absence de virus ou sa petite quantité. Avec cet indicateur, il convient de garder à l'esprit que la sensibilité analytique des systèmes de diagnostic est différente et que l'hépatite C à ARN peut encore être dans le sang, mais ne se manifeste pas dans l'analyse.

La méthode PCR particulièrement sensible ultra-hépatite C révèle même de faibles quantités. Une étude d'hybridation par fluorescence est utilisée, qui est plusieurs fois supérieure aux systèmes de PCR standard. La méthode est utilisée dans plusieurs cas:

  • formes présumées cachées de l'hépatite C;
  • Le diagnostic PCR n'a pas confirmé l'agent pathogène, mais il existe des anticorps.
  • en cas de récupération;
  • détecter une infection précoce.

Analyse de décodage

Détermination de l'ARN du virus de l'hépatite C par réaction en chaîne de la polymérase.

Le décodage PCR du VHC affecte la décision finale lors du diagnostic, en particulier avec la méthode ultramétode. Le principal inconvénient de cette étude est le strict respect des conditions de stérilité pour l’échantillon et le matériel. Une légère déviation montre parfois des conclusions analytiques inexactes, complique le diagnostic et le traitement ultérieur. L'analyse de la PCR pour la détermination de l'ARN de l'hépatite ne donne pas toujours une image fiable de la maladie, des imprécisions sont parfois permises, et dans les deux sens.

Pour diagnostiquer le virus de l'hépatite, il est recommandé d'utiliser un examen complet.

Norme des indicateurs

L’absence d’anticorps JgM contre l’hépatite virale C dans les résultats de l’étude est considérée comme la norme dans l’analyse de la réaction en chaîne de la polymérase. Dans le même temps, les résultats de l'analyse sérologique indiquent la présence d'anticorps anti-virus C, ce qui se situe également dans les limites de la normale. Une définition qualitative ne montre pas l’intensité de la maladie, elle révèle seulement l’agent responsable de l’hépatite C dans l’ARN. Cette analyse est répétée après le traitement pour confirmer la récupération réelle.

Déviations

Si des anticorps anti-JVM anti-JVM sont présents, cela indique une infection en développement. La maladie dans le même temps se développe de manière aiguë ou chronique, se manifestant à différents stades. Si une diminution du nombre d'anticorps est enregistrée, l'analyse indiquera que les résultats du traitement ont été obtenus pendant la récupération. Le diagnostic ne révèle que de très rares cas de faux positifs. On les trouve chez les femmes pendant la grossesse et chez les personnes atteintes d'autres maladies infectieuses.

Analyse qualitative de l'hépatite C

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Une analyse qualitative de la réaction en chaîne de la polymérase - La PCR pour l'hépatite C détermine la présence ou l'absence de VHC dans le corps. En laboratoire, la structure de l'ARN, incluant le virus, est étudiée. En cas de détection du virus C, il est nécessaire de suivre un traitement, car l’état négligé du foie aura des conséquences graves. Une PCR de haute qualité est également effectuée après la récupération pour confirmer l'absence d'anticorps. Assigné pour l'inspection de routine. Avec une faible concentration de l'agent causal dans le sang, la PCR (qualitative) peut ne rien détecter du fait que le système de diagnostic a ses propres seuils de sensibilité. Dans le cas du stade initial de la maladie ou de la forme bénigne, les ultra-diagnostics par PCR sont effectués sur un équipement ultra-sensible.

Qu'est-ce que le virus à ARN?

Le terme ARN du virus de l'hépatite C (ou ARN du virus de l'hépatite C) désigne la maladie du foie elle-même. Le virus C se lie à la cellule saine du corps en pénétrant à l'intérieur. Au fil du temps, se répandant dans tout le corps, il suffit de pénétrer dans le sang. En conséquence, l'agent pathogène pénètre dans le foie, fusionne avec ses cellules et travaille dur. Les cellules hépatiques (hépatocytes) travaillent sous son influence, subissent des modifications et en meurent. Plus le virus C reste longtemps dans le foie, plus le nombre de cellules meurent. Au fil du temps, développez des maladies dangereuses qui entraînent une dégénérescence maligne et la mort.

L'infection du foie par ce type de virus peut ne pas se manifester de l'extérieur. Pendant de nombreuses années ou décennies, une personne infectée se sent complètement en bonne santé et seul un examen aléatoire révèle le plus souvent une pathologie. Lors du don de sang pour l'hépatite, une partie de la chaîne d'ARN (acide ribonucléique), qui fait partie du gène humain (ADN), est examinée. Les résultats des tests de laboratoire ne doivent pas être utilisés pour l'auto-traitement, car il ne s'agit que d'un indicateur. L'image exacte et le diagnostic ultérieur sont mieux déterminés par le médecin.

Une fois terminé: indications pour la recherche

Pour confirmer le VHC, une analyse PCR est effectuée (réaction en chaîne de la polymérase). Les études de PCR aident à trouver le matériel pathogène dans la structure de l'ARN et à prescrire un traitement efficace. Nommé dans les cas suivants:

  • détection de signes d'inflammation du foie;
  • études de dépistage pour la prévention;
  • examen des personnes en contact;
  • diagnostic d'hépatite d'origine mixte (détermination du principal agent pathogène);
  • déterminer le niveau d'activité de reproduction du virus dans la forme chronique;
  • cirrhose du foie;
  • déterminer l'efficacité du traitement prescrit.
Les études de PCR sont prescrites par un médecin afin de déterminer l'efficacité d'un traitement pour l'hépatite.

Il existe une analyse qualitative et quantitative de la PCR. La PCR quantitative montre le ratio de pourcentage d'ARN par le nombre de porteurs de virus dans le sang et qualitative indique la présence ou l'absence de virus. Un indicateur de qualité positif (présence d'ARN de l'hépatite C) nécessite également des recherches quantitatives. Un niveau élevé de concentration de l'agent responsable de l'hépatite C est associé au risque de transmission, c'est-à-dire d'infection de tiers. Un faible nombre est mieux traitable. La quantité de virus à ARN dans le sang n’est pas liée à l’intensité de la maladie. Une analyse par PCR est également effectuée dans le cas d'un traitement par interféron afin de prescrire la durée et la complexité du traitement.

Caractéristiques de l'analyse PCR de haute qualité pour l'hépatite C

Une analyse qualitative avec l'indice de réaction en chaîne de la polymérase est attribuée à tous les patients présentant des anticorps dans le sang pour l'hépatite C. Ceux qui ont été guéris et qui sont guéris doivent repasser le test. Il est recommandé de réussir le test de dépistage de l'hépatite B, puis, en cas de conclusion positive, et de l'hépatite D. En outre, la réaction analysée qualitativement doit être réalisée en association avec d'autres tests sanguins. Les analyses fourniront une image complète de la propagation virale.

D'après les résultats du test, seul un test positif pour l'hépatite C sera visible ou négatif, c'est-à-dire la présence ou l'absence d'un virus. Si la sortie est "détectée", le virus est et reste actif. La désignation "non détecté" indique l'absence de virus ou sa petite quantité. Avec cet indicateur, il convient de garder à l'esprit que la sensibilité analytique des systèmes de diagnostic est différente et que l'hépatite C à ARN peut encore être dans le sang, mais ne se manifeste pas dans l'analyse.

La méthode PCR particulièrement sensible ultra-hépatite C révèle même de faibles quantités. Une étude d'hybridation par fluorescence est utilisée, qui est plusieurs fois supérieure aux systèmes de PCR standard. La méthode est utilisée dans plusieurs cas:

  • formes présumées cachées de l'hépatite C;
  • Le diagnostic PCR n'a pas confirmé l'agent pathogène, mais il existe des anticorps.
  • en cas de récupération;
  • détecter une infection précoce.
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Analyse de décodage

Le décodage PCR du VHC affecte la décision finale lors du diagnostic, en particulier avec la méthode ultramétode. Le principal inconvénient de cette étude est le strict respect des conditions de stérilité pour l’échantillon et le matériel. Une légère déviation montre parfois des conclusions analytiques inexactes, complique le diagnostic et le traitement ultérieur. L'analyse de la PCR pour la détermination de l'ARN de l'hépatite ne donne pas toujours une image fiable de la maladie, des imprécisions sont parfois permises, et dans les deux sens.

Pour diagnostiquer le virus de l'hépatite, il est recommandé d'utiliser un examen complet.

Norme des indicateurs

L’absence d’anticorps JgM contre l’hépatite virale C dans les résultats de l’étude est considérée comme la norme dans l’analyse de la réaction en chaîne de la polymérase. Dans le même temps, les résultats de l'analyse sérologique indiquent la présence d'anticorps anti-virus C, ce qui se situe également dans les limites de la normale. Une définition qualitative ne montre pas l’intensité de la maladie, elle révèle seulement l’agent responsable de l’hépatite C dans l’ARN. Cette analyse est répétée après le traitement pour confirmer la récupération réelle.

Déviations

Si des anticorps anti-JVM anti-JVM sont présents, cela indique une infection en développement. La maladie dans le même temps se développe de manière aiguë ou chronique, se manifestant à différents stades. Si une diminution du nombre d'anticorps est enregistrée, l'analyse indiquera que les résultats du traitement ont été obtenus pendant la récupération. Le diagnostic ne révèle que de très rares cas de faux positifs. On les trouve chez les femmes pendant la grossesse et chez les personnes atteintes d'autres maladies infectieuses.

Etude PCR pour l'hépatite C: types, indications, transcription

L'hépatite virale C est une maladie grave qui se manifeste par des lésions du foie. Chez 80% des patients, cela devient chronique. Le virus se multiplie dans les cellules du foie - les hépatocytes - et provoque leur mort. Le tissu mort est remplacé par des foyers de tissu conjonctif, une fibrose se développe.

Au fur et à mesure que la fibrose se développe, le foie est incapable d'exercer ses fonctions, la cirrhose du foie commence, ce qui est dangereux en raison de ses complications: pression accrue dans la veine porte, saignements gastro-intestinaux, insuffisance de la coagulation sanguine, changements mentaux dus à des lésions des noyaux cérébraux.

La cause de la maladie est une infection par un virus de la famille des Flaviviridae, appartenant au type des virus à ARN. Cela signifie que le matériel génétique par lequel les protéines de l'agent pathogène sont synthétisées est codé dans la molécule d'acide ribonucléique. L'infection se produit par le sang, sexuellement et d'une femme enceinte jusqu'au fœtus. Malheureusement, un délai suffisamment long peut s'écouler entre l'infection et le début de la production d'anticorps - de deux semaines à six mois. Cela ne permet pas de déterminer l'infection par la méthode de dosage immunologique et de commencer le traitement à un stade précoce.

Qu'est-ce que l'analyse PCR?

La PCR est une méthode d'analyse moléculaire qui permet de détecter le matériel génétique de l'agent pathogène dès la première semaine après l'infection en utilisant une réaction en chaîne de la polymérase. L'étude a une spécificité et une précision élevées et permet non seulement de déterminer la présence ou l'absence du virus, mais également sa concentration et son génotype.

Pour l'étude, le sang d'un patient est prélevé dans lequel l'ARN du virus peut potentiellement être localisé. Des amorces sont ajoutées aux régions synthétisées artificiellement dans le sang du gène de petite longueur souhaité, et l’ARN polymérase est une enzyme spéciale qui augmente de façon répétée la quantité de matériel génétique de l’agent pathogène. À l'aide d'un appareil spécial, plusieurs cycles de chauffage et de refroidissement sont effectués. Ensuite, le matériel est analysé et comparé aux gènes connus du virus, sur la base desquels une conclusion est formulée à propos de la présence ou de l'absence d'infection.

Types d'analyse PCR pour l'hépatite C

Il existe trois types d'analyse PCR:

  1. Analyse qualitative de la PCR. La première étape de l'étude. Cela vous permet d'identifier le matériel génétique du virus dans le sang.

  • Analyse quantitative de la PCR. Vous permet de déterminer la charge virale - la concentration du matériel génétique de l'agent pathogène dans un millilitre de sang. Cette étude est réalisée avant le début du traitement, puis au cours de la première, quatrième, douzième et (si le cours est long) vingt-quatrième semaine de traitement pour évaluer son efficacité.

  • Génotypage L'agent causal de l'hépatite C mute souvent et rapidement. Sept variantes de ce génotype du virus ont été trouvées sur la planète. En Russie, les premier, deuxième et troisième types sont courants. La résistance au traitement de chacun des génotypes est différente. Par exemple, l'efficacité du traitement du premier type est de soixante pour cent et, pour les deuxième et troisième, elle atteint quatre-vingt-cinq. Par conséquent, afin de sélectionner les médicaments appropriés et de prescrire un traitement d'une durée suffisante, il est nécessaire de déterminer exactement le type de virus avec lequel le patient est infecté.
  • Indications pour l'analyse PCR de l'hépatite C

    L'étude PCR est prescrite dans les cas suivants:

    • contact avec une personne malade au cours de laquelle une infection pourrait survenir;
    • dosage immunoenzymatique positif;
    • signes de cirrhose: modifications de la taille du foie, hypertrophie de la rate, apparition sur l'abdomen du plexus veineux sous-cutané;
    • l'apparition de symptômes de dommages au foie: douleur à l'abdomen droit, jaunissement de la peau;
    • augmentation de l'activité de l'ALT et de l'AST dans l'analyse biochimique du sang;
    • avant de commencer le traitement pour déterminer la charge virale;
    • surveiller l'efficacité du traitement antiviral;
    • après le traitement pour contrôler la rechute;
    • en présence d'hépatite B diagnostiquée, pour exclure les dommages mixtes au foie.

    Explication des études PCR sur l'hépatite C

    Le décodage de l'analyse PCR et du dosage immunoenzymatique de l'hépatite C doit être effectué par un hépatologue ou un spécialiste des maladies infectieuses. L'analyse des résultats de la PCR est nécessaire en combinaison avec les données d'analyse biochimique du sang, de la biopsie et des ultrasons. Seul un médecin qualifié sera en mesure d'analyser les résultats de la recherche et, sur cette base, de prescrire le traitement approprié.

    Décodage de l'analyse qualitative.

    Dans le matériel biologique analysé trouvé le matériel génétique de l'agent pathogène. Infection confirmée.

    L'infection est absente ou la quantité d'ARN de l'agent pathogène est inférieure à la limite de sensibilité.

    Décodage de l'analyse quantitative.

    Taux normal pour les personnes en bonne santé. Cela signifie qu'il n'y a pas d'ARN de l'hépatite C dans le matériel étudié ou que sa concentration est inférieure au seuil de sensibilité de l'étude.

    La concentration en ARN est inférieure à la plage de quantification. Ces résultats sont interprétés très soigneusement, corrélés avec les données d’autres études, souvent ré-étudiées.

    Le niveau de charge virale à une concentration donnée est considéré comme faible. Habituellement, une diminution de la quantité de virus signifie que le traitement est efficace.

    Plus de 8 * 10 ^ 5 UI / ml

    Le niveau de charge virale à une concentration donnée est considéré comme élevé.

    Plus de 2,4 * 10 ^ 7 UI / ml

    La quantité d'ARN au-dessus de la limite supérieure de la plage de quantification. Il est impossible de tirer des conclusions sur le degré de charge virale avec ce résultat. Habituellement, dans de tels cas, le test est répété avec la dilution d'un échantillon de sang.

    Décoder le génotypage.

    ARN détecté d'un génotype spécifique

    Le virus de l'hépatite C d'un certain génotype et sous-type a été détecté dans le biomatériau. Le résultat est codé en chiffres romains et en lettres latines, par exemple - 1a, 2b. Au total, il y a sept génotypes et soixante-sept sous-types, cependant, en Russie, il n'y a que trois premiers types.

    ARN du virus de l'hépatite C détecté

    L'ARN a été trouvé dans le sang d'un génotype rare pour la Russie, qui ne peut être attribué au premier, deuxième ou troisième type. Plus de recherche est nécessaire.

    Ce résultat indique que le patient est en bonne santé ou que la quantité d'ARN de l'agent pathogène est trop petite.

    Il est possible que l'analyse PCR de l'hépatite C soit négative et que le test d'immunosorbant lié à une enzyme reconnaisse les anticorps contre le virus. Cela signifie que le patient a eu l'hépatite C aiguë et a guéri par lui-même. Environ vingt cas d’infection entraînent une guérison spontanée si le corps du patient présente une résistance suffisante à l’infection.

    Bien que la PCR soit une analyse extrêmement précise, ses résultats peuvent être faussés dans les situations suivantes:

    • le sang a été transporté au laboratoire dans des conditions inappropriées, la température a été violée;
    • l'échantillon de biomatériau était contaminé;
    • il y avait des traces résiduelles d'héparine et d'autres anticoagulants dans le sang;
    • Les investigateurs se sont révélés être des inhibiteurs - des substances qui ralentissent ou arrêtent la réaction en chaîne de la polymérase.

    Les avantages de la PCR par rapport aux autres méthodes

    1. Diagnostic dans les premiers stades. La PCR détecte le matériel génétique de l'agent causal. En utilisant l'analyse par immunofluorescence, seules les immunoglobulines peuvent être déterminées - les substances que l'organisme produit en réponse à une infection. En cas d'infection par l'hépatite C, l'intervalle entre l'infection et le début de la réponse immunitaire peut être de plusieurs semaines et plusieurs mois. À ce stade, l'ELISA sera inefficace. La PCR donnera une réponse dans la première semaine après l'infection.

  • Faible probabilité d'erreur. Dans le matériel à l’étude, déterminez l’aire de matériel génétique qui n’est caractéristique que d’un seul type de pathogènes. Cela élimine les faux résultats. Lorsque des erreurs ELISA sont possibles, étant donné que le même type d'anticorps peut être libéré contre différents virus, ces anticorps sont appelés anticorps croisés.

  • Haute sensibilité. La PCR permet de détecter l'ARN de l'agent causal même en quantités minimes. Cela permet d'identifier les infections cachées.
  • Comment se préparer au don de sang pour les études PCR

    Pour l'analyse PCR de l'hépatite C, du sang veineux est collecté. Habituellement, deux portions de sang sont prélevées dans la veine du patient à la fois: la première est envoyée pour la PCR et la seconde par ELISA. Cela a pour but d'évaluer plus précisément le degré d'infection d'un patient par un virus et la manière dont l'immunité lutte contre ce virus.

    Habituellement, le patient est tenu de respecter les règles suivantes:

    • une prise de sang est prise le matin;
    • L'intervalle entre le dernier repas et le don de sang devrait être de huit à dix heures.
    • deux ou trois jours avant l'analyse, il est nécessaire d'abandonner les aliments frits et gras, ainsi que l'alcool;
    • pendant vingt-quatre heures avant l'analyse, le patient doit éviter tout effort physique: ne portez pas de poids, n'allez pas au gymnase ni à la piscine.

    Hépatite avec pcr non détectée

    Le virus de l'hépatite C (VHC) est responsable d'environ 20% des hépatites aiguës, de 60 à 70% des hépatites chroniques et d'environ 30% des cas de cirrhose et de cancer du foie. Le VHC, découvert en 1989, est un virus à ARN du genre Flavivirus de la famille des Togaviridae, d’une taille de 40 à 60 nm, avec une prédominance du contenu lipidique. Il existe au moins 6 génotypes et 50 sérotypes du VHC. La connaissance du génotype ou du sérotype (anticorps de génotype spécifique) du VHC est utile pour recommander et prescrire un traitement. Le VHC se transmet par contact avec du sang contaminé ou des produits sanguins contaminés: transfusions sanguines, utilisation d'aiguilles et de seringues après une autre personne, sans stérilisation ou mal stérilisés, tatouages, vaccination avec du matériel non stérilisé, partage d'une brosse à dents, d'une trousse de rasage, d'une pince à épiler, d'un ensemble de manucure. Présent dans les milieux biologiques (salive, lait, pertes vaginales, sperme, etc.), mais à une concentration inférieure à celle du virus B. Peut être transmis de la mère au fœtus. Le niveau de transmission verticale chez les femmes enceintes positives pour l'anti-VHC est estimé entre 2,7 et 4,4%. Ce chiffre atteint une valeur de 5,4 à 8,6% chez les femmes enceintes co-infectées par le VHC et le VIH. Environ 85% de la forme aiguë devient chronique. Un carcinome hépatocellulaire peut survenir chez environ 20% des patients atteints de cirrhose du foie (en moyenne plus de 30 ans) et 1 à 5% d’entre eux sont infectés par le VHC.


    L'apparition de la maladie est insidieuse, le virus s'appelle une bombe à retardement ou un tueur affectueux. Les fenêtres sérologiques entre la présence du VHC et la détection des anti-VHC varient selon les patients. Les tests immunologiques actuels détectent les anticorps en moyenne 7 à 8 semaines après le début de la maladie. En cas de rétablissement spontané, l'anticorps anti-VHC peut persister toute la vie ou diminuer progressivement pour disparaître au cours de plusieurs années. Chez les patients présentant une infection anti-VHC chronique, ils persistent indéfiniment. Parmi la population à faible risque, le nombre de personnes qui abandonnent le diagnostic est compris entre 0,5 et 1%.


    L'analyse de l'ARN du VHC (définition de l'ARN du virus de l'hépatite C), souvent appelée analyse PCR de l'hépatite C, est un test sanguin qui révèle directement le matériel génétique du virus de l'hépatite (chaque virus est une particule d'ARN). Ce test est le plus souvent effectué par PCR, d’où le nom PCR pour l’hépatite C. Il existe des tests qualitatifs et quantitatifs pour l’ARN du VHC.


    L'analyse qualitative indique la présence d'un virus dans le sang. Ce test doit être effectué pour tous les patients présentant des anticorps anti-hépatite C. Son résultat peut être détecté ou non. Valeurs de référence (valeur qui devrait être normale) non détectées. Un résultat trouvé peut indiquer que le virus se multiplie et infecte toutes les nouvelles cellules du foie. Un test PCR qualitatif a une certaine sensibilité. Cela signifie que si le virus est présent dans le sang à une très faible concentration (inférieure au seuil de sensibilité de la méthode), aucun résultat ne peut être obtenu. Par conséquent, lors de l'exécution d'une PCR de haute qualité chez des patients présentant une virémie basse (concentration virale), par exemple, sous traitement antiviral, il est important de connaître la sensibilité du système de diagnostic. Pour contrôler la réponse virologique au cours du traitement antiviral, il est souhaitable d’utiliser un système de diagnostic avec une sensibilité d’au moins 50 UI / ml.

    Préparer le patient: don de sang à jeun

    Matériel: plasma sanguin.

    L'hépatite C

    Bonjour, j'ai posé une question plus tôt, mais je n'ai pas reçu de réponse. aider à comprendre le problème; À la fin du mois de novembre 2010, au cours de la deuxième grossesse de 35 semaines, des cas de séropositivité anti-HVC sont arrivés, le médecin envoyé au virus PCR-ARN n’a pas été détecté. À ce moment-là, on m'a administré de la cholestase sur le fond de la grossesse (démangeaisons des pieds et des paumes la nuit, élévation de la température, asat, shch.). La peau ne jaunissait pas, les excréments et l'urine étaient normaux. Après avoir bu, les indicateurs ursosan sont revenus à la normale, les démangeaisons ont disparu. Ils ont dit qu'après la naissance, tout passera. après l'accouchement, tous les indicateurs sont normaux, mais parce que Virus à ARN négatif alors personne n'est revenu à ma question. Après 8 mois, l'analyse de l'anti-hcv-0.91 est non réactive. Sur ce je me suis calmé. Après 2 ans et 4 mois, le 12 mars, une légère démangeaison des paumes et des pieds est apparue, une gêne élevée dans l'hypochondre.à droite - la papille duodénale est enflée, il n'y a pas de passage de la bile dans le duodénum. biochimie sanguine, bilirubine 15-3, alt-14, ast-20, total. protéine-70, uric to-ta-293, urée-5,6, cholest-4,6, schf-59, gttp-18, s-react. protéine-2. Glycémie 4,2, échographie de la cavité abdominale sans pathologies (anatomie. Courbure de la galle dans la région cervicale). les marqueurs des hépatites B et A sont négatifs et anti-hcv-28,51 est réactif. A partir du 25 mars, aucune analyse de pcr-ARN du virus de l'hépatite C n'a été détectée (dans 2 laboratoires différents). Dites-moi ce qui ne va pas chez moi et ai-je l'hépatite C si, depuis les premiers anticorps détectés (2,5 ans), l'ARN n'a jamais été retrouvé? Aide avec la réponse, j'ai 2 petits enfants.

    Vous êtes en bonne santé, il n’ya pas de virus dans le corps, les anticorps restent - c’est la mémoire immunitaire. Cordialement, l'hépatologue Stepanvoa T.V.

    Bonjour docteur, merci pour la réponse! Say est venu avec un test détaillé des anticorps anti-hépatite et ce que cela signifie: le spectre est positif, dans le spectre des anticorps-igG cor-pos. igGns3-neg. igGNs4 et igGNs5-négatif. La nuit, la douleur à droite est dérangeante, comme si je marchais, je bois du Hofitol, de l’Ursosan, les démangeaisons des pieds et des paumes s’atténuent. et cette douleur peut-elle être sur le fond de l'exacerbation de la cholestase et de l'œdème BDS et de l'absence de passage de la bile? Et à quelle fréquence dois-je effectuer une PCR pour déterminer l'ARN du virus du VHC? Docteur, dites-moi pourquoi, dans l’année, l’indicateur est ti-hcv-0.91 et en mars, il est -28,51? Aide et c'est complètement confus!

    La quantité d'anticorps fluctue constamment, il ne joue pas un rôle diagnostique. Plus important encore, le virus à ARN n'est pas détecté en vous pendant longtemps. La douleur est causée par un dysfonctionnement du sphincter d’Oddi, vous prenez correctement des médicaments cholérétiques. Sur l'ARN du virus, vous ne pouvez pas faire un don s'il n'y a aucune possibilité d'infection (chirurgie, dentiste, manucure, pédicure). Cordialement, l'hépatologue Stepanova T.

    Bonjour docteur, merci pour la réponse! Je voulais clarifier: peut rester négatif pendant 2, 5 ans avec une quantité très minime de virus (le seuil de sensibilité de la PCR ne le lit pas). c'est-à-dire, est-ce dans le corps ou pas du tout (si l'arn n'est pas détecté) et les anticorps devraient-ils disparaître du corps au fil du temps? Pendant 5 ans, notre spécialiste des maladies infectieuses m'a demandé de procéder à une PCR et à une analyse des anticorps. S'ils disparaissent et que la PCR est toujours négative, le diagnostic est posé. Si les anticorps sont une mémoire immunitaire, après quelle heure vont-ils disparaître et pourquoi leur gamme fluctue-t-elle?

    Personne ne sait si les anticorps vont disparaître avec le temps ou non. J'ai vu beaucoup de gens qui avaient des anticorps contre le virus de l'hépatite C et l'ARN était constamment négatif depuis plus de 10 ans et ils ne menaient pas du tout un mode de vie sain. Cela suggère qu'il n'y a pas de virus dans le corps. Hépatologue Stepanova T, V.

    Docteur aide douce! A remis Hbs Ag-non réactif. le spécialiste des maladies infectieuses aurait été vacciné contre l'hépatite B et aurait transmis des AgHBe et des anti-HBcor (IgM et IgG). Hier, j'ai passé: HBeAg - 0.047 - non réactif, anti-HBcor (total) - résultat 10.0 - réactif. Docteur tous les tests de biochimie sont énumérés ci-dessus. Dis moi. Est-il possible qu'en plus des anticorps anti-hépatite C, je sois atteint d'hépatite B? Que dois-je faire ensuite?

    Non, vous êtes en bonne santé, mais pour comprendre la faisabilité de la vaccination contre l'hépatite B, vous devez passer un test sanguin pour déterminer la quantité d'anticorps anti-HBsAG du virus de l'hépatite B. Cordialement, l'hépatologue Stepanova T.V.

    A propos de l'auteur du site

    Stepanova Tatiana Vladimirovna médecin - hépatologue, gastro-entérologue, pneumologue, thérapeute de la plus haute qualification, membre actif de l'EASL (Association européenne pour l'étude du foie), possède un certificat international de chercheur du standard GCP (bonne pratique clinique), lieutenant-colonel du service médical.

    En 1996, elle a obtenu son diplôme de la faculté de médecine militaire de l'Université de médecine de Saratov. Elle a été envoyée à Yuzhno-Sakhalinsk en tant que stagiaire senior à l'hôpital Garrison, où elle a traité pendant sept ans des patients atteints d'une pathologie thérapeutique grave: pneumonie, asthme bronchique, infarctus du myocarde, hypertension, ulcère peptique, hépatite et cirrhose du foie.

    En 2001, elle a suivi un recyclage professionnel en pneumologie, en 2003 - en gastroentérologie et en hépatologie.

    De 2003 à 2006, elle a étudié en stage clinique à l'Institut d'État pour l'avancement des médecins du ministère de la Défense de la Fédération de Russie.

    Depuis 2003, le principal domaine de pratique est la gastro-entérologie et l'hépatologie.

    Depuis 2003, il participe aux essais cliniques de nouveaux médicaments pour le traitement des patients atteints d’infections hépatotropes virales conformément aux règles internationales GCP. Total a mené 15 études cliniques. Elle dirige actuellement une étude clinique visant à évaluer l'innocuité et l'efficacité d'un nouveau médicament pour traiter l'hépatite virale B. En 2009, la Commission de la FDA a hautement apprécié le travail d'un centre de recherche dont Tatyana Vladimirovna Stepanova est la chercheuse principale.

    Depuis 2003, elle traite des patients atteints d'hépatite virale et a acquis une expérience considérable dans le traitement des patients avec des médicaments antiviraux. Il connaît parfaitement le problème du traitement des patients atteints d'hépatite virale avec des maladies associées: diabète, hypertension, maladie rénale, asthme, psoriasis, arthrite, VIH, toxicomanie et alcoolisme. Conduit un traitement antiviral pour les patients atteints de cirrhose du foie compensée et décompensée. Il est engagé dans le traitement des femmes enceintes présentant une pathologie du foie.

    En raison de ses connaissances approfondies en matière de thérapie et de la combinaison efficace de médicaments, elle a développé ses propres schémas thérapeutiques pour les patients, ce qui a permis de récupérer environ 90% des patients ayant appliqué une hépatite virale. Dans son activité thérapeutique utilise les principes de la médecine factuelle. Contrôle habilement les effets secondaires des médicaments antiviraux: diminution du nombre de plaquettes, de leucocytes, de dépression et d’autres troubles, de sorte que presque personne n’arrête prématurément le traitement antiviral.

    Il parle couramment la technique de la biopsie du foie. Effectué plus de 300 biopsies.

    Depuis 2004, il travaille constamment comme consultant sur les principaux sites d'hépatologie. Elle a répondu à plus de 20 000 questions sur les maladies du foie. Fournit souvent une assistance professionnelle dans le traitement des patients hépatologiques à des collègues de diverses régions de notre pays, proches et lointains de l'étranger.

    Tatyana Vladimirovna est souvent invitée à participer aux programmes de télévision médicale populaires en tant qu’expert médical.

    La responsabilité, la compétence et le haut professionnalisme le caractérisent dans la pratique médicale.

    Les caractéristiques personnelles peuvent être jugées par un fait caractéristique: ses patients ne consultent jamais un autre médecin.

    L'article sur le docteur Stepanova Tatyana Vladimirovna est placé dans l'encyclopédie «Les meilleurs habitants de Russie» dans la section «Médecine et soins de santé».


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